續(xù)隨子化學成分和藥理活性研究進展△

廖培海，翁連進，劉淑嵐，耿頔

華僑大學 化工學院，福建 廈門 361021

續(xù)隨子EuphorbialathyrisL.系大戟科大戟屬的2年生雙子葉草本植物，全株無毛，全草有毒，主要分布或栽培于歐洲、北非、中亞、東亞、南北美洲以及澳大利亞等地區(qū)，在我國吉林、河北、河南、浙江、安徽、廣西、云南、四川等大部分地區(qū)均有廣泛栽培或逸生[1]。續(xù)隨子的根、莖和種子均可入藥，其成熟的干燥種子，又名千金子，別名千兩金、菩薩豆、打鼓子、一把傘、小巴豆，炮制后可作藥用，是常見的中藥材。其性溫，味辛，有小毒，具有瀉下逐水，破血消癥等功效，常用于治療水腫、痰飲、積滯脹滿、二便不通、血瘀經(jīng)閉、晚期血吸蟲病及蛇咬傷等病癥，外用可治頑癬、疣贅[2]；臨床報道續(xù)隨子在治療白血病、食道癌、皮膚癌等疾病方面療效甚佳[3]?，F(xiàn)代研究表明，續(xù)隨子中富含大量的碳氫化合物和脂肪酸，與柴油替代品的分子組成相類似，是生產(chǎn)生物柴油的理想原料，歐美等地區(qū)常將其作生物燃料和生物質(zhì)的來源[4-5]；此外，續(xù)隨子中還主要包括二萜、香豆素、黃酮、揮發(fā)油等化學成分，具有抗腫瘤、利尿?qū)a、抗菌、抗炎、抗氧化及祛斑美白等作用，具有較大的藥用開發(fā)價值，深受國內(nèi)外學者的關(guān)注。續(xù)隨子具有一定毒性，且毒性機制至今還未充分明確，限制了其更有效的開發(fā)利用。本文對1970年以來國內(nèi)外有關(guān)續(xù)隨子的化學成分及藥理活性等方面的研究報道進行綜述，旨在為更深入闡明其中的活性物質(zhì)，研究其毒效關(guān)系，保障其藥用安全，進一步合理開發(fā)、利用該植物資源提供參考。

1 化學成分

迄今，國內(nèi)外學者針對續(xù)隨子植物化學成分的研究報道表明，續(xù)隨子中的主要成分為脂肪酸、二萜、黃酮、香豆素、甾醇、揮發(fā)油及其他類別化合物，其中多數(shù)二萜化合物是續(xù)隨子所特有的化學成分，活性顯著，具有極其廣闊的生物醫(yī)學研究前景。

1.1 脂肪酸

續(xù)隨子中富含大量的油質(zhì)，其種子提取物中脂肪油質(zhì)量分數(shù)高達47%～50%，主要成分為不飽和脂肪酸等類似于原油的碳氫化合物，在作為一種新型能源油料作物方面具有很好的開發(fā)前景[6]。因此，國內(nèi)外學者對其含油量及結(jié)構(gòu)組成進行了深入系統(tǒng)的研究，旨在對續(xù)隨子作為優(yōu)質(zhì)新型能源油料作物的發(fā)展?jié)摿M行更深入的了解。危文亮等[7]通過索氏提取法和氣相色譜儀(GC-FIC)對續(xù)隨子含油量及其油中脂肪酸的組成和相對含量進行分析測定，結(jié)果表明，續(xù)隨子含油量因產(chǎn)地而各異，脂肪酸的主要成分為油酸、棕櫚酸、亞油酸、α-亞麻酸，還含有花生烯酸、硬脂酸、豆蔻酸、棕櫚烯酸、十七碳烯酸、γ-亞麻酸等。祝洪艷等[8]研究報道，印證了續(xù)隨子油中含量最高的是油酸，其次是軟、硬脂酸。王亞輝等[9]以機械壓榨法提取續(xù)隨子油，采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)儀分析，測得7種脂肪酸，不飽和脂肪酸居多；此外，氨基酸分析發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子中蛋白質(zhì)富含17種氨基酸，以谷氨酸和天冬氨酸為主，種類齊全，是具有較高藥用價值的蛋白質(zhì)資源。朱娟娟等[10]對千金子石油醚萃取物中油脂進行GC-MS分析，鑒定出55個化合物，脂肪酸居多。續(xù)隨子含油量較高，油質(zhì)中的脂肪酸成分的分子組成類似原油，且植物資源豐富，因此，其在生物能源應用領(lǐng)域具有很好的發(fā)展前景。

