早期自然流產(chǎn)胚胎染色體核型分析

歐妙玲，朱曉丹，張玲華

（佛山市婦幼保健院胎兒醫(yī)學(xué)研究所，廣東 佛山 528000）

自然流產(chǎn)是婦產(chǎn)科臨床上的常見疾病，約占臨床妊娠的10%-20%，而早期自然流產(chǎn)約占自然流產(chǎn)患者的80%。造成早期自然流產(chǎn)的原因較多，內(nèi)分泌、機(jī)體免疫、遺傳、血栓形成傾向甚至是環(huán)境因素均有可能造成孕婦在孕早期發(fā)生自然流產(chǎn)。但在眾多的影響因素中，遺傳因素的影響較大，尤其是染色體異常，通常被認(rèn)為是造成早期自然流產(chǎn)的主要危險(xiǎn)因素[1-2]。本次研究對2017年6月-2018年6月在我院確診為早期自然流產(chǎn)的300例患者進(jìn)行回顧性分析，旨在分析早期自然流產(chǎn)胚胎染色體核型，并分析影響因素，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017年6月-2018年6月在我院確診為早期自然流產(chǎn)的300例患者作為主要研究對象，其中，年齡最大者38歲，最小20歲，平均年齡為（27.84±2.16）歲。接受絨毛染色體核型分析的所有研究對象，均對研究知情、同意，自愿參與，簽署知情同意書。

1.2 研究方法 挑取300例患者的10-20 mg絨毛，剪碎后用于細(xì)胞培養(yǎng)。研究使用的試劑包括BI公司提供的BIOAMF-2培養(yǎng)基，使用的儀器主要有LEICA公司提供的染色體自動分析儀、ThermoFisher公司提供的二氧化碳培養(yǎng)箱、日本奧林巴斯CX21顯微鏡。根據(jù)常規(guī)方法培養(yǎng)制片，G顯帶染色。20個(gè)分裂相，分析五個(gè)核型。若有嵌合體，則計(jì)數(shù)100個(gè)分裂相，使用ISCN 2009標(biāo)準(zhǔn)描述進(jìn)行核型分析。

表1 不同年齡早期自然流產(chǎn)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率比較

表2 不同自然流產(chǎn)次數(shù)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率比較

1.3 觀察指標(biāo) （1）對早期自然流產(chǎn)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生情況進(jìn)行準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)胚胎異常核型的發(fā)生率和具體類型。（2）對不同年齡早期自然流產(chǎn)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算后進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。（3）對不同自然流產(chǎn)次數(shù)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算后進(jìn)行組間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 分析處理數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)指標(biāo)表示為例數(shù)/百分率，檢驗(yàn)方法為卡方；計(jì)量指標(biāo)表示為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD），檢驗(yàn)方法為t。若統(tǒng)計(jì)值P＜0.05，則說明組間數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 早期自然流產(chǎn)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率分析 300例早期自然流產(chǎn)患者中，有156例患者發(fā)生胚胎異常核型，發(fā)生率為52.0%。其中，數(shù)目異常148例，包括三體104例，所占比例為70.27%；多倍體38例，所占比例為25.68%；單體6例，所占比例為4.05%。結(jié)構(gòu)異常8例，所占比例為5.13%。

2.2 不同年齡早期自然流產(chǎn)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率比較 年齡≥35歲孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率高于年齡＜35歲孕婦，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具體見表1。

2.3 不同自然流產(chǎn)次數(shù)孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率比較 自然流產(chǎn)1次患者的胚胎異常核型發(fā)生率高于自然流產(chǎn)2次及自然流產(chǎn)超過3次的患者，可見自然流產(chǎn)次數(shù)越多，胚胎異常核型發(fā)生率越低，具體見表2。

3 討論

早期自然流產(chǎn)是指在孕婦在孕早期發(fā)生自然流產(chǎn)，導(dǎo)致早期自然流產(chǎn)的原因較多，但遺傳因素是主要原因。在遺傳因素中，染色體異常是誘發(fā)早期自然流產(chǎn)的最常見原因[3-4]。本次研究結(jié)果顯示，300例早期自然流產(chǎn)患者中，胚胎異常核型發(fā)生率為52.0%，其中數(shù)目異常占94.87%，而數(shù)目異常中，三體占70.27%，多倍體占25.68%，單體占4.05%，結(jié)構(gòu)異常占5.13%。從該結(jié)果中可以看出，胚胎染色體數(shù)目異常是造成早期自然流產(chǎn)的最主要因素。

女性生殖細(xì)胞非整倍體的發(fā)生與其年齡存在一定相關(guān)性，隨著女性年齡的增長，卵母細(xì)胞內(nèi)紡錘體聚合檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白的表達(dá)水平會呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢，而檢驗(yàn)點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)用于控制同源染色體的重要保護(hù)機(jī)制[5-6]。本次研究結(jié)果顯示，年齡≥35歲孕婦的胚胎異常核型發(fā)生率高于年齡＜35歲孕婦，可見孕婦的年齡越大，胚胎核型異常的發(fā)生率越高，說明高齡是導(dǎo)致胚胎染色體異常的主要危險(xiǎn)因素。此外，本次研究結(jié)果顯示，自然流產(chǎn)次數(shù)越多，胚胎異常核型發(fā)生率越低，可見異常核型的發(fā)生會隨著自然流產(chǎn)次數(shù)的增多而降低，這與以往研究結(jié)果中的結(jié)果存在一定差異，可能是因?yàn)榇舜窝芯考{入的研究對象較少。在行細(xì)胞遺傳學(xué)檢測時(shí)，若條件允許，可盡可能選擇高分辨率、高特異度和高靈敏度的分析遺傳學(xué)檢測方法。

綜上，胚胎染色體數(shù)目異常是導(dǎo)致孕婦早期自然流產(chǎn)的主要誘因，而年齡和自然流產(chǎn)次數(shù)是引發(fā)胚胎染色體異常的主要影響因素。通過染色體核型分析，可及早明確自然流產(chǎn)的病因，進(jìn)而為再次妊娠風(fēng)險(xiǎn)評估和優(yōu)生優(yōu)育提供科學(xué)指導(dǎo)。