• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    乳酸菌復(fù)配對(duì)紅腸發(fā)酵中N-亞硝胺 生成的抑制作用

    2020-04-02 03:32:24李秀明仇泓博吳晨燕熊鳳嬌劉靜靜馬儷珍
    食品科學(xué) 2020年6期
    關(guān)鍵詞:亞硝酸鈉亞硝胺發(fā)酵劑

    李秀明,楊 華,王 洋,仇泓博,吳晨燕,熊鳳嬌,劉靜靜,馬儷珍,

    (1.天津農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與生物工程學(xué)院,天津 300384;2.天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,天津 300384;3.天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院,天津 300384)

    紅腸是我國(guó)的傳統(tǒng)肉制品,味道鮮嫩脆彈,色澤紅艷,受人喜愛,在東北地區(qū)具有廣闊的消費(fèi)市場(chǎng)。在紅腸加工過程中常添加亞硝酸鹽,可起到發(fā)色、抑菌、抗氧化、提高風(fēng)味的作用,但成品中殘留的亞硝酸鹽有時(shí)會(huì)超標(biāo)(30 mg/kg),對(duì)人體造成危害[1]。亞硝酸根在酸性條件(如呈微酸性的食品或人體胃酸環(huán)境)會(huì)生成一些不穩(wěn)定的氮氧化物[2],和二級(jí)胺類物質(zhì)結(jié)合生成具有致癌、致畸和致突變性的N-亞硝胺[3]。此外,制作紅腸的原料肉中富含蛋白質(zhì)、各種氨基酸,經(jīng)蛋白酶和氨基酸脫羧酶作用會(huì)生成某些胺類物質(zhì)[4],亦為N-亞硝胺的形成提供了充足的前體物。因此在紅腸制作過程中如何控制產(chǎn)品中N-亞硝胺生成量,對(duì)于食品安全和品質(zhì)控制具有十分重要的意義。

    目前對(duì)于如何阻斷腌肉制品中N-亞硝胺的形成,主要從原料選擇[5]、加工方式[6]、外源添加物(抗壞血酸鈉、VE、茶多酚等)等方面進(jìn)行控制[7-8]。近年來,對(duì)益生菌的研究相繼成為關(guān)注焦點(diǎn)。有研究表明,微生物發(fā)酵如植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、戊糖片球菌等[9-10]具有降低N-亞硝胺前體物亞硝酸鹽的能力,部分乳酸菌如彎曲乳桿菌、戊糖乳桿菌等[11-13]可直接降解N-亞硝胺。因此利用微生物發(fā)酵技術(shù)(特別是益生菌發(fā)酵)降低肉制品中N-亞硝胺的形成是值得深入探究的課題。然而,目前發(fā)酵劑種類和不同的發(fā)酵時(shí)間對(duì)肉制品中N-亞硝胺的抑制效果方面的研究報(bào)道還較少。

    本實(shí)驗(yàn)將發(fā)酵技術(shù)引入傳統(tǒng)紅腸的加工工藝中,在肉餡中分別接種4 種常應(yīng)用于發(fā)酵肉制品的商業(yè)復(fù)合乳酸菌發(fā)酵劑和經(jīng)篩選得到的3 株可降低發(fā)酵風(fēng)干腸中N-亞硝胺的乳酸菌單菌,發(fā)酵不同的時(shí)間,經(jīng)過熟制得到發(fā)酵紅腸新產(chǎn)品。通過對(duì)產(chǎn)品的感官評(píng)定、pH值、乳酸菌數(shù)、亞硝酸鹽、生物胺和N-亞硝胺等相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定,同時(shí)與空白對(duì)照組對(duì)比,分析乳酸菌發(fā)酵劑及發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵紅腸安全品質(zhì)的影響,也為乳酸菌發(fā)酵劑在食品中的應(yīng)用提供了理論參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    新鮮豬后腿肉、豬肥膘 天津市康寧肉制品有限公司; 淀粉、大蒜、雞蛋 天津市紅旗農(nóng)貿(mào)市場(chǎng);SHI-59(木糖葡萄球菌+戊糖片球菌+植物乳桿菌)、WBX-43(肉葡萄球菌+木糖葡萄球菌)、PRO-MIX5(木糖葡萄球菌+清酒乳桿菌+類植物乳桿菌)、VBM-60(木糖葡萄球菌+肉葡萄球菌+戊糖片球菌+乳酸片球菌) 意大利薩科公司;彎曲乳桿菌(Lactobacillus curvatus,Lc)、戊糖乳桿菌(L. pentosus,Lp)和清酒乳桿菌 (L. sake,Ls)由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)教育部乳品科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。

