田七主要病害調(diào)查及防治藥劑篩選研究

藍(lán)芳+蘇坤+覃恩民+唐玉娟+李良波

摘 要：在廣西百色市靖西縣田七種植區(qū)，通過(guò)調(diào)查和試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：田七病害主要為田七黑斑病、炭疽病、根腐病。通過(guò)鏡檢觀察到各病害的病原菌分生孢子形態(tài)學(xué)特征。田間防治試驗(yàn)中，越冬期園地清理與消毒可作為防治田七葉部病害的一種防治措施。室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)中，供試的4種藥劑中防治田七根腐病和炭疽病較好的藥劑均為50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液，抑菌率分別達(dá)到71.35%、41.89%；防治田七黑斑病較好的藥劑為20%苯醚甲環(huán)唑微乳劑1000倍液，抑菌率為71.37%。

關(guān)鍵詞：作物學(xué)；病害防治；藥劑篩選；田七

中圖分類號(hào)：S432.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20161233030

三七[Panax notoginseng（Burk.） F.H.Chen]，為五加科人參屬多年生草本植物，在廣西境內(nèi)人工栽培的又名田七，其莖、葉、花均可入藥，是中國(guó)特有的名貴中藥材，原產(chǎn)于廣西百色和云南文山州[1]。廣西是田七的主要產(chǎn)區(qū)，目前田七根腐病[3，4]、黑斑病[5]、炭疽病[6]等田七病害在廣西田七產(chǎn)區(qū)發(fā)生較為嚴(yán)重，已成為制約當(dāng)?shù)靥锲弋a(chǎn)業(yè)發(fā)展最重要的因素。本文通過(guò)田間調(diào)查，確定廣西田七產(chǎn)區(qū)的主要病害種類及其病原菌的形態(tài)學(xué)特性，并進(jìn)行了室內(nèi)和田間的化學(xué)防治藥劑篩選，為田七病害的防治提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

于2012年5—11月在廣西百色市靖西縣田七種植區(qū)進(jìn)行田七病害調(diào)查，采集具有典型癥狀的病葉、病莖、病根為標(biāo)本，根據(jù)癥狀類型分類，裝袋保濕，并貼上標(biāo)簽，標(biāo)記好采集時(shí)間、地點(diǎn)。帶回實(shí)驗(yàn)室24h內(nèi)及時(shí)進(jìn)行病原菌分離。

1.1 病原菌的分離、純化

在無(wú)菌的條件下，取新鮮病葉，選擇典型的病斑，洗干凈病葉表面，然后用滅菌解剖刀從病健交界處取小塊病組織。用75%的酒精消毒1min，再用0.1%的升汞液表面消毒30s，最后用無(wú)菌水清洗3次，把已經(jīng)處理好的病組織塊轉(zhuǎn)移至PDA培養(yǎng)基，置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)。3～4d后觀察病原菌生長(zhǎng)情況以及菌落形態(tài)。

在培養(yǎng)基中挑出疑似引起相應(yīng)病癥的菌絲轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，將疑似菌落每個(gè)轉(zhuǎn)接3個(gè)培養(yǎng)皿，做好標(biāo)記，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)（25～28℃，自然光）。5～6d后，新的培養(yǎng)基長(zhǎng)出不同的菌落，此時(shí)再將各種病菌的疑似菌落再轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。此步驟重復(fù)幾次，直到分離出單一的菌落。

1.2 病原菌的鑒定

將純化后的病菌在適宜的條件下培養(yǎng)1個(gè)星期左右，待菌落上產(chǎn)生孢子，通過(guò)顯微鏡觀察即可鑒定出病原菌。注意觀察菌落、孢子堆的大小，顏色和菌絲的生長(zhǎng)情況，菌絲的形態(tài)，是否有隔，孢子或子實(shí)體的形狀、顏色、大小、隔膜數(shù)目等。

1.3 田間防治試驗(yàn)

1.3.1 越冬期園地清理與消毒防治葉部病害

于2012年2月上中旬采取冬期園地清理與消毒處理和對(duì)照，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。冬期園地清理與消毒處理方法是先清除畦面上的枯死莖葉，再用45%的石硫合劑20倍液噴灑畦面，同時(shí)噴灑院內(nèi)的柱子和蔭棚。

1.3.2 發(fā)現(xiàn)中心病株早期用藥處理防治黑斑病

于2012年3月中下旬，在田七葉部首先發(fā)現(xiàn)黑斑病。當(dāng)發(fā)現(xiàn)中心病株時(shí)，使用丙環(huán)唑2000倍液早期用藥處理防治與延遲15d用藥處理作對(duì)照，每處理重復(fù)3次。