1.2 二萜

二萜化合物是續(xù)隨子的主要化學成分，也是其重要的活性成分，具有抗炎、抗腫瘤等多方面的藥理活性。現(xiàn)代研究表明，續(xù)隨子中二萜類化合物的含量占總脂肪油含量的3%～5%[11]。續(xù)隨子中的二萜主要為巨大戟烷(ingenane)和續(xù)隨子烷(lathyrane)2種母核結(jié)構(gòu)骨架的二萜。續(xù)隨子烷二萜是續(xù)隨子所特有的二萜骨架類型，結(jié)構(gòu)新穎、活性顯著，是獲得其他活性二萜化合物的前體化合物，可以通過跨環(huán)環(huán)化反應合成一系列結(jié)構(gòu)復雜的多環(huán)二萜衍生物[12]。

相關(guān)研究[13-15]從續(xù)隨子中先后分離得到8個新穎獨特的二萜化合物：大戟因子L1～L8(Euphorbia Factor L1-L8)，引起國內(nèi)外學者對續(xù)隨子的極大關(guān)注。1990年，Itokawa等[16]報道從續(xù)隨子中首次分離得到Euphorbia Factor L9。1999年，Hohmann等[17]從續(xù)隨子的根中分離得到1個新的續(xù)隨子烷二萜Compound 1。Appendino等[18]從續(xù)隨子中首次分離得到Euphorbia Factor L10，并發(fā)現(xiàn)其對P-糖蛋白(Permeability glycoprotein，P-gp)具有很好的抑制活性，具有一定的抗腫瘤作用。Liao等[19]從續(xù)隨子中分離得到Euphorbia Factor L11以及1種新骨架二萜化合物lathyranoic acid A。Gao等[20]從續(xù)隨子中發(fā)現(xiàn)另一種新骨架二萜化合物lathyranone A。2009年，焦威等[21]從續(xù)隨子種子中提取分離得到8個續(xù)隨子烷二萜、3個巨大戟烷二萜，其中，續(xù)隨子醇和巨大戟醇是首次報道從續(xù)隨子種子中分離得到的。近年來，對續(xù)隨子中的二萜類化合物的研究取得了重大進展，Li等[22]從續(xù)隨子中分離得到又一種擁有新穎骨架的二萜化合物EuphorbialathyrisA。Lu等[23]從續(xù)隨子中分離得到22個續(xù)隨子烷型二萜，有14個二萜(Euphorbia Factor L12-L25)是首次從該植物中分離得到。2018年，Wang等[24]從續(xù)隨子種子中分離得到Euphorbia Factor L27和Euphorbia Factor L28，細胞毒性研究發(fā)現(xiàn)，2個二萜均具有顯著的細胞毒活性。Lee等[25]從續(xù)隨子甲醇提取物中分離得到17個已知二萜和1個新的二萜Euphorbia Factor L29。Wang等[26]從續(xù)隨子中分離得到1個前酶烷型二萜premylanin，以及4個新的續(xù)隨子烷二萜Euphorbia Factor L30-L33，還有13個已知二萜。Yun等[27]從續(xù)隨子根中分離得到1個新類別二萜lathyrisol A。二萜化合物名稱見表1～2。