    MRS固體培養(yǎng)基 北京索萊寶科技有限公司;乙腈、二氯甲烷(色譜純)、氯化鈉、無水硫酸鈉、硼酸 天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;高氯酸、丙酮、丹磺酰氯、硝酸鈉和亞硝酸鈉標(biāo)品 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;8 種生物胺(色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、精胺及亞精胺)標(biāo)品、9 種N-亞硝胺標(biāo)品: N-二甲基亞硝胺(N-nitrosodimethylamine,NDMA)、N-二乙基亞硝胺(N-nitrosodiethylamine,NDEA)、N-甲基乙基亞硝胺(N-nitrosomethylethylamine,NMEA)、N-二丁基亞硝胺(N-nitrosodibutylamide,NDBA)、N-二丙基亞硝胺(N-nitrosodipropylamine,NDPA)、N-亞硝基哌啶(N-nitrosopiperidine,NPIP)、N-亞硝基吡咯烷(N-nitrosopyrrolidine,NPYR)、N-亞硝基嗎啉(N-nitrosomorpholine,NMOR)、N-亞硝基二苯胺(N-nitrosodiphenylamine,NDPheA) 美國(guó)Sigma公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    7890A氣相色譜儀(配備氮磷檢測(cè)器)、1200高效液相色譜儀(配備紫外吸收檢測(cè)器) 美國(guó)安捷倫公司;P/ACE MDQ毛細(xì)管電泳儀(配備紫外檢測(cè)器) 美國(guó)貝克曼庫(kù)爾勒公司;PB-10酸度計(jì) 德國(guó)賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;BPX-82恒溫恒濕培養(yǎng)箱 上海博訊儀器設(shè)備有限公司;BJRJ-82絞肉機(jī)、BVBJ-30F真空攪拌機(jī)、BYXX-50煙熏爐 浙江嘉興艾博實(shí)業(yè)有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 發(fā)酵紅腸的加工方法

    各實(shí)驗(yàn)組紅腸的工藝流程:原料選擇→腌制→拌餡(接種)→灌腸→發(fā)酵→干燥→煙熏→蒸煮→烘烤→冷卻→成品。

    腌制:稱取用絞肉機(jī)絞碎的豬后腿肉1 600 g,添加料酒40 g、食鹽56 g、葡萄糖8 g、白糖8 g、復(fù)合磷酸鹽8 g、抗壞血酸鈉1.1 g、亞硝酸鈉0.3 g、水80 mL,于4 ℃冰箱中腌制20 h。

    拌餡灌腸:向腌好的肉中加入肥膘丁400 g、淀粉160 g、蒜泥40 g、白胡椒粉4.8 g、雞蛋160 g、冰水320 g,在此步驟接種不同種類的乳酸菌發(fā)酵劑,再用真空攪拌機(jī)充分拌勻后灌腸。

    發(fā)酵:于35 ℃,80%相對(duì)濕度條件下發(fā)酵。

    熟制:將灌好的腸經(jīng)溫水漂洗、排氣后于煙熏爐中熟制,熟制參數(shù)為:干燥70 ℃ 60 min、煙熏85 ℃ 60 min、蒸煮85 ℃ 60 min、烘烤75 ℃ 60 min。

    1.3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案

    本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)共分為8 組:空白對(duì)照(control check,CK)組,不接種發(fā)酵劑。其余7 組分別接種4 種商業(yè)復(fù)合發(fā)酵劑(SHI-59組、WBX-43組、PRO-MIX5組和VBM-60組)和3 株單菌(Lc組、Lp組和Ls組)。

    將以上不同菌株在拌餡時(shí)以107CFU/g添加量加入,分別發(fā)酵12、16、20、24 h,在不同的發(fā)酵時(shí)間點(diǎn)取樣測(cè)定樣品的乳酸菌數(shù)變化,并將發(fā)酵不同時(shí)間點(diǎn)的樣品進(jìn)行熟制,冷卻后得到成品,取樣進(jìn)行感官評(píng)定、pH值、亞硝酸鹽、硝酸鹽、生物胺、N-亞硝胺的測(cè)定。CK組不接菌不發(fā)酵,僅測(cè)定熟制后成品的各項(xiàng)指標(biāo)。

    1.3.3 指標(biāo)測(cè)定方法

    1.3.3.1 感官評(píng)定方法

    表 1 發(fā)酵紅腸成品的感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Criteria for sensory evaluation of fermented sausage products

    選擇10 位經(jīng)培訓(xùn)合格的感官評(píng)定人員先對(duì)4 個(gè)不同發(fā)酵時(shí)間點(diǎn)的各組紅腸進(jìn)行初步篩選,排除口感上無法接受的組別,再對(duì)剩余各組發(fā)酵紅腸成品按照表1標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)定。

    1.3.3.2 乳酸菌數(shù)的測(cè)定

    參照GB 4789.35—2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 乳酸菌檢驗(yàn)》方法。