1.4 室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)

供試藥劑：50%多菌靈純白可濕性粉劑（四川國(guó)光農(nóng)化股份有限公司）、50%百菌清水乳劑（廣州和為化工有限公司）、50%退菌特可濕性粉劑（河北百納化工助劑有限公司）、20%苯醚甲環(huán)唑微乳劑（海南博士威農(nóng)用化學(xué)有限公司）。

按照生長(zhǎng)速率法進(jìn)行藥效測(cè)定：將PDA培養(yǎng)基加熱融化，冷卻到45℃左右后，將配好的母液與PDA培養(yǎng)基按1：9的比例混勻后制成含量一定藥劑的平板培養(yǎng)基。用打孔器在培養(yǎng)了3d的菌落邊緣打取菌餅，放于含藥的PDA平板中間。設(shè)置不加藥的PDA平板空白對(duì)照，每處理做3次重復(fù)，放在25℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后檢查結(jié)果，測(cè)量菌落的直徑并記錄數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 田七主要病害癥狀及病原菌形態(tài)

在廣西百色市靖西縣田七種植區(qū)，田七病害主要為田七黑斑病、炭疽病、根腐病。在苗期主要病害為田七根腐病，危害程度高，造成嚴(yán)重缺苗，部分地方缺苗率高達(dá)80%。移栽定植后的主要病害為田七黑斑病，危害程度高。在苗期時(shí)也會(huì)危害幼苗莖部，使幼苗折倒。

2.1.1 田七黑斑病

2.1.1.1 田七黑斑病的癥狀

田七黑斑病主要危害葉片，在葉尖或葉中間產(chǎn)生水漬狀褐色病斑，病斑形狀為橢圓形、圓形或不規(guī)則形。病斑中央為褐色，病健交界處為黃色，易破碎。當(dāng)空氣濕度高時(shí)，病斑擴(kuò)大并呈黑褐色。危害莖部、葉柄時(shí)會(huì)使病部縊縮， 凹陷而扭折，有橢圓黑色病斑。

2.1.1.2 田七黑斑病病原菌分生孢子形態(tài)

通過(guò)顯微鏡觀察田七黑斑病病原菌分生孢子為人參鏈格孢Alternaria panax Whetzel，病菌在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)前期菌絲為白色，后期變?yōu)榛液谏囵B(yǎng)基背面顏色為黑褐色。鏡檢分生孢子梗為單生或簇生，不分枝，褐色，有隔膜，直型或曲折型。鏡檢分生孢子黃褐色，倒棍棒形，單生或者2～3個(gè)串生，有3～8個(gè)隔膜，43～113μm×l0～15μm（圖A）。

2.1.2 田七炭疽病

2.1.2.1 田七炭疽病癥狀

田七炭疽病危害葉片時(shí)出現(xiàn)圓形或近圓形黃褐色病斑，邊緣紅褐色明顯，有同心輪紋，后病斑變褐色，嚴(yán)重時(shí)破裂穿孔。葉柄和莖染病時(shí)出現(xiàn)梭形黃褐色凹陷斑，造成葉柄盤曲或莖部扭曲。危害莖基部時(shí)造成成株倒伏或根莖腐爛。

2.1.2.2 田七炭疽病病原菌分生孢子形態(tài)

通過(guò)顯微鏡觀察田七炭疽病病原菌分生孢子為茄鐮孢Fusarium so-lani，病菌在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)前期菌絲為白色，后期變?yōu)榛野咨?。培養(yǎng)7d之后菌落出現(xiàn)淡紅色粘粒，為其分生孢子堆。鏡檢分生孢子無(wú)色單胞，鐮刀狀，頂端尖銳，末端鈍圓，19～23μm×2.5～4.0μm（圖B）。

2.1.3 田七根腐病

2.1.3.1 田七根腐病癥狀

田七根腐病主要危害田七根部，使地上部分長(zhǎng)勢(shì)差，葉片變黃。挖出病株發(fā)現(xiàn)根部染病處變成褐黃色并腐爛，后期病根呈黑褐色，稀泥狀。

2.3.1.2 田七根腐病病原菌分生孢子形態(tài)

通過(guò)顯微鏡觀察田七根腐病病原菌分生孢子為膠孢炭疽菌Colletotrichum，病菌在PDA培養(yǎng)基上菌絲為灰白色，菌落具條紋，密厚。鏡檢分生孢子為不規(guī)則紡錘型，寬短，有3個(gè)或多個(gè)隔膜，26～40μm×5.2～6.3μm（圖C）。