1.3 黃酮類化合物

黃酮是一類具有多種生物活性的重要次生代謝產(chǎn)物，其研究已較為成熟，在續(xù)隨子中亦發(fā)現(xiàn)此重要成分。目前，從續(xù)隨子中提取分離得到的黃酮類化合物主要有：青蒿亭(artemetin)、蔓荊子黃酮(vitexicarpin)[39]、山柰酚-3-葡萄糖醛酸苷(kaempferol-3-glucuronide)及槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷(quercetin-3-glucuronide)[40]、黃芩素(baicalein)、山柰酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)、漢黃芩素(wogonin)、蘆丁(rutin)[41]。

表1 續(xù)隨子中續(xù)隨子烷型二萜化合物

表2 續(xù)隨子中巨大戟烷型二萜化合物

1.4 香豆素

續(xù)隨子中已報道的香豆素類成分主要有：七葉內(nèi)酯或名秦皮乙素(aesculetin)[24]、雙七葉內(nèi)酯(euphorbetin)[42]、異雙七葉內(nèi)酯(isoeuphorbetin)[43]、瑞香素(daphnetin)、七葉樹苷(esculin)、秦皮啶(fraxidine)、6，7-二羥基香豆素(esculetin)、6-甲氧基-7-羥基香豆素(scopoletin)[44]等。

1.5 甾醇類化合物

續(xù)隨子中分離得到的甾醇類化合物主要有：β-谷甾醇(β-sitosterol)[21]、胡蘿卜苷(daucosterol)[30，39]、4-蒲公英甾醇(4-taraxasterol)、蒲公英甾醇(taraxerol)、蒲公英甾酮(taraxerone)、羽扇葉醇(lupeol)、羊齒烯醇(fernenol)、羽扇烯酮(lupenone)[45]、β-香樹脂醇(β-Amyrin)、環(huán)木菠蘿烯醇(cycloartenol)、24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷醇(24-methylene cycloartanol)[4]、1-hydroxyl-3，5，8-trimethoxyanthone、1，5-dihydroxyl-3，8-dimethoxyanthone等[44]。

1.6 揮發(fā)油類化合物

續(xù)隨子揮發(fā)油成分種類和數(shù)量較多，主要為單萜、倍半萜、飽和烴類等刺激性成分，具有揮發(fā)性。2004年，杜天信等[46]用GC-MS聯(lián)用法從續(xù)隨子種子揮發(fā)油中分析鑒定出20種成分，含量較高的主要有正庚烷(33.73%)、2-乙基戊烷(11.02%)、正辛烷(6.81%)、2-甲基庚烷(6.39%)、3-甲基庚烷(6.33%)等。焦威等[47]采用相同方法對續(xù)隨子種子揮發(fā)油成分進行分析，共鑒定出49個化合物，占總揮發(fā)油含量的90.48%，多為具有潤腸、致瀉等作用的脂肪酸及其酯類化合物、單萜與倍半萜類化合物以及芳香化合物，且長鏈脂肪酸及其酯類化合物含量相對較高。祝洪艷等[48]用氣相色譜法分析了續(xù)隨子種子揮發(fā)油成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油主要成分是油酸、亞油酸和油酸-2-丙三醇酯等。文獻報道的續(xù)隨子種子揮發(fā)油成分存在一定差異，這可能與藥材的生長環(huán)境、采收時間、儲存時間及測定過程方法等因素差異有關(guān)。續(xù)隨子種子揮發(fā)油成分的研究證明續(xù)隨子作為1種生物能源具有一定的可行性。

1.7 其他類化合物

除上述成分外，從續(xù)隨子中還分離得到一些其他類別化合物：金色酰胺醇酯(aurantiamide acetate)、2，3-二羥丙基十九碳酸酯(2，3-dihydroxypropyl icosanoate)、2，3-二羥丙基-9-烯-十八碳酸酯(2，3-dihydroxypropyl oleate)、2，3，4-三羥基丁基十五碳-3-烯碳酸酯(2，3，4-trihydroxybutyl hexadee-3-enoate)、1，2，3-三羥基苯(pyrogallol)、對羥基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid)、苯甲酸(benzoic acid)、油酸(oleic acid)、棕櫚酸(palmitic acid)[21]、鄰羥基苯甲酸(salicylic acid)、(E)-8-氧代十八碳-9-烯酸[(E)-8-oxooctadec-9-ennoic acid]、熊果酸(ursolic)[44]、單油酸甘油酯(Glycerol-1-monooleate)[49]等。

