白細(xì)胞介素-17C對潰瘍性結(jié)腸炎的診斷價值

劉棟 何恒 戴軍 姚瀟穎 司傳平

炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）是胃腸道慢性炎癥或者反復(fù)發(fā)作免疫反應(yīng)的統(tǒng)稱，是一種慢性、反復(fù)發(fā)作的腸道非特異性炎性疾病，臨床最常見的IBD是潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和Crohn氏?。–rohn's disease，CD），而我國 IBD主要以UC為主，區(qū)域性分布明顯。近年來，我國UC發(fā)病率呈上升趨勢，臨床上常表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、發(fā)熱、黏液膿血便及消瘦等［1］，病程較長，不易治愈，病情反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重危害群眾健康。UC的發(fā)病機(jī)制與病因較為復(fù)雜，目前國內(nèi)外對其具體病因尚未形成明確一致的看法，但普遍觀點認(rèn)為其與家族遺傳、周圍環(huán)境、腸道感染、自身免疫及精神狀態(tài)等多因素綜合作用有關(guān)［2-3］。

UC臨床癥狀不典型，缺乏特異性，而臨床常規(guī)診斷方法（如腸鏡）往往操作復(fù)雜且給患者帶來痛苦，不易被患者接受。因此，尋找一種能夠快速診斷的體外標(biāo)志物非常重要。有研究顯示，白細(xì)胞介素 -17（interleukin-17，IL-17）家族在炎癥發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮作用［4］，T輔助細(xì)胞17（T help cell 17，Th17）及相關(guān)細(xì)胞因子IL-17在IBD的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用［5］。有研究顯示，IL-17家族成員IL-17C在多種自身免疫疾病中具有促進(jìn)炎癥反應(yīng)的作用，在右旋葡聚糖硫酸鈉（dextran sodium sulfate，DSS）誘導(dǎo)的小鼠腸炎模型中，發(fā)現(xiàn)IL-17C及其mRNA的異常表達(dá)［6］。本研究分析本院32例UC患者的臨床數(shù)據(jù)，探討血清IL-17C對UC患者病情評估的價值及其在疾病發(fā)生發(fā)展中可能起到的作用，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組 選擇本院2017年12月—2018年6月收治的32例UC患者作為UC組，均符合中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病學(xué)組制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，男性22例，女性10例；年齡18～82歲，平均（42.0±11.9）歲。另選50例健康體檢者作為健康對照組，男性33例，女性17例；年齡24～63歲，平均（53.8±14.0）歲。根據(jù)改良Mayo評分系統(tǒng)按疾病嚴(yán)重程度不同將UC組分為輕度（15例）、中度（11例）、重度UC組（6例）；根據(jù)年齡不同將兩組分為＜40歲、40～60歲、＞60歲組。見表1。

表1 健康對照組與UC組不同年齡段分布情況

1.2 檢測方法 采集患者晨起空腹靜脈血3 mL，經(jīng)離心處理后留取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清IL-17C水平。采用常規(guī)參數(shù)擬合曲線。

1.3 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)本單位倫理批準(zhǔn)（審批號：2017-衛(wèi)科-010），所有對患者的檢測均獲得過患者的知情同意。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，進(jìn)一步兩兩分析采用LSD檢驗，采用Spearman相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 UC組與健康對照組的IL-17C水平比較 UC組血清IL-17C水平明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 UC組與健康對照組的IL-17C水平比較

2.2 不同嚴(yán)重程度UC組與健康對照組的IL-17C水平比較 輕度UC組、中度UC組、重度UC組與健康對照組之間的IL-17C水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見圖2。

圖2 不同嚴(yán)重程度UC組與健康對照組的IL-17C水平比較

2.3 UC組與健康對照組不同性別和年齡間IL-17C水平比較 隨年齡增長，健康對照組IL-17C水平有上升趨勢，UC組各年齡段IL-17C水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），兩組不同性別之間IL-17C水平比較差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見圖3～5。

圖3 健康對照組不同年齡段之間的IL-17C水平比較

圖4 UC組不同年齡段之間的IL-17C水平比較

圖5 UC組和健康對照組不同性別之間IL-17C水平比較

3 討論

UC是一種侵及結(jié)腸黏膜的慢性非特異性炎性疾病，臨床表現(xiàn)多為腹痛、腹瀉、黏液膿血便伴有發(fā)熱等，部分患者可發(fā)生在其他部位，如腸病性關(guān)節(jié)炎、肝膽管疾病等［7］。UC病變主要位于結(jié)腸黏膜及黏膜下層，呈連續(xù)彌漫性分布，通常累及直腸和乙狀結(jié)腸，病程遷延不愈，輕重不等，使患者生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響［8］。目前UC的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，臨床診斷主要依賴于臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡下表現(xiàn)、影像學(xué)、病理學(xué)結(jié)果等［9-10］。但是內(nèi)鏡檢查對于患者具有損傷性，影像學(xué)的輻射問題對于患者的生存質(zhì)量具有一定程度的影響，臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡下表現(xiàn)、影像學(xué)和病理學(xué)結(jié)果等均無法及時有效地反映UC患者的病情嚴(yán)重程度。因此，尋找一種簡單有效且對患者無損傷或損傷較小的UC診斷方法逐漸引起人們的關(guān)注。