    1.3.3.3 pH值的測(cè)定

    參照GB 5009.237—2016《食品pH值的測(cè)定》方法。

    1.3.3.4 亞硝酸鈉和硝酸鈉的測(cè)定

    使用毛細(xì)管電泳法[14]同時(shí)測(cè)定樣品中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量。

    1.3.3.5 生物胺的測(cè)定

    參照杜智慧[15]的方法測(cè)定樣品中的8 種生物胺:色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、酪胺、精胺及亞精胺。

    1.3.3.6 N-亞硝胺的測(cè)定

    參照GB 5009.26—2016《食品中N-亞硝胺類化合物的測(cè)定》測(cè)定樣品中的9 種N-亞硝胺(NDMA、NDEA、NMEA、NDBA、NDPA、NPIP、NPYR、NMOR、NDPheA),同時(shí)用外標(biāo)法分析定量。

    1.3.4 數(shù)據(jù)分析

    2 結(jié)果與分析

    2.1 發(fā)酵12 h的7 組紅腸成品與CK組感官評(píng)價(jià)結(jié)果

    表 2 7 組發(fā)酵紅腸和CK組的感官評(píng)價(jià)結(jié)果Table 2 Sensory evaluation results of control and experimental fermented sausages

    發(fā)酵紅腸加工中,經(jīng)接種7 種發(fā)酵劑,并發(fā)酵不同時(shí)間,發(fā)現(xiàn)隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)(12 h→24 h),發(fā)酵紅腸的氣味及滋味明顯變差,發(fā)酵16 h及以上產(chǎn)生明顯的酸味且不被感官評(píng)價(jià)者所接受,因此本研究?jī)H對(duì)發(fā)酵至第12小時(shí)的不同發(fā)酵紅腸產(chǎn)品進(jìn)行感官評(píng)定。如表2所示, 8 組紅腸產(chǎn)品感官評(píng)價(jià)由好到差依次為:SHI-59>CK> Lc>Ls>Lp>W(wǎng)BX-43>PRO-MIX5>VBM-60。其中SHI-59組發(fā)酵紅腸感官更容易被人接受,該組發(fā)酵紅腸口感微酸、有發(fā)酵香味、無異味、切片性良好、發(fā)色正常、滋味較好,接受度較高。VBM-60組則口感偏酸,發(fā)酵異味感較重,接受度較低。造成不同組口感區(qū)別的原因可能是由于不同乳酸菌發(fā)酵劑活力存在差異,雖在同一發(fā)酵時(shí)間,但不同組發(fā)酵程度不同;且發(fā)酵劑菌種組成不同,可能是由于發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物如香味、滋味等成分[16]存在較大差異。

    2.2 不同乳酸菌復(fù)配組在發(fā)酵的不同時(shí)間點(diǎn)乳酸菌數(shù)動(dòng)態(tài)變化

    表 3 各組樣品在不同發(fā)酵時(shí)間的乳酸菌數(shù)變化Table 3 Changes in lactic acid bacterial number with fermentation time

    如表3所示,在發(fā)酵至第12小時(shí),PRO-MIX5和VBM-60兩組的乳酸菌總數(shù)分別達(dá)到8.64(lg(CFU/g)) 和8.40(lg(CFU/g)),菌活性較強(qiáng),而其他各組乳酸菌數(shù)均在5.16~6.79(lg(CFU/g))范圍。隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng),各組乳酸菌數(shù)整體呈上升趨勢(shì),但SHI-59組、VBM-60組、Ls組在發(fā)酵20 h后乳酸菌數(shù)有所下降,可能是由于在發(fā)酵后期,乳酸菌進(jìn)入衰亡期。Lc和Lp組在發(fā)酵12~24 h期間乳酸菌數(shù)呈緩慢上升趨勢(shì),且均顯著低于其他組(P<0.05),說明這兩組發(fā)酵劑活力低或不適宜在這一體系中生長(zhǎng)。不同乳酸菌發(fā)酵劑活力不同,進(jìn)入衰亡期的時(shí)間以及最大菌活力也有所差異[17],如WBX-43組在發(fā)酵至第20小時(shí)乳酸菌數(shù)已達(dá)到9.04(lg(CFU/g)), 顯著高于其他各組(P<0.05)。由此可見,不同的乳酸菌發(fā)酵劑具有不同的活力,其在不同發(fā)酵時(shí)間菌數(shù)的增長(zhǎng)速度以及生長(zhǎng)特性亦有較大差異,因此篩選在紅腸肉餡體系中適宜生長(zhǎng)的發(fā)酵劑顯得尤為重要。