2 藥理作用

2.1 瀉下逐水

續(xù)隨子具有致瀉作用，瀉下強度是蓖麻油的3倍，臨床上常用于治療腹痛脹滿、大便不通等病癥?，F(xiàn)代藥理學研究表明[14，50]，續(xù)隨子瀉下的有效成分主要為千金子甾醇(euphorbiasteroid or Euphorbia Factor L1)和千金二萜醇二乙酸苯甲酸酯(Euphorbia Factor L2)，可促進腸胃蠕動，產(chǎn)生峻瀉。然而，L1和L2既是其有效藥用成分，也是毒性成分，故在藥用時需炮制入藥以避免其峻瀉作用過強，產(chǎn)生一定不良反應。有關(guān)研究表明[51-53]，續(xù)隨子經(jīng)加工炮制后脂肪油等成分的含量明顯減少，毒性顯著降低。續(xù)隨子炮制工藝多樣，制霜法是目前應用較多的1種方法，通過炮制加工的方式除去部分脂肪油，從而減小其毒性及峻瀉作用。此外，續(xù)隨子中香豆素類成分秦皮甲素和秦皮乙素亦有逐水消腫的作用，可增加排尿量，促進尿酸從組織中排出且可抑制黃嘌呤氧化酶活性，從而減少尿酸生成[54]。

2.2 祛斑美白

皮膚顏色的深淺受多種因素調(diào)控，占主導作用的是黑色素的含量及分布，而酪氨酸酶則是生成黑色素的關(guān)鍵酶，其活性大小直接關(guān)系到黑色素的生成量。2000年，Kim等[55]從續(xù)隨子種子中提取出2個二萜化合物和1個新型蔗糖異戊酯，并通過動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，5，15-二乙酰-3-苯甲?；Ы鸲拼季哂忻腊灼つw功效。Masamoto等[56]研究發(fā)現(xiàn)，七葉內(nèi)酯可以抑制酪氨酸酶的活性，其半數(shù)抑制濃度(IC50)值為43 μmol·L-1，且香豆素骨架C6、C7位的羥基對其酪氨酸酶抑制活性具有重要影響。房子婷等[57]以千金二萜醇二乙酸酯苯甲酸酯為主成分，研制了1種千金子美白祛痘霜，可用于治療黃褐斑、雀斑等色素沉著性皮膚疾病，治療效果優(yōu)于1.5%曲酸二棕櫚酸酯霜。

2.3 抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛作用

續(xù)隨子中的香豆素類化合物是抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛的主要活性成分。現(xiàn)代研究表明[58]，秦皮甲素和秦皮乙素具有抗菌和抗炎作用，瑞香素有抗菌、抗炎及鎮(zhèn)痛作用，效果顯著，安全性高。此外，瑞香素對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、福氏痢桿菌及綠膿桿菌的生長也具有一定的抑制作用[59]。白瑞香素具有鎮(zhèn)靜催眠活性，臨床可與巴比妥類藥物聯(lián)合使用，協(xié)同作用于外科手術(shù)麻醉[60]。

