哮喘及COPD患者血清觸珠蛋白、血紅素結合蛋白的表達及相關性

楊旭 宋磊 張海燕 李丹

(吉林大學白求恩第一醫(yī)院呼吸內科，吉林 長春 130021)

支氣管哮喘(哮喘)和慢性阻塞性肺疾病(COPD)均為常見的呼吸系統(tǒng)疾病，臨床表現(xiàn)以喘息、咳嗽、呼吸困難為主。哮喘是多種細胞及細胞組分參與的氣道慢性炎癥，常伴有氣道高反應性，且氣流受限多為可逆性。CODP與吸入有害氣體及有害顆粒的異常炎癥反應有關，其特征是持續(xù)性、進行性發(fā)展的氣流受限。復雜的發(fā)病機制及相似的臨床表現(xiàn)導致二者的鑒別十分困難。作為急性期反應蛋白血清觸珠蛋白(Hp)、血紅素結合蛋白(Hpx)含量在感染應激時顯著升高〔1〕，研究表明Hp、Hpx可能參與機體的炎癥反應，其血清含量在哮喘及COPD患者中均有不同程度的改變〔2〕。本研究通過檢測血清Hp、Hpx濃度，探索其對哮喘和COPD的診斷價值及與臨床指標的相關性。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取吉林大學白求恩第一醫(yī)院呼吸內科住院哮喘患者47例(哮喘組)及COPD患者52例(COPD組)。哮喘組及COPD組均符合中華醫(yī)學會制定的哮喘及COPD診斷標準〔3，4〕。健康對照組選取門診體檢健康志愿者45例；受試者均排除嚴重心、肝、腎疾病，自身免疫性疾病，精神疾病等引起氣流受限的疾病。3組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組一般資料比較

1.2Hp、Hpx測定方法 抽取所有研究對象空腹肘靜脈血5 ml，室溫下靜置15～30 min至血液凝固，3 000 r/min離心15 min，收集上清液保存于-80℃冰箱。測定時將樣品放于冰上解凍，檢驗步驟嚴格按照試劑盒說明操作。主要試劑和儀器有Hp、Hpx酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(Abcam 英國)、多功能酶標儀 SynergH1 Hybrid Reader(Bio-Tek公司美國)、BNⅡ全自動蛋白分析儀(Sismens Healthcare 德國)。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0軟件進行獨立樣本t檢驗、Logistic回歸分析，根據(jù)受試者工作特征(ROC)曲線評價Hp、Hpx對哮喘及COPD的診斷意義。

2 結 果

2.1各組血清Hp、Hpx表達水平比較 血清Hp、Hpx含量哮喘組顯著高于COPD組及健康對照組(P<0.001)，COPD組顯著高于健康對照組(P<0.05)。見表2。

表2 3組Hp、Hpx表達水平比較

與健康對照組比較：1)P<0.05;與COPD組比較：2)P<0.05

2.2單項生物標志物檢測對疾病診斷意義 血清Hp、Hpx單項及聯(lián)合檢測的特異性、靈敏度及ROC曲線下面積(AUC)及臨界值見表3。(1)Hp：在診斷哮喘時比Hpx表現(xiàn)出更高的靈敏度；在診斷COPD時表現(xiàn)出更好的診斷價值；但在鑒別CODP與哮喘時沒有表現(xiàn)出最佳的診斷意義、特異性和靈敏度。(2) Hpx：在診斷哮喘時比Hp更具有診斷價值及特異性；在診斷COPD時，其特異性與Hp相似；在鑒別COPD與哮喘方面，Hpx的診斷意義、特異性及靈敏度均較Hp高。

表3 各組間單項及組合標志物診斷價值

2.3多項生物標志物檢測對疾病診斷意義 血清Hp、Hpx聯(lián)合檢測的特異性、靈敏度及AUC見表3，表中兩種標志物聯(lián)合檢測其診斷意義均優(yōu)于單項標志物。(1)哮喘組與健康對照組：Hp、Hpx聯(lián)合檢測在哮喘與健康對照組鑒別時較單項標志物具有最大的AUC、更高的靈敏度及特異性。(2) COPD組與健康對照組：Hp、Hpx聯(lián)合檢測在COPD與健康對照組鑒別時更具診斷意義及靈敏度，但沒有表現(xiàn)出突出的特異性。(3) 哮喘組與COPD組：Hp、Hpx聯(lián)合檢測在哮喘組與COPD組表現(xiàn)出最佳的診斷價值及更高的特異性。

3 討 論

生物標志物被定義為細胞內的生物化學組分、結構或功能，能夠客觀測量和評估的指標。因其具有較高的敏感性、較強的特異性和較好的穩(wěn)定性被廣泛研究。通過對生物標志物的檢測，能夠判斷疾病的病理生理過程、發(fā)生發(fā)展、治療及預后等〔5〕。本研究通過檢測血清Hp和Hpx在各研究組中的濃度含量不同，探討其對哮喘及COPD的診斷價值。

Hp又稱結合珠蛋白，其主要作用是與游離血紅蛋白(Hb)結合形成 Hp-Hb復合物，Hb通過釋放游離鐵和亞鐵血紅素參與氧化反應導致機體損傷。研究表明在肺損傷中幾乎都存在紅細胞外滲到肺組織引起氧化損傷，Hp與Hb結合能夠減少這一損傷〔6，7〕。Hp作為一種急性期蛋白，在感染、炎癥、應激時，血清濃度及合成水平明顯升高，表明其具有重要的生理作用〔8〕。葉青等〔9〕研究發(fā)現(xiàn)COPD患者合并肺部感染時Hp含量較正常個體升高，差異具有統(tǒng)計學意義，說明其作為生物標志物對疾病的診斷有著良好的檢測意義。本研究結果說明Hp在哮喘及COPD尤其是COPD診斷時具有可參考的診斷價值。

Hpx是由肝臟合成的急性期反應蛋白，其主要生理功能是清除有害的游離血紅素，證據(jù)表明游離血紅素與溶血性疾病、敗血癥、肺部炎癥等疾病有關，Hpx與其結合后能夠減少游離血紅素對機體造成的氧化損傷〔10〕。Verrills等〔11〕研究發(fā)現(xiàn)慢性鈹塵病導致的肺部炎癥患者肺泡灌洗液中Hpx水平升高。本研究結果提示Hpx是本研究標志物中診斷價值最高的。

研究表明多種生物標志物的聯(lián)合檢驗比單一標志物具有更好的臨床價值〔11〕。對Hp及Hpx聯(lián)合檢測診斷哮喘及COPD的價值進行研究發(fā)現(xiàn)，兩種聯(lián)合檢驗比單項標志物的特異性和靈敏度更高，且其AUC也是最大，這說明兩種標志物聯(lián)合檢測最具有診斷價值。

本研究從生物標志物檢測及聯(lián)合檢測的角度，對哮喘和COPD的診斷及兩者的鑒別進行了有益的探討，由于收集的樣本量較少，所獲得的結果有一定局限性，有待于進一步實驗證實；Hp、Hpx為何在哮喘及COPD表達不同、穩(wěn)定期表達水平是否與急性期一致均有待于深入的研究探討，得到的結果有望應用于哮喘或COPD的治療的幫助。