    2.3 不同乳酸菌復(fù)配組紅腸成品的pH值隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化

    如圖1所示,各組pH值均隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)呈降低趨勢(shì),其中PRO-MIX5和VBM-60組的pH值顯著低于其他5 組(P<0.05),在發(fā)酵至第12小時(shí),pH值分別為5.24和5.34,與表3中乳酸菌數(shù)變化趨勢(shì)一致,這是由于這兩組乳酸菌數(shù)增長(zhǎng)較快,生成的乳酸量大。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得CK組pH值為6.4,WBX-43、SHI-59、Lc、Lp、Ls在發(fā)酵至第12小時(shí)pH值差異不顯著,且均略低于CK組,當(dāng)發(fā)酵至第16小時(shí),5 組之間的pH值顯示出顯著差異 (P<0.05),這種趨勢(shì)一直保持到發(fā)酵24 h,此時(shí)5 組pH值下降程度由大到小順序依次為:WBX-43>Ls>SHI-59>Lc>Lp,這與乳酸菌發(fā)酵劑的產(chǎn)酸能力和活力有關(guān)[18]。

    圖 1 7 組發(fā)酵紅腸的pH值隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化Fig. 1 Changes in pH during sausage fermentation

    2.4 不同乳酸菌復(fù)配組紅腸成品的硝酸鈉和亞硝酸鈉隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化

    7 組發(fā)酵紅腸的硝酸鈉和亞硝酸鈉隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化見圖2。CK組亞硝酸鈉含量為41.63 mg/kg, 從圖2A可以看出,PRO-MIX5和VBM-60組在第12小時(shí)亞硝酸鈉含量明顯低于其他5 組,其含量分別為 7.58 mg/kg和11.01 mg/kg,且隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng),亞硝酸鈉殘留量變化不顯著(P>0.05),這是由于這兩組發(fā)酵劑在發(fā)酵初期菌活力已呈較高狀態(tài),產(chǎn)生了大量乳酸和亞硝酸鹽還原酶降解亞硝酸鈉[19-20],而在發(fā)酵后期作用不顯著;其他5 組亞硝酸鈉殘留量隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)整體呈不同程度的下降趨勢(shì)。張慶芳等[21]研究報(bào)道,當(dāng)pH>4.5時(shí),亞硝酸鹽主要以酶降解為主,在整個(gè)發(fā)酵過程中,各組pH值均在4.5以上,說明各組在發(fā)酵過程中對(duì)亞硝酸鹽的降解主要是亞硝酸鹽還原酶的作用[22],且偏酸性的環(huán)境也為降解率做出了一定的貢獻(xiàn)。

    硝酸鹽對(duì)人體無直接毒性,國(guó)標(biāo)中規(guī)定西式火腿中硝酸鹽和亞硝酸鹽的最大使用量分別為0.5 g/kg和 0.15 g/kg,限定亞硝酸鹽殘留量分別為30 mg/kg和70 mg/kg, 但對(duì)硝酸鹽殘留量并未限定[23]。但其會(huì)在口腔或胃液中硝酸鹽還原菌作用下轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽,表現(xiàn)為亞硝酸鹽的作用毒性[24]。若產(chǎn)品中硝酸鹽含量較多,在貯存期間一些腐敗菌對(duì)硝酸鹽還原,將會(huì)使肉制品存在潛在的安全隱患。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得CK組中硝酸鈉含量為161.00 mg/kg, 由圖2B可以看出,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),各組發(fā)酵紅腸中硝酸鹽含量呈降低趨勢(shì),說明接菌發(fā)酵后可降低發(fā)酵紅腸中硝酸鹽含量,但整體測(cè)得的含量相對(duì)較高,均在90 mg/kg以上。其中VBM-60組在發(fā)酵12 h即能夠較好地降低硝酸鹽含量,這可能是由于該組發(fā)酵菌活力相對(duì)較強(qiáng),產(chǎn)生了一些可降解硝酸鹽的還原酶,被菌體本身生長(zhǎng)所利用,亦有可能被轉(zhuǎn)化為含氮物質(zhì)與胺類結(jié)合形成N-亞硝胺。

    圖 2 7 組發(fā)酵紅腸發(fā)酵不同時(shí)間亞硝酸鈉和硝酸鈉含量的變化Fig. 2 Changes in sodium nitrite and sodium nitrate contents during sausage fermentation

    2.5 不同乳酸菌復(fù)配組紅腸成品的生物胺含量隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化

    生物胺是一類脂肪族、芳香族或雜環(huán)類低分子含氮化合物,在發(fā)酵香腸中生物胺的含量與原料肉的品質(zhì)、發(fā)酵劑種類、發(fā)酵溫度、pH值、含鹽量、生物胺氧化酶、添加劑等因素有關(guān)[25],它主要是由于微生物作用蛋白質(zhì)使其降解為氨基酸,再由氨基酸脫羧反應(yīng)生成,在調(diào)節(jié)核酸和蛋白質(zhì)的合成、生物膜穩(wěn)定性以及生長(zhǎng)發(fā)育方面均有著重要作用[26],但過量攝入生物胺則對(duì)身體有極大危害。目前僅有部分國(guó)家對(duì)食品中生物胺制定了限量標(biāo)準(zhǔn),如歐盟規(guī)定食品中組胺和酪胺含量分別不得超過100 mg/kg和100~800 mg/kg,國(guó)內(nèi)僅在上海地方標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定發(fā)酵肉制品組胺不得超過100 mg/kg[27]。

