研究電化學(xué)發(fā)光免疫分析在免疫檢驗中的應(yīng)用情況

吳春波

（東莞市高埗醫(yī)院，廣東 東莞 523000）

電化學(xué)發(fā)光免疫分析（electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）是光化學(xué)發(fā)光與免疫檢測相結(jié)合的新型免疫分析方法，分析標(biāo)記物為電極表面的特異性化學(xué)發(fā)光翻譯官，包括化學(xué)發(fā)光與電化學(xué)兩個組成部分。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法與其他免疫分析法相比較，分析靈敏度更高，且檢驗范圍更為廣泛，檢驗速度更快，檢查安全性高，在臨床上應(yīng)用廣泛[1-2]。本次研究將我院收治的60例乙肝患者作為主要對象，進一步評價電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的臨床應(yīng)用價值，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究對象是2019年3月-2020年3月在我院接受治療的60例乙肝患者，采用隨機數(shù)字表法將其分為兩組，對照組與觀察組各30例。觀察組中：男18例，女12例；年齡從35-74歲不等，平均年齡（56.63±2.45）歲。對照組中：男17例，女13例；年齡34-75歲不等，平均年齡（56.74±2.31）歲。經(jīng)對比兩組的一般資料，無顯著差異，可見兩組存在可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)[3]：（1）所有患者均明確診斷為乙型病毒性肝炎；（2）所有患者的各項基本資料完整，檢查依從性良好；（3）所有患者對于本次研究過程均知情、同意，且均為自愿參與本次研究；（4）醫(yī)院倫理部門批準(zhǔn)通過了此次研究。

排除標(biāo)準(zhǔn)[4]：（1）合并其他肝臟器質(zhì)性病變；（2）合并惡性腫瘤；（3）合并認(rèn)知、行為、言語障礙；（4）合并精神異常，或有精神病史。

1.2 研究方法 對照組（酶聯(lián)免疫吸附實驗定性分析法）：抽取患者5 mL清晨、空腹、靜脈血，將采集的血液標(biāo)本放置于離心機中離心，3000 rpm，離心10 min，取上層血清待測。加入待檢血樣和抗-HBc酶結(jié)合物，恒溫培育，酶標(biāo)抗體和血樣中抗-HBc經(jīng)競爭結(jié)合微孔板上固相抗原結(jié)合位點，洗滌，加入底物顯色，待檢標(biāo)本抗-HBc量越大，則結(jié)合于固定酶標(biāo)抗體量越小。

觀察組（電化學(xué)發(fā)光免疫分析法）：抽取患者5 mL清晨空腹靜脈血，離心，3000 r/min，離心10 min，取上層血清待測。使用電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，使用還原試劑對待測血液標(biāo)本進行預(yù)處理，加入HBcAg，恒溫培育，當(dāng)標(biāo)本與抗-HBc形成抗原抗體復(fù)合物后，經(jīng)生物素標(biāo)記的抗-HBc，使其與HBcAg結(jié)合。加入磁珠，通過鏈霉素與生物素的親和作用，形成固相復(fù)合物。電極表面吸附磁珠后沖洗，讓電極表面結(jié)合物發(fā)生發(fā)光反應(yīng)，并檢出光信號和待檢標(biāo)本抗-HBc，呈負(fù)相關(guān)，說明光信號越強，待檢標(biāo)本的抗-HBc量越小。

1.3 觀察指標(biāo) （1）對兩組患者血液樣本中的甲胎蛋白進行檢測，并對兩組的檢測陽性率進行計算，計算陽性率后進行組間統(tǒng)計學(xué)處理。（2）分別檢測兩組患者的血清CA15-3含量和甲胎蛋白水平，并對兩組的測定結(jié)果進行組間統(tǒng)計學(xué)處理。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 分析處理數(shù)據(jù)運用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件，計數(shù)指標(biāo)表示為例數(shù)/百分率，方法為卡方檢驗；計量指標(biāo)表示為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，方法為t檢驗。P＜0.05表示有顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的甲胎蛋白檢測陽性率對比 相比于對照組，觀察組患者的甲胎蛋白檢測陽性率顯著偏高，兩組數(shù)據(jù)對比，有顯著差異，見表1。

表1 兩組患者的甲胎蛋白檢測陽性率對比

2.2 對比兩組患者的血清CA15-3含量和甲胎蛋白水平 相比于對照組，觀察組患者的血清CA15-3含量和甲胎蛋白水平更高，組間對比存在顯著差異（P＜0.05），具體見表2。

表2 對比兩組患者的血清CA15-3含量和甲胎蛋白（Mean±SD）

3 討論

乙肝是臨床上的常見疾病，若及早發(fā)現(xiàn)、及早治療，能夠延長患者的生命周期，提升患者的生存質(zhì)量。通過檢測血清腫瘤標(biāo)記物的含量可以對病情的進展情況進行判斷，對血清腫瘤標(biāo)記物檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性在很大程度上影響疾病的診斷和后續(xù)治療方案的制定。因此，臨床上要選擇一種兼具準(zhǔn)確性、科學(xué)性和可操作性強的檢驗方法。酶聯(lián)免疫吸附法在臨床檢驗中應(yīng)用頗為廣泛，此種檢驗方法的成本低，操作簡單，但在檢測過程中容易出現(xiàn)誤診和漏診的情況，特異度較低[5]。

本研究顯示，相比于酶聯(lián)免疫吸附實驗定性分析法，用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法進行檢測，甲胎蛋白陽性率更高，且患者的血清CA15-3含量和甲胎蛋白水平更高，充分體現(xiàn)了電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的臨床優(yōu)勢。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法是一種新型的標(biāo)記免疫測定技術(shù)，具有較高的靈敏度和穩(wěn)定性，彌補了酶聯(lián)免疫吸附法的缺陷和不足，借助抗體與抗原的特異性結(jié)合，可對少量標(biāo)志物進行準(zhǔn)確檢測。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法通過電化學(xué)在電極表面引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，可以在電極表面啟動發(fā)光過程循環(huán)，更適用于臨床微量物質(zhì)的測定。作為一種前沿免疫標(biāo)記技術(shù)，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法已經(jīng)成為生命科學(xué)研究和疾病臨床診斷的有效非同位素檢測技術(shù)手段，相關(guān)理論研究也已經(jīng)取得了長足發(fā)展。

綜上，采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法對乙肝患者進行免疫檢驗?zāi)軌蛱岣邫z驗的準(zhǔn)確性，并為臨床診治提供科學(xué)依據(jù)，可進一步推廣應(yīng)用。