目前，公認(rèn)的能夠介導(dǎo)UC發(fā)病的促炎細(xì)胞因子主要有白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、γ-干擾素（interferon-γ，IFN-γ）等，抗炎細(xì)胞因子主要有白細(xì)胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素 -10（interleukin-10，IL-10）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）等。由致炎效應(yīng)細(xì)胞Th17產(chǎn)生的IL-17已被證實與UC有關(guān)，且與IL-6共同參與UC發(fā)病，尚未用于臨床診斷［11］。IL-17細(xì)胞因子家族是影響炎癥反應(yīng)的重要炎性介質(zhì)，是由Th17細(xì)胞分泌的一種強(qiáng)促炎細(xì)胞因子，包括IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F 6個成員。有研究顯示，IL-17 在多種免疫性疾病中發(fā)揮重要作用，其在IBD發(fā)病機(jī)制中的作用備受關(guān)注［12］。

目前，IL-17C作為一種重要的炎性因子一直在被研究，2000年，Li等［13］依據(jù)同源性從胎腎基因庫中克隆出了IL-17C，IL-17C與IL-17A具有23%的同源性，但定位于不同的染色體，且組織表達(dá)譜具有很大差異，作用也大相徑庭。IL-17C在腸上皮細(xì)胞、肺上皮細(xì)胞、角質(zhì)層細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，并通過自分泌和旁分泌的方式作用于這些細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子、趨化因子、抗菌肽和抗凋亡基因的表達(dá)，從而促進(jìn)機(jī)體的抗感染天然免疫反應(yīng)，也有研究發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞可以分泌IL-17C［14-15］。在上皮細(xì)胞中，IL-17C的表達(dá)主要是由炎性因子（如TNF-α和IL-1β 等）誘導(dǎo)核轉(zhuǎn)錄因子 κB（nuclear factor-κB，NF-κB）的激活來介導(dǎo)［16-17］，以自分泌方式調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞的固有免疫功能［13-14］。IL-17C以獨特的自分泌方式發(fā)揮作用，與由受體IL-17RA和IL-17RE組成的受體復(fù)合物結(jié)合，后者在組織上皮細(xì)胞中優(yōu)先表達(dá)。IL-17C刺激上皮發(fā)生炎癥反應(yīng)，包括促炎細(xì)胞因子、趨化因子和抗菌肽的表達(dá)，與IL-17A和 IL-17F 的誘導(dǎo)過程類似［18-19］。Reynolds等［20］研究發(fā)現(xiàn)IL-17C在維持黏膜屏障完整性方面起著至關(guān)重要的作用，在DSS小鼠模型中可檢測到IL-17C mRNA顯著升高，他們還觀察到在IL-17C-/-小鼠模型中，結(jié)腸炎病情加重。IL-17C在咪喹莫特誘導(dǎo)的皮膚炎癥模型中促進(jìn)炎癥，而在DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中發(fā)揮保護(hù)功能。Johnston等［21］發(fā)現(xiàn)，IL-17C與其他促炎信號結(jié)合可引發(fā)牛皮癬性皮炎的發(fā)展。IL-17C是呼吸道上皮固有免疫反應(yīng)的介體，增強(qiáng)了感染銅綠假單胞菌的呼吸道上皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)［22］。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑液單核細(xì)胞中IL-17C 的 mRNA 表達(dá)也增加［23］。Yamaguchi等［24］進(jìn)一步研究顯示，IL-17C優(yōu)先由非免疫細(xì)胞（如結(jié)腸和肺上皮細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞）在小鼠和（或）人類中產(chǎn)生，增強(qiáng)了Th17細(xì)胞產(chǎn)生IL-17A的能力，有助于Th17細(xì)胞介導(dǎo)的實驗性自身免疫性腦脊髓炎的發(fā)展。IL-17C對于T細(xì)胞非依賴性DSS引起的結(jié)腸炎發(fā)展起到重要作用。最近，Wang等［25］發(fā)現(xiàn)IL-17C可能參與急性腎損傷的炎癥反應(yīng)。本研究顯示，IL-17C在UC患者血清中的高表達(dá)可能是腸道炎癥的一種急性反應(yīng)。IL-17C通過IL-17RE刺激上皮細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子進(jìn)行炎癥防御；另外IL-17C可能協(xié)同其他炎性因子（如TNF）形成一種正反饋的環(huán)路，從而引起炎性介質(zhì)的過度釋放［19］。下一步可以進(jìn)一步研究IL-17C在UC中的作用，了解IL-17C相關(guān)信號通路，有助于為UC的早期診斷及其靶向治療提供理論依據(jù)。

綜上所述，UC患者的血清IL-17C水平明顯高于健康人群，提示其參與了UC的發(fā)病過程，在UC的診斷中具有重要的臨床價值。但本研究樣本數(shù)較少，需要更多的臨床研究驗證。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突