氯胺菊酯水乳劑的制備及驅(qū)蚊試驗

馮小花,李 暉,杜獻文，羅清明，段洪峰,蔡文杰，李 雄

（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長沙410131;2.湘西民族職業(yè)技術(shù)學院，湖南吉首416000;3.湖南省沅江市黃茅洲鎮(zhèn)動物防疫站，湖南沅江413111）

蚊蟲是威脅人類和動物健康的頭號公敵，在直接叮刺、騷擾的同時傳播多種疾病。目前我國市場銷售的驅(qū)殺蚊蠅藥仍以乳油劑型為主，乳油劑雖有一定的驅(qū)蚊效果，但刺激性大、溶劑易燃且污染環(huán)境，由于新藥開發(fā)需投入大量資金，在當前經(jīng)濟形式下許多公司將重點轉(zhuǎn)向藥物新劑型的開發(fā)。水乳劑(Emulsion in water，EW)是以水為分散介質(zhì)的一類新農(nóng)藥劑型，乳白色，粒徑位于0.1～50.0 μm之間，成分中有機溶劑含量較少或不含有機溶劑，具有對環(huán)境污染小、效果好、使用安全等優(yōu)點。本文采用了O/W（水包油）乳化法制備了氯胺菊酯水乳劑，并對其進行了相關性能測定。

1 材料

1.1 主要試劑

胺菊酯、氯菊酯（武漢某化工有限公司）；胺菊酯對照品（中國獸藥飼料監(jiān)察所）；氯菊酯對照品（中國獸藥飼料監(jiān)察所）；吐溫80（Tween-80，分析純，天津市某試劑廠）；司班80（Span-80，分析純，天津某化學試劑廠)；奶香精（上海某公司）；氯胺菊酯乳油劑（成都某公司）。

1.2 儀器及設備

HHS型電熱恒溫水浴鍋(上海百典儀器設備有限公司)；SG2200HE超聲波清洗器 (上海冠特超聲儀器有限公司)；AUW120D電子分析天平 (日本島津)；燒杯；高效液相色譜分析儀（Agilent 1200,美國安捷倫科技公司）；磁力攪拌器(上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司)；PHS-25型酸度計(上海精密科學儀器有限公司)；電子顯微鏡（日本島津）；白色滌綸蚊帳184cm×90cm×160cm(常州市夢軒紡織品有限公司)。

1.3 試驗動物

白紋伊蚊羽化后2～3日齡未吸血的雌性成蟲，由湖南省畜牧獸醫(yī)研究所蚊蟲研究室提供。

2 方法

2.1 制備工藝

取適量氯菊酯將胺菊酯在80℃條件下溶解，攪拌均勻為A液；稱取吐溫80（Tween-80)、司班80（Span-80)在40℃下混合均勻，為B液；將A液與B液混合后置于攪拌器上于40～60℃條件下保持勻速攪拌狀態(tài)，同時緩緩加入純化水，溶液逐漸變成白色乳狀液，在乳液中加入1g奶香精，加水至定量即可。

2.2 性能檢測

2.2.1 性狀

通過肉眼觀察，對其性狀作出初步評定。標準的水乳劑外觀應為乳白色溶液，搖動后靜置不分層。

2.2.2 乳劑球粒大小測定及分布

取少量的氯胺菊酯水乳劑，加水100倍稀釋后，取一滴滴于載玻片上，電子顯微鏡下觀察乳劑包被的球粒形狀、粒徑及分布情況。

2.2.3 穩(wěn)定性實驗

將3個批次的氯胺菊酯水乳劑于5～10℃下，置放 1、4、8、12 個月后，分別對其性狀、pH 值、分層現(xiàn)象、含量進行檢測。

2.3 驅(qū)蚊試驗

2.3.1 防蚊蚊帳的制備

制備防蚊蚊帳A、B兩組，每組4個蚊帳。防蚊蚊帳A組：將商品蚊帳用清水潤濕后浸入10L防蚊整理液(氯胺菊酯水乳劑整理劑130g/L，粘合劑40 g/L)，40℃浸漬 30 min→脫水→60℃烘干→焙烘(100℃，30s)；防蚊蚊帳B組：將商品蚊帳清水潤濕后浸入10L防蚊整理液 (氯胺菊酯乳油劑整理劑130g/L，粘合劑40 g/L)，40℃浸漬30 min→脫水→60℃烘干→焙烘(100℃，30 s)；

2.3.2 擊倒和致死試驗

參照GB 13917.8-1992(農(nóng)藥登記衛(wèi)生用殺蟲劑的室內(nèi)藥效評價；模擬現(xiàn)場藥效測試方法》，試驗時間段為19∶30～22∶30，在面積50m2、高度2.8m的室內(nèi)掛上經(jīng)防蚊整理的蚊帳，并在蚊帳內(nèi)同時放入誘蚊燈和誘蚊劑，關閉門窗，釋放400只試驗用蚊蟲，每隔30 min記錄擊倒的蚊蟲數(shù)，然后將全部試驗用蚊蟲搜集并轉(zhuǎn)移至清潔的養(yǎng)蟲籠中，并用5%糖水棉球喂養(yǎng)，24 h時檢查死蚊蟲數(shù)，以空白對照試驗對擊倒率和死亡率進行校正。將A、B兩組經(jīng)防蚊整理后的蚊帳分別放置1周、2周、3周、4周后重復上述試驗后，觀察驅(qū)蚊效果。

