強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血Th17/Treg平衡狀態(tài)對(duì)疾病狀況的評(píng)估價(jià)值

王亞芳,王 梅,宋愛(ài)鳳

(內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010017)

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)是一種主要累及骶髂關(guān)節(jié)、脊柱附著點(diǎn)的慢性炎癥性疾病，以關(guān)節(jié)強(qiáng)直為病變特點(diǎn)，臨床表現(xiàn)不一、判斷其病情活動(dòng)度的難度較大[1-2]。常規(guī)紅細(xì)胞沉降率檢測(cè)對(duì)AS病情評(píng)估的敏感性不足；巴斯AS病情活動(dòng)指數(shù)在AS病情判斷中的應(yīng)用十分廣泛，但其具體分值由患者主觀評(píng)價(jià)而得，且很大一部分沒(méi)有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)的患者評(píng)分可存在明顯偏倚，尋找準(zhǔn)確、客觀的AS病情評(píng)估指標(biāo)是臨床研究的重點(diǎn)。AS也屬于自身免疫性疾病，較多研究證實(shí)在病情進(jìn)展過(guò)程中伴隨著患者免疫功能的嚴(yán)重?fù)p傷，其中T淋巴細(xì)胞亞群分布失衡是重要表現(xiàn)之一，故推測(cè)檢測(cè)免疫細(xì)胞分布情況是判斷AS病情現(xiàn)狀的可靠手段之一[3-4]。Th17/Treg是近年備受關(guān)注的CD4+T淋巴細(xì)胞亞群，已有研究證實(shí)其與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病的病情轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[5-6]。文中檢測(cè)AS患者的Th17/Treg平衡狀態(tài)，探討其對(duì)AS病情的評(píng)估價(jià)值，旨在為日后AS病情判斷尋找便捷、可靠的新指標(biāo)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年2月至2019年2月在本院確診為AS的患者90例作為AS組，其中男性50例，女性40例，年齡19～67歲，平均(43.27±8.91)歲，體質(zhì)量指數(shù)22～26 kg/m2，平均(23.87±2.95)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《強(qiáng)直性脊柱炎診斷及治療指南》[7]中對(duì)AS的定義；(2)首次確診疾病、未經(jīng)相關(guān)治療；(3)患者年齡小于80歲；(4)本人簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他自身免疫性疾?。?2)合并嚴(yán)重心、肝、腎功能不全；(3)妊娠或者哺乳期女性；(4)入組前6個(gè)月內(nèi)糖皮質(zhì)激素治療史；(5)認(rèn)知功能異常、無(wú)法配合相關(guān)檢查。另取同期在本院進(jìn)行治療的骶髂關(guān)節(jié)炎患者90例作為對(duì)照組，確診疾病且排除AS，其中男性46例，女性44例，年齡20～74歲，平均(43.55±8.60)歲，體質(zhì)量指數(shù)22～27 kg/m2，平均(23.78±2.51)kg/m2，各項(xiàng)體檢結(jié)果均在正常范圍內(nèi)，本人了解研究過(guò)程且簽署知情同意書(shū)。兩組研究對(duì)象的性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核、批準(zhǔn)此次研究。

1.2外周血Th17/Treg平衡狀態(tài)檢測(cè)及2次分組 入組即刻留取兩組患者的空腹外周靜脈血標(biāo)本約5 mL，采用艾森生物NovoCyte流式細(xì)胞儀測(cè)定其中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞分布比例并計(jì)算Th17/Treg比值。根據(jù)Th17/Treg比值中位數(shù)將AS患者進(jìn)一步分為高比值組、低比值組各45例。

1.3骶髂關(guān)節(jié)病變程度 采用核磁共振檢查AS患者的骶髂關(guān)節(jié)病變程度，具體可分為0～Ⅳ級(jí)，包括0級(jí)：無(wú)炎癥性改變；Ⅰ級(jí)：存在局限性骨髓脂肪堆積及軟骨下硬化，無(wú)融合的侵蝕≤2處；Ⅱ級(jí)：存在中度脂肪堆積以及軟骨下硬化，無(wú)融合的侵蝕>2處；Ⅲ級(jí)：關(guān)節(jié)間隙出現(xiàn)假性擴(kuò)大，存在廣泛脂肪堆積及嚴(yán)重軟骨下硬化，合并輕度、部分強(qiáng)直；Ⅳ級(jí)：存在肯定、嚴(yán)重強(qiáng)直者。0～Ⅰ級(jí)定義為輕度，Ⅱ～Ⅲ為中度，Ⅳ為重度，計(jì)算中重度AS比例。

1.4人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)、炎癥因子水平檢測(cè) 留取AS患者的空腹外周靜脈血標(biāo)本5 mL，分離血清后采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)其中HLA-B27及炎癥因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-33的水平。酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司。

2 結(jié) 果

2.1外周血Th17/Treg平衡狀態(tài) AS組患者外周血Th17分布比例及Th17/Treg比值高于對(duì)照組，Treg分布比例低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 外周血Th17/Treg平衡狀態(tài)比較

