淺談農(nóng)殘快速檢測技術(shù)及常見問題的解決方法

姜紅巖

當(dāng)前，安徽阜陽農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程主要使用氨基甲酸酯、有機(jī)磷等農(nóng)藥，部分農(nóng)藥可殘留在蔬果外表。此類農(nóng)產(chǎn)品和生物體內(nèi)Ache（全稱為“乙酰膽堿酯酶”）結(jié)合，導(dǎo)致酶活性受到抑制，致使人出現(xiàn)中毒癥狀。將蔬菜和Ache之間進(jìn)行萃取反應(yīng)，可檢測出農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留情況。但是，應(yīng)用此檢測技術(shù)，可能存在干擾因素，影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性，因此，探索出檢測技術(shù)的問題的處理方式十分重要。

1、農(nóng)殘快速檢測技術(shù)應(yīng)用流程

（1）準(zhǔn)備階段

準(zhǔn)備階段，需要結(jié)合檢測要求，合理選擇檢測儀器，對儀器進(jìn)行自檢，保證其功能良好。同時(shí)檢測過程需要利用信息技術(shù)，運(yùn)用檢測系統(tǒng)，保證信息獲取的真實(shí)性。選擇智云達(dá)ZYD-NP6D檢測儀，該儀器光源穩(wěn)定，有多個(gè)通道，帶液晶顯示屏，能夠?qū)κ吖械陌被姿狨ヮ愞r(nóng)藥快速檢測。自檢過程先預(yù)熱10～15min，保證光源的穩(wěn)定性，同時(shí)登陸農(nóng)殘快檢系統(tǒng)，設(shè)置端口和檢測儀相連，并將之前檢測的參數(shù)值、檢測信息等清除。

（2）制備對照液并測試

對照液的制備過程，選擇緩沖液2.5mL，酶100uL，將二者加入到比色皿當(dāng)中，待其均勻混合之后，將100uL的顯色劑添加其中，并添加底物20uL。將所有物質(zhì)搖勻之后，放置于比色皿當(dāng)中展開對照測試，合理的結(jié)果區(qū)間為0.3～0.8，一旦超出此范圍，即代表操作環(huán)節(jié)存在問題，或者顯色的時(shí)間較長，此時(shí)，需要重復(fù)上述準(zhǔn)備流程，重新制備，直到結(jié)果合格。

（3）錄入信息

在檢驗(yàn)環(huán)節(jié)，需要將待檢驗(yàn)產(chǎn)品的名稱以及檢測標(biāo)準(zhǔn)等重點(diǎn)信息全面地錄入到檢測系統(tǒng)當(dāng)中，保證整個(gè)檢測過程具備專業(yè)信息支持，提高結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證農(nóng)殘快檢過程可順利得到預(yù)期效果，為檢測過程技術(shù)的順利應(yīng)用提供信息保障。

（4）制備檢測液

選擇2g待檢樣品，若為蔬菜，可剪成邊長為1cm的方片，若為瓜果可切成1cm正方體，將其置于三角瓶當(dāng)中，向其中添加10mL的緩沖液，之后振蕩2min，過濾出清液作為待測試液。選擇100uL酶放入比色皿當(dāng)中，加入2.5mL待測液，混合均勻之后靜置10min，向其中添加100uL顯色劑，并加20uL底物。將比色皿蓋上，之后上下顛倒2次，將其置于儀器當(dāng)中測試。

（5）判定結(jié)果

對于農(nóng)殘快檢結(jié)果的判定，主要有以下三種情況：第一，當(dāng)樣品抑制率<50%，即可說明，被檢測的農(nóng)產(chǎn)品中存在較少的農(nóng)藥殘留量，即樣品檢測結(jié)果“合格”。第二，當(dāng)樣品抑制率≥50%時(shí)，此時(shí)說明被檢測的農(nóng)產(chǎn)品中含有較高的農(nóng)藥殘留量，即樣品檢測結(jié)果“不合格”，需要立即暫停相關(guān)農(nóng)產(chǎn)品的市場交易活動(dòng)，同時(shí)，對產(chǎn)品進(jìn)行追蹤，向上級(jí)主管部門進(jìn)行匯報(bào)。第三，當(dāng)樣品抑制率處于40%～50%區(qū)間內(nèi)，此時(shí)代表樣品“疑似農(nóng)藥殘留超標(biāo)”，需要進(jìn)行重復(fù)檢查，進(jìn)一步確認(rèn)。復(fù)檢之后，若抑制率>40%，需要使用色譜儀展開分析，確認(rèn)之后停止該農(nóng)產(chǎn)品的市場交易，對其追蹤，向主管部門進(jìn)行匯報(bào)。