    由表4可以看出,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),各組發(fā)酵紅腸中8 種生物胺含量在逐漸增多,這是由于隨著乳酸菌數(shù)增加,脫羧酶活性增強(qiáng),使得蛋白質(zhì)降解產(chǎn)生了生物胺;且生物胺作為細(xì)胞生長(zhǎng)過程中重要的物質(zhì),總生物胺也會(huì)隨乳酸菌數(shù)增長(zhǎng)而增多。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),各組發(fā)酵紅腸在不同發(fā)酵時(shí)間均檢測(cè)出腐胺和精胺,發(fā)酵12~20 h,各組紅腸中所產(chǎn)生的腐胺和精胺含量呈緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì),而在20~24 h之間變化不顯著(P>0.05)。在發(fā)酵至第12小時(shí),Lc和Ls組兩組除腐胺和精胺外,還檢測(cè)出尸胺和酪胺,腐胺和尸胺作為一種二胺,能夠和亞硝酸鹽反應(yīng)生成強(qiáng)致癌物N-亞硝胺,常見的生物胺中以組胺毒性最大,其次是酪胺[28],因此相比之下用Lc和Ls發(fā)酵的紅腸產(chǎn)品安全品質(zhì)相對(duì)較低。

    表 4 7 組發(fā)酵紅腸的生物胺含量隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化Table 4 Changes in biogenic amines contents during sausage fermentation

    隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng),脫羧酶活性不斷增強(qiáng),發(fā)酵紅腸中生物胺種類逐漸增多,且含量明顯增加,如苯乙胺、尸胺、酪胺。Lc組尸胺含量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)呈明顯上升趨勢(shì),且由于各組乳酸菌發(fā)酵劑的特性不同,其他各組也在不同發(fā)酵時(shí)間產(chǎn)生了一定量的酪胺。值得注意的是在發(fā)酵至第24小時(shí),VBM-60、Lc和Lp組中產(chǎn)生了組胺。雖然其含量并未超過一些標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,但是此時(shí)各組發(fā)酵紅腸生物胺含量均較高。因此相比之下發(fā)酵時(shí)間以12 h為好,此時(shí)Lp組腐胺(144.50 mg/kg)和精胺含量(57.32 mg/kg)、Ls組精胺含量(59.14 mg/kg)顯著低于CK組(腐胺:181.25 mg/kg;精胺:129.09 mg/kg) (P<0.05),其中Lp組總生物胺含量(201.81 mg/kg)顯著低于其他各組(P<0.05),結(jié)合乳酸菌數(shù)變化,這可能是由于Lp和Ls菌活力弱,所產(chǎn)生的蛋白酶以及氨基酸脫羧酶活力低的緣故。相較于CK組,SHI-59、 PRO-MIX5、VBM-60、Ls組與CK組8 種生物胺的總含量之間差異不顯著(P>0.05)。

    2.6 不同乳酸菌復(fù)配組紅腸成品的N-亞硝胺含量隨不同發(fā)酵時(shí)間的變化

    表 5 CK組紅腸9 種N-亞硝胺含量Table 5 Contents of 9 N-nitrosamines in control group μg/kg

    對(duì)照CK組紅腸中9 種N-亞硝胺含量如表5所示,7 組發(fā)酵紅腸中9 種N-亞硝胺總量隨發(fā)酵時(shí)間的變化如表6所示。

    表 6 7 組發(fā)酵紅腸發(fā)酵不同時(shí)間9 種N-亞硝胺總量的變化Table 6 Changes in total amount of N-nitrosamines during sausage fermentation μg/kg

    由表6可以看出,隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng),除PRO-MIX5和Lc組外,各組紅腸所含N-亞硝胺總量呈逐漸降低趨勢(shì),這可能是由于在發(fā)酵過程中乳酸菌大量增長(zhǎng),產(chǎn)生一些可降解N-亞硝胺的酶系[29],或菌體本身對(duì)一些 N-亞硝胺具有吸附作用[30],降解或吸附了發(fā)酵前期產(chǎn)生的部分N-亞硝胺。發(fā)酵至第12小時(shí),PRO-MIX5和Lc組中 N-亞硝胺總量顯著低于CK組(表5),經(jīng)短時(shí)間發(fā)酵即可起到降低產(chǎn)品中N-亞硝胺的作用。在隨后發(fā)酵16~24 h范圍時(shí),除發(fā)酵至第16小時(shí)的SHI-59、PRO-MIX5、Lp組和發(fā)酵至第20小時(shí)的PRO-MIX5組外,其余各時(shí)間點(diǎn)的各組發(fā)酵紅腸所含N-亞硝胺總量均顯著低于CK組 (P<0.05);特別是當(dāng)發(fā)酵至第24小時(shí),各組N-亞硝胺總量均顯著下降,抑制效果十分顯著。