2.2骶髂關(guān)節(jié)病變程度 不同Th17/Treg比值的AS患者M(jìn)RI骶髂關(guān)節(jié)病變程度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高比值組患者的中重度比例高于低比值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3各組HLA-B27、炎癥因子水平比較 高比值組AS患者血清HLA-B27水平為(57.94±8.42)U/mL、低比值組AS患者血清HLA-B27水平為(30.28±4.11)U/mL。高比值組血清HLA-B27水平高于低比值組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高比值組AS患者血清中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平高于低比值組AS患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表2 不同Th17/Treg比值A(chǔ)S患者的骶髂關(guān)節(jié)病變程度比較[n(%)]

表3 不同Th17/Treg比值A(chǔ)S患者的炎癥因子水平比較

3 討 論

AS的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但免疫系統(tǒng)功能變化在該病發(fā)生發(fā)展中的調(diào)節(jié)作用受到廣泛重視。CD4+T淋巴細(xì)胞主要參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答，其亞群主要包括Th17細(xì)胞及Treg細(xì)胞，生理狀態(tài)下兩者處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，是維持機(jī)體多個(gè)組織臟器功能正常運(yùn)轉(zhuǎn)的重要基礎(chǔ)。Th17細(xì)胞主要參與局部微環(huán)境炎性反應(yīng)，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中發(fā)現(xiàn)其表達(dá)異常并促進(jìn)疾病病情演進(jìn)[8]。Treg細(xì)胞是一種具有調(diào)控作用CD4+T淋巴細(xì)胞亞群，在機(jī)體特異性免疫抑制中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，多種自身免疫性疾病的動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)Treg細(xì)胞表達(dá)量下降，提示其表達(dá)紊亂與自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展具有一定關(guān)系[9-11]。較非系統(tǒng)免疫性疾病但與AS具有相似病癥的骶髂關(guān)節(jié)炎患者來(lái)說(shuō)，文中結(jié)果顯示AS患者外周血中Th17細(xì)胞比例較高、Treg細(xì)胞比例較低，Th17/Treg比值也大幅下降，明確了AS患者的Th17/Treg失衡現(xiàn)狀。Th17/Treg比值可更為直觀、顯著地反映Th17/Treg平衡紊亂情況，關(guān)于AS患者具體Th17/Treg比值與病情嚴(yán)重程度的內(nèi)在聯(lián)系，研究者具體從骶髂關(guān)節(jié)病變程度、HLA-B27、炎癥因子三方面展開(kāi)。

AS主要累及的骨關(guān)節(jié)是骶髂關(guān)節(jié)及脊柱附著點(diǎn)，MRI可準(zhǔn)確觀察到患者的病變嚴(yán)重程度[12-13]。文中不同Th17/Treg比值的AS患者M(jìn)RI病情分級(jí)存在明顯差異，且高Th17/Treg比值者AS病情中重度比例較高，從影像學(xué)層面明確Th17/Treg比值與AS病情呈正相關(guān)。HLA-B27是人體白細(xì)胞抗原，屬于Ⅰ型MHC基因，其表達(dá)陽(yáng)性率在健康人群及脊柱病患者中存在遺傳差別，且諸多研究證實(shí),HLA-B27的表達(dá)與AS具有高度相關(guān)性，超過(guò)90%的AS患者存在HLA-B27陽(yáng)性，而這一數(shù)據(jù)在健康人群中僅為5%～10%[14-15]。文中AS患者中Th17/Treg比值較高者血清HLA-B27水平也較高，直觀說(shuō)明AS患者的Th17/Treg比值與HLA-B27水平呈正相關(guān)，推測(cè)Th17/Treg失衡是促進(jìn)AS患者病情進(jìn)展的直接因素之一、其具體比值可客觀反映AS病情嚴(yán)重程度。

AS是一種慢性炎癥性疾病，檢測(cè)血液中炎癥指標(biāo)水平是評(píng)估該病活動(dòng)性的常規(guī)手段[16-17]。Th17/Treg比值較高的AS患者TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-33的水平較高。TNF-α是典型的促炎因子，其過(guò)表達(dá)可導(dǎo)致全身毒性反應(yīng)并加劇骨破壞，IL-1β、IL-2、IL-33與對(duì)應(yīng)受體結(jié)合可激活肥大細(xì)胞并進(jìn)一步導(dǎo)致其產(chǎn)生更多炎癥因子，擴(kuò)大局部及全身炎性反應(yīng)并加劇骨破壞[18-20]。上述結(jié)果說(shuō)明Th17/Treg比值與AS患者的炎性反應(yīng)程度呈正相關(guān)，從炎性反應(yīng)角度間接明確其對(duì)AS病情評(píng)估的作用。

4 結(jié) 論

AS患者存在明顯Th17/Treg失衡，具體Th17/Treg比值與AS病情嚴(yán)重程度間存在直接相關(guān)關(guān)系，可能是日后AS病情評(píng)估的可靠指標(biāo)之一。文中納入病例數(shù)有限，可能對(duì)數(shù)據(jù)產(chǎn)生一定偏倚，有待后續(xù)大樣本研究開(kāi)展進(jìn)一步夯實(shí)結(jié)論。