近年研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子中二萜化合物具有抗炎生物活性，其作為抗炎藥物具有巨大開發(fā)潛力，特別是對于脂多糖(LPS)介導的炎癥障礙等疾病。Lee等[25]以RAW264.7巨噬細胞中LPS誘導的一氧化氮(NO)產(chǎn)量對續(xù)隨子二萜的抗炎活性進行評價，發(fā)現(xiàn)二萜可以有效抑制NO產(chǎn)生，IC50值為11.2～52.2 μmol·L-1。Zhang等[61]研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子中二萜化合物L2能有效阻斷炎癥細胞在肺內(nèi)浸潤和活化，減少IκB/IKKα/β磷酸化，阻斷NF-κB p65傳導和LPS刺激的RAW267.4細胞核內(nèi)DNA的結(jié)合活性，從而抑制NF-κB信號通路的活化，有力抑制炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，減輕LPS引起的肺組織病理改變，提高急性肺損傷(ALI)小鼠的存活率。這為進一步研究L2或其他續(xù)隨子二萜的抗炎活性及新型抗炎藥物研發(fā)提供了參考。

2.4 抗腫瘤作用

續(xù)隨子中化學成分復雜多樣、結(jié)構(gòu)獨特新穎，具有極其顯著的抗腫瘤活性。續(xù)隨子種子在國外早有記載，可用于癌癥等疾病的治療，其甲醇提取物抗腫瘤活性研究亦證明其具有抗癌活性[16]?，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)[62]，千金子甲醇提取物體外對人體宮頸癌細胞(Hela)、人體紅白血病細胞(K562)、人體單核細胞性白血病細胞(U937)、人體急性淋巴細胞性白血病細胞(HL60)和人體肝癌細胞(HepG2)的增殖均有較明顯的抑制作用，抑制效果隨給藥劑量增大而增強，呈現(xiàn)明顯量效關(guān)系，且對白血病的抑制作用強于其他實體瘤；體內(nèi)對小鼠移植性腫瘤細胞株S180和小鼠艾氏腹水癌(EAC)也有較明顯抑制作用。薛存寬等[63]研究表明，不同極性溶媒的千金子粗提物其抗腫瘤活性有顯著差異：三氯甲烷提取物對HepG2、K562、U937細胞均有明顯的抑制作用，丙酮提取物只對K562、U937細胞有較明顯的抑制作用，三氯甲烷、丙酮提取物的混合物對在體的S180、EAC有明顯療效，而甲醇、水提取物則無明顯抗腫瘤活性或活性較小。楊珺等[64]研究發(fā)現(xiàn)，千金子提取液對大鼠原代培養(yǎng)的肺成纖維細胞的生長增殖有較強的抑制作用，形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，肺成纖維細胞數(shù)目顯著減少，形狀不規(guī)則，突起變短，排列混亂，由此表明續(xù)隨子可能在一定程度上可以用于肺部腫瘤的治療。