2.2 田間主要病害的防治試驗(yàn)

2.2.1 園地清理與消毒對(duì)防治田七葉部病害的影響

2012年2月上中旬對(duì)田七園地進(jìn)行清理、消毒處理。清除畦面上的枯死莖葉，再用45%的石硫合劑20倍液噴灑畦面，同時(shí)噴灑院內(nèi)的柱子和蔭棚。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1結(jié)果表明：防治效果（%）=（對(duì)照組平均發(fā)病率-實(shí)驗(yàn)組平均發(fā)病率）/對(duì)照組平均發(fā)病率×100%=（54.97-15.81）/54.97×100%=71.24%，防治效果較好。

2.2.2 田七黑斑病早期防治試驗(yàn)效果

表2結(jié)果表明對(duì)于防治田七黑斑病，在發(fā)現(xiàn)中心病株時(shí)用藥與延遲15d后再用藥，防治效果不明顯，發(fā)病率相差不是很大，相差了15.58%。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，越冬期園地清理與消毒可作為防治田七葉部病害的一種防治措施，防治效果不錯(cuò)。而對(duì)于防治田七黑斑病來(lái)說(shuō)，施藥時(shí)間是否及時(shí)對(duì)防治效果有一定的影響。

2.3 藥劑篩選試驗(yàn)結(jié)果

表3結(jié)果表明，不同藥劑對(duì)田七不同的病害防治效果不同。其中50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液適宜用來(lái)防治田七根腐病，抑菌率達(dá)到71.35%，對(duì)田七炭疽病的防治效果較差，抑菌率為41.89%，而對(duì)田七黑斑病沒(méi)有防治效果。50%退菌特可濕性粉劑1000倍液對(duì)田七炭疽病的防治效果較好，抑菌率為34.31%，對(duì)田七根腐病和田七黑斑病防治效果差，抑菌率僅為19.23%和11.33%。20%苯醚甲環(huán)唑微乳劑1000倍液對(duì)田七黑斑病的防治效果最好，抑菌率為71.37%，對(duì)田七根腐病防治效果其次，抑菌率為57.50%，對(duì)田七炭疽病防治效果差，抑菌率僅為27.07%。50%百菌清水乳劑1000倍液對(duì)田七根腐病的防治效果較好，抑菌率為50.00%，對(duì)田七黑斑病和田七炭疽病防治效果差，抑菌率分別為15.90%和2.24%。

從以上結(jié)果來(lái)看，不同藥劑對(duì)不同田七病害防治效果有很大差異。在供試的4種藥劑中，防治田七根腐病和炭疽病的較好藥劑均為50%退菌特可濕性粉劑1000倍液，防治田七黑斑病較好的藥劑為20%苯醚甲環(huán)唑微乳劑1000倍液，但抑制效果都不是很理想。這可能與藥劑選擇、藥劑濃度、實(shí)驗(yàn)誤差有關(guān)，這有待于進(jìn)一步深入研究。

3 討論

田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)：田七病害種類繁多，主要表現(xiàn)為黑斑病、炭疽病、圓斑病、根腐病等，黑斑病等葉部病害在廣西靖西等產(chǎn)業(yè)種植區(qū)發(fā)生較嚴(yán)重。云南文山是三七的主要種植產(chǎn)區(qū)，官會(huì)林[9]等發(fā)現(xiàn)：在文山產(chǎn)區(qū)根腐病最為嚴(yán)重，最高達(dá)70%，損失占各種病害的70%～85%，是田七生產(chǎn)中的毀滅性病害，成為制約田七產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展及農(nóng)業(yè)生態(tài)建設(shè)的重要屏障。這說(shuō)明田七在不同種植區(qū)的主要病害是不同的，其發(fā)生和發(fā)展在很大程度上與當(dāng)?shù)氐牡臏囟?、濕度等外界條件有關(guān)。

在室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)中，比較了4種供試藥劑對(duì)根腐病的抑菌效果，50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液對(duì)根腐病抑菌效果較好。在實(shí)際生產(chǎn)中，為了避免病害菌對(duì)農(nóng)藥的適應(yīng)性，可將這幾種藥劑在田七種植過(guò)程中輪換使用，以有效防治病害的發(fā)生。

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作者簡(jiǎn)介：藍(lán)芳（1967-），女，廣西賓陽(yáng)人，廣西大學(xué)研究生院，助理研究員，主要從事藥用植物資源與研究生管理；李良波（1980-），男，湖北仙桃人，廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院，副教授，主要從事植物化學(xué)研究。