2、農(nóng)殘快速檢測中常見問題處理方式

（1）處理“假陽性”問題

在農(nóng)殘的快速檢測過程，可能出現(xiàn)“假陽性”結(jié)果，對此主要使用下列三種方式進(jìn)行處理：

第一，復(fù)核整體檢測過程，檢測員需要結(jié)合檢測過程，檢查空白對照值的精準(zhǔn)性，抑制率為檢測值、空白對照值之間的比率，因此，空白對照值是影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素。當(dāng)結(jié)果中出現(xiàn)多數(shù)樣品呈“陽性”時(shí)，此時(shí)需要核對對照值的真實(shí)性，提升檢查結(jié)果準(zhǔn)確度。與此同時(shí)，對檢查過程的取樣流程、方法、有效性等進(jìn)行核對。當(dāng)取樣過程方法不當(dāng)時(shí)，也會(huì)造成上述結(jié)果。例如：部分蔬菜韭菜、香蔥、香菜等自身對酶活性影響較大，在檢測上述農(nóng)產(chǎn)品時(shí)，可先將整株進(jìn)行浸泡，防止浸泡液流出，導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)“假陽性”，為檢測結(jié)果的判定提供依據(jù)，保證整個(gè)檢測過程完全符合農(nóng)殘快檢的操作規(guī)范，規(guī)避檢測中的結(jié)果風(fēng)險(xiǎn)。

第二，重點(diǎn)落實(shí)檢測環(huán)節(jié)反應(yīng)溫度的一致性檢查，由于農(nóng)殘快檢過程溫度對酶穩(wěn)定性、活性等影響程度較高。如果冬季檢測，實(shí)驗(yàn)室中可能溫度條件難以恒定，可在“水浴鍋”內(nèi)完成10min的酶反應(yīng);在夏季檢測時(shí)，由于室溫過高可能抑制酶的活性，因此，可選擇上午時(shí)間將試劑配制好，保證驗(yàn)過程處于恒溫環(huán)境中進(jìn)行。在具體實(shí)踐過程，為提高檢測成功率，需要全面檢查反應(yīng)全程溫度是否恒定，落實(shí)空白對照組設(shè)計(jì)，保證檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性。

第三，檢查酶受到抑制的反應(yīng)時(shí)間，整個(gè)檢測過程，由于酶抑制時(shí)間的不同對檢測結(jié)果以及結(jié)果利用等有重要影響。當(dāng)酶受抑制時(shí)間較長時(shí)，其抑制率也會(huì)提高。當(dāng)待檢樣品中加入底物之后未迅速置于比色池當(dāng)中，就會(huì)將酶的反應(yīng)時(shí)間延長，導(dǎo)致結(jié)果中有多個(gè)抑制率值呈“假陽性”。對此，為保證檢測過程側(cè)科學(xué)性，高效實(shí)施檢測計(jì)劃，需要保障對照組、檢測組等酶抑制的反應(yīng)時(shí)間相一致。

（2）處理無效數(shù)值問題

檢測環(huán)節(jié)，檢測結(jié)果中存在負(fù)值，主要因?yàn)闄z測過程吸光值比對照檢測吸光值高，導(dǎo)致系統(tǒng)出現(xiàn)錯(cuò)誤。此時(shí)，需要重新進(jìn)行對照試驗(yàn)，檢測環(huán)節(jié)嚴(yán)格對移液槍的使用作出規(guī)范，保證農(nóng)殘檢驗(yàn)流程規(guī)范，提高結(jié)果精度。

在檢測過程，比色池當(dāng)中產(chǎn)生個(gè)別無數(shù)值的通道，針對這一問題，主要可對檢測儀進(jìn)行檢查，對紫外光燈的工作狀態(tài)全面檢查，確認(rèn)其是否存在故障。同時(shí)，還需對酶、顯色劑等添加情況展開全方位檢查，為檢測環(huán)節(jié)提供精準(zhǔn)的參考信息。對以上無效數(shù)值的處理可保證后續(xù)檢測流程順利進(jìn)行，處理上述問題時(shí)，相關(guān)人員需要重點(diǎn)積累檢測經(jīng)驗(yàn)，不斷提高農(nóng)殘快檢工作水平。

總而言之，在農(nóng)殘快檢過程，需要依靠完善的檢測流程，針對檢測環(huán)節(jié)存在的各類問題，要找出影響因素，采取針對性解決措施，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，保證結(jié)果的高效利用。同時(shí)，農(nóng)藥種類逐漸多樣化，要求檢測技術(shù)不斷發(fā)展，將檢測流程進(jìn)一步優(yōu)化，對此需要相關(guān)技術(shù)人員深入思考，全面分析檢測過程的影響因素，運(yùn)用先進(jìn)的技術(shù)加以解決，提高檢測結(jié)果質(zhì)量和精度。

（作者單位：236000安徽省阜陽市潁州區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心）