續(xù)隨子中二萜化合物骨架新穎獨特，是其抗腫瘤活性的主要有效成分。Itokawa等[3]研究發(fā)現(xiàn)，巨大戟二萜醇-3-十六烷酸酯(Euphorbia factor L5)和巨大戟二萜醇-20-十六烷酸酯(Euphorbia factor L4)是一對同分異構(gòu)體，L5對EAC具有較強抑制作用，而L4則無明顯抗腫瘤活性。蘇曉會[65]研究發(fā)現(xiàn)6，7-二羥基香豆素對腦轉(zhuǎn)移細胞(KT)的增殖表現(xiàn)出較強的抑制活性，L3對人子宮內(nèi)膜癌細胞(HEC-1)和人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(T-98、U251-SP)的增殖均有較強的抑制作用，而與L3母核結(jié)構(gòu)相同的L1及L2對所測細胞的抑制活性則較弱或無明顯活性。王思明等[66]研究了L1-L3對人婦科腫瘤細胞的細胞毒活性作用，發(fā)現(xiàn)L3對人卵巢透明癌細胞(SHIN3和HOC-21)、子宮頸癌細胞(Hela)和卵巢囊腺癌細胞(HAC-2)的增殖均具有較顯著抑制作用，L1僅對Hela細胞有明顯的抑制活性，L2則對所測的5種婦科腫瘤細胞均無明顯抑制活性。L3的體外抗腫瘤活性研究發(fā)現(xiàn)[67]，其對人肺癌A549細胞的增殖具有較強的抑制作用，IC50為34.04 μmol·L-1，L3可濃度依賴性地引起線粒體膜電位的降低，導致細胞色素C釋放，進而誘導A549細胞凋亡。此外，有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[68]，L2也是通過線粒體途徑誘導A549細胞凋亡，IC50為36.82 μmol·L-1。Yang等[49]研究表明，L1和L9對A549及HepG2細胞的增殖具有明顯抑制活性，L2、L8、glyceryl monooleate及esculetin僅對A549細胞有明顯的細胞毒活性作用，對HepG2細胞的增殖無明顯的抑制活性。Lu等[23]從續(xù)隨子種子中分離純化得到22個化合物，其抗腫瘤活性研究發(fā)現(xiàn)，deoxy-L1、L12、L18、L23對人乳腺癌MCF-7細胞顯示出中等強度的細胞毒活性(IC50=12.4·23.1 μmol·L-1)，對大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細胞的細胞毒活性則較弱，僅L16對大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細胞表現(xiàn)出較強的細胞毒活性，具有潛在的抗腫瘤作用(IC50=15.3 μmol·L-1)，然而，L1～L3、L7a、L7b、L8、L12～L25、Lathyranoic acid A等在50 μmol·L-1給藥濃度下對HepG2、Hela細胞均無明顯細胞毒活性。近年研究發(fā)現(xiàn)，L28對MCF-7和HepG2細胞均有較強的細胞毒活性，且其對MCF-7細胞的抑制作用明顯強于傳統(tǒng)抗癌藥物順鉑[24]。Wang等[26]對續(xù)隨子中分離得到的18個二萜進行了體外抗腫瘤活性研究，發(fā)現(xiàn)L24對HCT116、MCF-7、786-0、HepG2細胞均有較強的細胞毒活性，且L24對MCF-7細胞的抑制作用優(yōu)于順鉑，此外，通過對比各化合物結(jié)構(gòu)及其抗癌活性發(fā)現(xiàn)，C17位取代基是羥基比取代基是乙酰基的二萜的抗癌活性更強，C3位取代基是苯乙?；?、羥基的二萜比取代基是苯甲?；亩茖Π┘毎囊种坡矢?，此外，具有5，6-環(huán)氧結(jié)構(gòu)的續(xù)隨子二萜對癌細胞表現(xiàn)出更高的抑制活性，而6，17-雙鍵型二萜的抑制率則普遍較低。綜合分析二萜化合物的抗腫瘤構(gòu)效關(guān)系可以發(fā)現(xiàn)，二萜化合物的細胞毒活性與其母體骨架結(jié)構(gòu)、取代基種類和位置以及空間構(gòu)型有關(guān)。這對于選擇性篩選具有更好活性的化合物、對分子進行選擇性結(jié)構(gòu)修飾，以尋求活性更好的衍生物具有重要的指導意義。

多藥耐藥性(multidrug resistance，MDR)，又稱多向性耐藥(pleiotropic drug resistance)，是指腫瘤細胞接觸某種化療藥物后，不僅對該藥物產(chǎn)生耐藥性，而且對另一些未曾接觸、與之化學結(jié)構(gòu)和作用機制完全不同的藥物也產(chǎn)生交叉耐藥，這是一種獨特的廣譜耐藥現(xiàn)象[69]。MDR是導致臨床腫瘤化療失敗的主要原因，其形成因素多種多樣，其中P-糖蛋白(ABCB1，P-gp)的高表達是導致化療失敗的最普遍、重要的原因，其作用機理是P-gp過表達，導致藥物外排，細胞內(nèi)積聚的藥物量減少，血藥濃度下降，從而導致療效降低或無效。