    目前國(guó)標(biāo)僅限量肉制品中NDMA含量為3 μg/kg[31],本實(shí)驗(yàn)中CK組中NDMA含量為5.15 μg/kg(表5),超過了國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)接菌發(fā)酵后,部分乳酸菌發(fā)酵劑可抑制NDMA的形成,且發(fā)酵劑的組成不同,活性也有差異,因此在不同發(fā)酵時(shí)間NDMA含量動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)區(qū)別較大。由圖3可以看出,WBX-43、Lp組中NDMA含量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)呈顯著降低趨勢(shì),Ls組在發(fā)酵12~20 h,NDMA含量呈顯著降低趨勢(shì),但在發(fā)酵后期至第24小時(shí),NDMA含量有所升高,可能是由于在發(fā)酵后期NDMA蓄積;VBM-60組在發(fā)酵過程中NDMA含量相較于其他發(fā)酵組整體較低;Lc組則除發(fā)酵至第20小時(shí)有所升高,其他發(fā)酵時(shí)間點(diǎn)均較低,說明在應(yīng)用該種發(fā)酵劑降解NDMA時(shí),需控制一定的發(fā)酵時(shí)間才可達(dá)到較好的效果;SHI-59、PRO-MIX5兩組中的NDMA則呈先增長(zhǎng)后降低的趨勢(shì)。因此對(duì)于抑制NDMA效果來看,PROMIX5、VBM-60和Lc組相對(duì)于其他各組可在較短發(fā)酵時(shí)間內(nèi)降低NDMA形成,分別使NDMA含量降低至2.91、0.77 、1.08 μg/kg。

    對(duì)于除NDMA以外的其他8 種N-亞硝胺,目前無國(guó)標(biāo)規(guī)定限量。相比CK組,如圖3B、C所示,除發(fā)酵至第12、16小時(shí)的VBM-60組和發(fā)酵至第16小時(shí)的SHI-59組外,各發(fā)酵組在各個(gè)發(fā)酵時(shí)間對(duì)NMEA均有抑制效果;對(duì)于NDEA,除發(fā)酵至第12小時(shí)的SHI-59和Ls組,其余各發(fā)酵時(shí)間的各組均能顯著降低NDEA含量。如圖3E所示,在發(fā)酵至第24小時(shí),7 種乳酸菌發(fā)酵劑發(fā)酵的紅腸中NDBA均顯著低于CK組,這說明長(zhǎng)時(shí)間的發(fā)酵可降低NDBA的含量;如圖3F所示,對(duì)于NPIP,SHI-59組對(duì)其抑制呈現(xiàn)較強(qiáng)規(guī)律性,隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),在16~24 h,逐漸降低了該組發(fā)酵紅腸中的NPIP含量;而對(duì)于NPYR(圖3G)和NDPheA(圖3I),各個(gè)發(fā)酵組在不同發(fā)酵時(shí)間的含量并未呈現(xiàn)較強(qiáng)規(guī)律性。相反,如圖3D、H所示,接種乳酸菌發(fā)酵后對(duì)NDPA、NMOR的生成并未起到抑制效果,反而具有一定的促進(jìn)作用。

    結(jié)合以上分析結(jié)果,雖然整體呈現(xiàn)發(fā)酵時(shí)間越長(zhǎng),N-亞硝胺含量越低的趨勢(shì),其中PRO-MIX5和Lc兩種發(fā)酵劑在短時(shí)間內(nèi)即可起到顯著降低9 種N-亞硝胺總量的效果;對(duì)于國(guó)標(biāo)中有限定標(biāo)準(zhǔn)的NDMA,PRO-MIX5、Lc和Lp三種發(fā)酵劑在發(fā)酵至第12小時(shí)已達(dá)到較好的抑制效果,應(yīng)用效果好。

    圖 3 7 組發(fā)酵紅腸發(fā)酵不同時(shí)間9 種N-亞硝胺含量的變化Fig. 3 Changes in contents of nine N-nitrosamines during sausage fermentation

