冷凍精子復(fù)蘇及人工輸精

李德柏，李喜春，何 超

長春新牧科技有限公司，吉林長春 130000

1 精液復(fù)蘇

1.1 精液復(fù)蘇前的準(zhǔn)備

精液復(fù)蘇之前需要檢查配種箱中溫度計(jì)、秒表、解精杯、輸精槍、槍套、鑷子、剪刀、衛(wèi)生紙以及長臂手套是否齊全；液氮罐中是否裝滿液氮且罐中凍精數(shù)目是否夠用；調(diào)節(jié)水溫的熱水和涼水是否夠用。

溫度計(jì)校正后方可使用，調(diào)節(jié)水溫嚴(yán)禁使用牛舍水槽內(nèi)的水，恒溫解凍杯在每次使用前先用溫度計(jì)校正水溫。

1.2 凍精復(fù)蘇過程及注意事項(xiàng)

輸精槍及槍套應(yīng)提前預(yù)熱，水平直視溫度計(jì)刻度，將解精杯中水溫調(diào)至38～40 ℃，用鑷子夾取液氮罐中的凍精細(xì)管，將精液置于調(diào)好水溫的解精杯中，計(jì)時(shí)45 s，用紙巾擦熱輸精槍，以靠近臉部不燙為宜，精液復(fù)蘇后，用紙巾擦干細(xì)管表面水分，裝槍細(xì)管剪剪開細(xì)管封口，將預(yù)熱的輸精槍外套固定于輸精槍上，做好配種前精液保溫工作。

液氮罐中正在使用的提桶內(nèi)只能裝1個(gè)大管精液，防止在精液提取的過程中對過多待用精液造成不良影響。精液復(fù)蘇必須在避光處進(jìn)行，每次只能復(fù)蘇一根精液，從液氮罐取精液的過程中，提桶的提取高度要低于罐口10 cm。5 s內(nèi)未能完成精液提取操作，則應(yīng)將提桶再次放入液氮中，30 s后重試，從液氮中取出精液后，將凍精細(xì)管在空氣中暴露 1～2 s，使液氮揮發(fā)，防止爆管。復(fù)蘇水溫38～40 ℃，復(fù)蘇時(shí)間45 s，精液復(fù)蘇時(shí)，凍精細(xì)管必須完全浸于水中。用紙擦熱輸精槍，以靠近臉部感覺槍體微熱而不燙臉為宜。用細(xì)管剪剪掉細(xì)管封口時(shí)，剪口必須平整，且禁止將精液部分剪掉。輸精槍套上外套后，檢查輸精槍外套是否固定到輸精槍上。冬季配種時(shí)，輸精槍及槍套應(yīng)提前預(yù)熱，并做好精液復(fù)蘇后的保溫工作。裝槍后，嘗試推出少量精液，觀察精液能否正常流出，防止精液倒流和槍套堵塞。

2 人工輸精

2.1 人工輸精步驟

對發(fā)情牛進(jìn)行保定，清理直腸內(nèi)糞便，并用紙巾擦去陰門外的糞便，左手握拳，在陰門上方垂直下壓，打開陰門，將輸精槍斜向上45°角進(jìn)入陰道，槍頭達(dá)到子宮頸外口時(shí)，撕開槍套外的保護(hù)套，引導(dǎo)槍頭進(jìn)入子宮體進(jìn)行輸精。輸精后緩慢拔出輸精槍，觀查輸精槍外套的保護(hù)套是否脫落，避免精液流入輸精槍外套的保護(hù)套內(nèi)造成配種失敗，最后對配種牛只進(jìn)行詳細(xì)登記，記錄好配種時(shí)間和配種凍精編號。

2.2 人工輸精操作細(xì)節(jié)

①輸精槍進(jìn)入陰道后槍頭位置與手應(yīng)平行前進(jìn)。②握住子宮頸向前推，將陰道拉直，將槍頭送抵子宮頸位置。③握住子宮頸口，閉合陰道穹窿，引導(dǎo)槍頭進(jìn)入子宮頸。④活動(dòng)手腕握住子宮頸，使輸精槍槍頭部位穿過子宮頸。⑤輸精前用手檢查槍頭在子宮體內(nèi)的位置。⑥緩慢推動(dòng)槍芯，將精液釋放到子宮體內(nèi)。

配種員每周應(yīng)修剪一次指甲，配種時(shí)不允許佩戴戒指或手表等裝飾物。配種前應(yīng)該摸清子宮狀態(tài)，確定是否為有胎牛，育成初配牛檢查子宮發(fā)育是否正常有無生殖缺陷，對存在生殖缺陷牛只盡早淘汰。經(jīng)產(chǎn)母牛檢查子宮恢復(fù)情況有無產(chǎn)后恢復(fù)不良等情況。對于子宮未回復(fù)牛只暫停輸精，子宮恢復(fù)正常后再對該牛進(jìn)行配種。進(jìn)槍時(shí)以向上進(jìn)入分開的陰門前庭段后，略向前下方進(jìn)入陰道宮頸段；輸精槍頭部到達(dá)子宮頸口時(shí)，撕開槍套外的保護(hù)套；用拇指和食指上下握住子宮頸口以閉合陰道穹窿并活動(dòng)手腕引導(dǎo)槍頭進(jìn)入子宮頸。切勿使用蠻力，防止傷害陰道穹窿；輸精槍頭部進(jìn)入子宮體 2 cm 處，用手指確定槍頭位置并緩慢輸精。若輸精槍頭超出子宮頸2.5 cm，精液就只能釋放到一側(cè)子宮角，影響受胎率。凍精解凍后應(yīng)在10 min內(nèi)完成輸精操做。