2003年，Appendino等[18]發(fā)現(xiàn)，L10對P-gp的表達具有一定的抑制作用，引起了國內(nèi)外學者對續(xù)隨子中化學成分的抗腫瘤多藥耐藥的廣泛關(guān)注和研究。經(jīng)過深入研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子中多數(shù)二萜類化合物均具有一定的抗腫瘤多藥耐藥活性，可通過抑制P-gp介導的外排泵活性來增強藥物在細胞中的滯留，尤其是L7a和L2，與陽性對照組相比，是非常強的抑制劑[70]。相關(guān)研究[71-72]發(fā)現(xiàn)，L1具有一定的體外抗腫瘤活性，其對人口腔上皮癌細胞系KB及其多藥耐藥細胞系KBv200、人乳腺癌細胞系MCF-7及其多藥耐藥細胞系MCF-7/ADR細胞均具有較好的細胞毒活性，實驗發(fā)現(xiàn)，L1可顯著增加多藥耐藥系KBv200和MCF-7/ADR細胞對常規(guī)抗腫瘤藥物的敏感性，同時不影響KB細胞和MCF-7細胞的藥物敏感性，作用機理是L1可濃度依賴性地有效逆轉(zhuǎn)ABCB1(1種P-糖蛋白)介導的腫瘤多藥耐藥，逆轉(zhuǎn)機制與增強三磷酸腺苷(ATP)酶的活性、抑制KBv200和MCF-7/ADR細胞中P-gp介導的藥物外排有關(guān)，與下調(diào)KBv200和MCF-7/ADR細胞中ABCB1在mRNA和蛋白水平的表達無關(guān)。之后，該課題組又對人白血病細胞K562和其多藥耐藥細胞K562/ADR進行研究，結(jié)果與之前研究基本一致，證明L1與常規(guī)化療藥物聯(lián)合使用，或可克服多藥耐藥性[73]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，L3的衍生物對P-gp高表達的MCF-7/ADR多藥耐藥細胞具有一定的抑制作用[74]；L9對A549、MDA-MB-231、KB、MCF-7細胞和KB-VIN多藥耐藥細胞均具有較強的細胞毒活性，L2對KB-VIN細胞具有較強的選擇性細胞毒活性，L1在40 μmol·L-1給藥濃度下對所測細胞均無明顯細胞毒活性，細胞毒性作用機制研究發(fā)現(xiàn)，L3、L9對細胞的正常周期進程具有破壞作用，L2、L3、L5、L9在一定程度上會破壞微觀網(wǎng)絡(luò)并誘導肌動蛋白絲聚集[75]。

近年研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子對腎癌細胞的增殖也有一定的抑制作用，其可以有效增強腎癌特異抗原G250的表達，進而對人腎癌786-0細胞的體外增殖產(chǎn)生較強的抑制作用[76]；腎癌裸鼠模型實驗研究表明，續(xù)隨子種子可以有效降低裸鼠癌癥組織Livin蛋白及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達水平，對裸鼠腫瘤增長具有一定的抑制作用[77]。

2.5 預防和治療骨疾病

骨骼是重要的組織，支撐人體內(nèi)部各個器官，構(gòu)成整個人體框架。破骨細胞介導的骨吸收和成骨細胞誘導的骨形成之間的動態(tài)平衡維系著骨穩(wěn)態(tài)，骨穩(wěn)態(tài)的破壞可導致嚴重的骨骼疾病，這與破骨細胞數(shù)量或活性增加引起的過度骨吸收密切相關(guān)。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子可能是1種潛在的骨疾病治療藥物，能有效減少破骨細胞的形成，用于預防和治療破骨細胞過度骨吸收引起的骨疾病。Kang等[78]研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子甲醇提取物可通過下調(diào)p38/c-Fos/NFATc1信號通路的表達抑制破骨細胞的分化和骨吸收，續(xù)隨子甲醇提取物可阻斷核因子-κB受體活化因子配體(RANKL)誘導的p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化，從而抑制活化T細胞核因子c1(NFATc1)和c-Fos的表達，同時對成骨細胞中RANKL和骨保護素(OPG)的mRNA表達影響很小。Hong等[79]進一步研究發(fā)現(xiàn)，續(xù)隨子中二萜化合物L1可通過調(diào)節(jié)細胞氧化還原狀態(tài)抑制破骨細胞分化并可通過激活Fas/FasL通路誘導破骨細胞凋亡，此外，L1在破骨細胞中誘導特異性凋亡，但在骨髓巨噬細胞(BMMs)中則不會誘導細胞凋亡，故它在治療過量破骨細胞引起的骨疾病中具有破骨細胞特異性治療潛力，這為預防和治療炎性骨破壞和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松等骨疾病提供了新的可能。