3 結(jié)果

3.1 性狀

氯胺菊酯水乳劑為乳白色細膩狀乳液，具奶香味。

3.2 乳劑球粒大小測定及分布

由圖1可看出，本實驗做的氯胺菊酯水乳劑的微球粒徑較小，粒徑大小較均勻，且流動性好。圖2顯示氯胺菊酯水乳劑的粒徑位于3～4μm之間的約占了50%，2～3μm之間的約為30%，乳劑粒徑普遍較小，且個體差異很小。

圖1 顯微鏡下氯胺菊酯水乳劑球粒圖

3.3 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

從表1中可看出氯胺菊酯水乳劑的性狀、含量受外界環(huán)境（存放時間及溫度）的影響很小，穩(wěn)定性實驗合格。

表1 留樣觀察實驗結(jié)果

圖2 氯胺菊酯水乳劑粒徑分布圖

3.4 防蚊蚊帳的殺蚊效果

由表2可看出，隨著觀測時間的延長，A、B兩組的蚊蟲擊倒率不斷增加，且A組（氯胺菊酯水乳劑防蚊整理后的蚊帳）比B組（氯胺菊酯乳油劑處理的蚊帳）蚊蟲擊倒率更高，說明具有更好的驅(qū)殺蚊蟲效果；對于不同放置時間的防蚊蚊帳，隨著放置時間的延長，A、B兩組蚊蟲擊倒率和死亡率均有所下降，但A組的降低幅度較B組小，體現(xiàn)了該氯胺菊酯水乳劑具有顯著的緩釋和長效功能。

4 結(jié)論

本研究在配制工藝上，不同于一般氯胺菊酯水乳劑加入有機溶劑（如乙醇等）溶解原料藥物，而是直接采用原料溶解原料（氯菊酯溶解胺菊酯）的方法，不含有機溶劑，減少了有機溶劑對環(huán)境的危害，同時減少了藥物的生產(chǎn)成本。本品采用吐溫80和司班80作為氯胺菊酯水乳劑的表面活性劑，吐溫80為O/W型乳化劑，無毒無刺激，難燃，且具有一定的水溶性，具有優(yōu)良的乳化潤濕、分散和滲透性能，因而作為乳化劑有著廣泛的應用。司班80為W/O型乳化劑，二者以適當比例混合是氯胺菊酯水乳劑保持穩(wěn)定的關鍵所在。氯胺菊酯水乳劑的粒徑普遍位于4～6μm之間，在乳劑中屬于粒徑偏小的一類，粒徑越小，球粒數(shù)量越多，藥物的緩釋效果越好；通過驅(qū)蚊對比試驗，證實了氯胺菊酯的水乳劑比乳油劑具有更顯著更持久的殺蚊效果；本品加入輔助增效劑奶香精，使之具有奶味，掩蓋了該制劑本身的不良氣味，同時也利于吸引更多蚊蠅，便于驅(qū)殺。本品不含有機溶劑，藥物的含量也是參照市場上同類產(chǎn)品油乳劑的含量制備的，理論上是安全的，但為了臨床上確保使用安全，氯胺菊酯水乳劑在推廣前還需進一步做急性毒性等安全性檢測試驗和臨床試驗。

表2 各組防蚊蚊帳的殺蚊效果

[1]段瓊芬,王有瓊,陳思多,等.5%印楝素微乳劑的配方[J].農(nóng)藥,2009,48（4）:252～254.

[2]方維臻,黨 樂,馮海婷,等.5.7%氟胺氰菊酯水乳劑的研制[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2009,37(28):13678～13679,13696.

[3]魏振承,徐志宏,池建偉,等.短肽免疫增強型臨床營養(yǎng)乳劑的配方和制備工藝研究[J].中國糧油學報,2009,24(7):120～123.

[4]王玉娟,葛鳳燕,蔡再生,等.防蚊微膠囊的制備及驅(qū)殺蚊研究[J].印染助劑,2009,26(11)24～27.

[5]陳茂玲,王延東,陳念芬.夫西地酸眼用乳劑的制備及質(zhì)量控制[J].中國實用醫(yī)藥,2009,4（27）：3～4.

[6]程立,劉香臣,王振華,等.復方依諾沙星滴鼻劑的制備與臨床觀察[J].齊魯藥事,2010,29（5）：308～310.

[7]陳福良,尹明明,尹麗輝,等.含有機硅助劑的阿維菌素微乳劑的研制[J].農(nóng)藥學學報,2009,11（4）：480～486.