    3 討 論

    根據(jù)以上各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果進(jìn)行綜合分析,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),各組乳酸菌數(shù)以不同速度增長(zhǎng),8 種生物胺含量逐漸升高,pH值、亞硝酸鹽和硝酸鹽殘留量則呈降低趨勢(shì),其中硝酸鹽殘留量整體在90~169 mg/kg之間,硝酸鹽主要表現(xiàn)為亞硝酸鹽毒性,但會(huì)受到口腔中的硝酸鹽還原酶和病理狀態(tài)下胃液中的硝酸鹽還原菌作用轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽[32],本研究經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后,硝酸鹽殘留量適度下降,一定程度地提高了產(chǎn)品安全性。但有所不同的是,有研究表明,亞硝酸根離子在酸性環(huán)境中更容易產(chǎn)生一些N2O3等氮氧化物和胺類物質(zhì)結(jié)合生成N-亞 硝胺[33-34],而本研究發(fā)現(xiàn)各發(fā)酵組紅腸中9 種N-亞硝胺含量隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)均呈降低趨勢(shì),這可能是由于乳酸菌能夠產(chǎn)生一些抑制N-亞硝胺形成的物質(zhì),如 肖亞慶等[35]發(fā)現(xiàn)戊糖乳桿菌中位于細(xì)胞壁最外層的表層蛋白具有降解NDMA和NDEA的效果,隨著乳酸菌數(shù)增長(zhǎng),這些可抑制N-亞硝胺的物質(zhì)不斷蓄積,從而使得所得發(fā)酵紅腸產(chǎn)品中N-亞硝胺含量降低。但發(fā)酵時(shí)間越長(zhǎng),會(huì)使得一些生物胺含量增加,過量時(shí)會(huì)導(dǎo)致嘔吐、呼吸困難等癥狀[36];且對(duì)于本無發(fā)酵工藝的紅腸來說,長(zhǎng)時(shí)間的發(fā)酵對(duì)風(fēng)味破壞嚴(yán)重,口感偏酸,不能夠被品評(píng)者接受,因此選擇適度發(fā)酵12 h為佳。

    本研究所篩選的7 種乳酸菌發(fā)酵劑中,其中 PRO-MIX5和VBM-60兩種乳酸菌活力最強(qiáng),產(chǎn)酸能力、亞硝酸鹽的降解速度均顯著優(yōu)于其他各組,兩種發(fā)酵劑在適度發(fā)酵至第12小時(shí)即可顯著降低9 種N-亞硝胺含量,且PRO-MIX5組中8 種生物胺總量與CK組差異不顯著。綜合來看,PRO-MIX5提高紅腸產(chǎn)品安全品質(zhì)應(yīng)用效果較好。對(duì)于增加發(fā)酵技術(shù)的紅腸的口感,還需進(jìn)行一定的消費(fèi)引導(dǎo),或在后期進(jìn)一步深入研究,提取乳酸菌增長(zhǎng)所產(chǎn)生的能夠抑制N-亞硝胺的物質(zhì),直接添加至肉餡中,以達(dá)到既提高產(chǎn)品品質(zhì)又不影響產(chǎn)品風(fēng)味的效果,甚至可應(yīng)用于其他肉制品中,將會(huì)有更實(shí)際的應(yīng)用價(jià)值。

    4 結(jié) 論

    本研究結(jié)果表明,使用PRO-MIX5乳酸菌發(fā)酵劑接種至紅腸肉餡中,經(jīng)發(fā)酵12 h,乳酸菌數(shù)達(dá)到 8.64(lg(CFU/g)),可顯著降低9 種N-亞硝胺總量至8.68 μg/kg,降低NDMA至3.07 μg/kg;紅腸pH值為5.24;顯著降低亞硝酸鹽殘留量至7.58 mg/kg,硝酸鹽含量為141.84 mg/kg;8 種生物胺總量為320.15 mg/kg,且與CK組差異不顯著。該種發(fā)酵劑相比其他6 種能夠顯著提高發(fā)酵紅腸的安全品質(zhì),也為制作新型發(fā)酵紅腸提供了理論指導(dǎo)。