3 毒性

現(xiàn)代研究表明，大戟屬植物化學成分多樣，活性顯著，且多具有雙重活性，既具有抗菌抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗白血病等多種藥理活性，同時又具有一定的細胞毒性和對皮膚黏膜及胃腸道的刺激性[80]。續(xù)隨子作為大戟屬中的1種藥用歷史悠久的植物，亦具有雙重藥理活性。藥理學研究表明，續(xù)隨子既具有瀉下、抗腫瘤、抗腫瘤多藥耐藥、美白祛斑等多種藥理活性，同時也對胃腸道具有較強的刺激作用，用藥過度易導致峻瀉作用，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)亦有一定的毒性作用，毒性有效成分主要是千金子甾醇及殷金醇棕櫚酸酯等。此外，續(xù)隨子不僅有抗癌活性，還具有一定的致癌、致炎等毒副作用，這對癌癥的治療及其致病機理的研究具有重要參考價值。

近年來，學者也對續(xù)隨子毒性作了一定的研究，李濱等[81]對續(xù)隨子種子水煎液(每mL相當于0.2 g生藥)的急性毒性進行研究，實驗測得其100%死亡量為2.5 mg·kg-1，0死亡量為1.3 mg·kg-1，其半數(shù)致死量(LD50)為1.795 0 g·kg-1，且95%可信限為1.621 1～1.987 9。楊珺等[63]研究了續(xù)隨子種子提取液的細胞毒性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高濃度提取液對大鼠肺成纖維細胞有一定的毒性，強度與提取液濃度呈正相關(guān)。毒性一直是續(xù)隨子臨床藥用的一個重要制約因素，目前，有關(guān)續(xù)隨子的毒性作用研究報道也相對較少，毒性作用機制以及是否有其他毒性成分尚不明確，有必要對其作進一步深入系統(tǒng)的毒性研究，為續(xù)隨子的臨床藥用安全提供科學依據(jù)。

4 結(jié)語

續(xù)隨子作為傳統(tǒng)藥用植物，資源分布廣泛，藥用歷史悠久，其主要藥用部位是種子，需炮制后入藥，民間可用于治療水腫、積滯脹滿、二便不通、血瘀經(jīng)閉及頑癬等疾病?，F(xiàn)代研究表明，該植物主要含有二萜、黃酮、香豆素、揮發(fā)油、脂肪酸、甾醇等類化合物，具有抗腫瘤、抗腫瘤多藥耐藥、抗菌、鎮(zhèn)痛、抗炎、祛斑美白、瀉下逐水、骨疾病預防和治療等多種藥理活性，具有廣闊的臨床應用前景和開發(fā)價值。然而續(xù)隨子是有毒中藥材，具有一定毒性，國內(nèi)外對該藥的毒性成分、毒效關(guān)系、毒性作用機制等尚未充分明確，限制了其有效開發(fā)和利用。因此，亟待深入研究續(xù)隨子中活性成分的毒效關(guān)系和毒性機制，為保障其用藥安全、建立完善可靠質(zhì)量控制標準提供科學依據(jù)。此外，仍需繼續(xù)深入研究續(xù)隨子的化學成分及其活性、構(gòu)效關(guān)系和作用機制，進一步闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為該中藥的臨床推廣應用和開發(fā)利用提供科學依據(jù)和理論基礎(chǔ)。