    猜你喜歡
    亞硝酸鈉亞硝胺發(fā)酵劑
    亞硝酸鈉中紅外光譜及熱變性分析
    酸面團(tuán)發(fā)酵劑在發(fā)酵面食品加工中的研究進(jìn)展
    高效、綠色、環(huán)保發(fā)酵劑——酵素菌速腐劑
    生姜對(duì)亞硝胺合成及體內(nèi)代謝活化的抑制作用
    云南化工(2020年11期)2021-01-14 00:50:38
    藤茶抑制N-亞硝胺的生成及誘導(dǎo)人前列腺癌PC-3細(xì)胞凋亡作用
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:29
    亞硝酸鈉價(jià)格上漲
    碳納米管/石墨烯負(fù)載四氨基鈷酞菁電極用于亞硝酸鈉的檢測(cè)
    噴霧干燥法制備直投式霉豆渣發(fā)酵劑的研究
    植物乳桿菌AB-1降解亞硝酸鈉的條件優(yōu)化
    嗜酸乳桿菌NX2-6凍干發(fā)酵劑的研究
    深夜精品福利| 五月开心婷婷网| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 丰满少妇做爰视频| 午夜两性在线视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲精品美女久久av网站| 国产又色又爽无遮挡免| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 五月天丁香电影| 另类精品久久| 日本欧美视频一区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 成人午夜精彩视频在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 国产精品国产三级国产专区5o| 午夜免费成人在线视频| 免费少妇av软件| 看免费成人av毛片| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 免费人妻精品一区二区三区视频| 亚洲综合色网址| 国产高清videossex| 在线观看免费高清a一片| 丝袜脚勾引网站| 激情视频va一区二区三区| 午夜两性在线视频| 99九九在线精品视频| 日本欧美国产在线视频| 久久久久久久国产电影| 精品人妻1区二区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 美女午夜性视频免费| 在线观看人妻少妇| 精品亚洲成国产av| 国产免费又黄又爽又色| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲国产日韩一区二区| 欧美激情高清一区二区三区| 精品免费久久久久久久清纯 | 老司机在亚洲福利影院| 悠悠久久av| 午夜激情av网站| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 性色av一级| 999精品在线视频| av在线app专区| 一区福利在线观看| 亚洲人成电影观看| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美成人午夜精品| 久久天堂一区二区三区四区| 久久精品亚洲av国产电影网| 9色porny在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 久久精品久久精品一区二区三区| 少妇粗大呻吟视频| 国产一区二区激情短视频 | 日韩中文字幕视频在线看片| 精品一区二区三区av网在线观看 | 悠悠久久av| 十八禁高潮呻吟视频| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | av天堂久久9| 精品第一国产精品| 热re99久久国产66热| 精品高清国产在线一区| 精品国产国语对白av| 脱女人内裤的视频| 老司机深夜福利视频在线观看 | 97精品久久久久久久久久精品| 啦啦啦啦在线视频资源| av在线app专区| 青春草视频在线免费观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产免费现黄频在线看| 精品免费久久久久久久清纯 | 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲色图综合在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 久久精品久久久久久久性| 午夜福利视频在线观看免费| 国产成人一区二区在线| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产精品 国内视频| 天天影视国产精品| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲九九香蕉| 十八禁人妻一区二区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 高潮久久久久久久久久久不卡| a 毛片基地| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲国产精品成人久久小说| 韩国高清视频一区二区三区| 午夜视频精品福利| 日本91视频免费播放| 欧美在线黄色| 国产伦理片在线播放av一区| 国产精品一区二区在线观看99| 51午夜福利影视在线观看| 久久性视频一级片| 又大又黄又爽视频免费| 一级毛片 在线播放| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 精品熟女少妇八av免费久了| 2018国产大陆天天弄谢| 美女福利国产在线| 在线观看免费高清a一片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 啦啦啦在线免费观看视频4| 日日夜夜操网爽| 午夜激情av网站| 91九色精品人成在线观看| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产成人a∨麻豆精品| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲精品国产av成人精品| 自线自在国产av| 欧美黄色片欧美黄色片| 免费观看人在逋| 国产一区二区三区av在线| 成人国语在线视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 日本av免费视频播放| 国产色视频综合| 大码成人一级视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 9色porny在线观看| 人妻人人澡人人爽人人| 下体分泌物呈黄色| 免费在线观看影片大全网站 | 精品少妇久久久久久888优播| 丰满迷人的少妇在线观看| 最近手机中文字幕大全| 国精品久久久久久国模美| 久久久久久久精品精品| 97人妻天天添夜夜摸| 女性被躁到高潮视频| 一本大道久久a久久精品| 超碰97精品在线观看| 在线观看人妻少妇| 黄色视频不卡| 国产成人系列免费观看| 午夜影院在线不卡| 国产欧美日韩精品亚洲av| 色94色欧美一区二区| 欧美97在线视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 色网站视频免费| 麻豆国产av国片精品| 成人国语在线视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲精品在线美女| 少妇精品久久久久久久| 岛国毛片在线播放| 国产男女超爽视频在线观看| 国产成人影院久久av| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产av国产精品国产| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜激情av网站| 天天影视国产精品| 久久人妻福利社区极品人妻图片 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产主播在线观看一区二区 | 日日夜夜操网爽| 久久精品久久久久久久性| 国产1区2区3区精品| 国产精品一二三区在线看| 精品视频人人做人人爽| 国产伦人伦偷精品视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 丁香六月欧美| 老司机亚洲免费影院| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 中文字幕制服av| 另类亚洲欧美激情| 男女之事视频高清在线观看 | 欧美精品av麻豆av| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产在线观看jvid| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产成人影院久久av| 后天国语完整版免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 丁香六月欧美| 一二三四在线观看免费中文在| 少妇精品久久久久久久| 亚洲久久久国产精品| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 又大又黄又爽视频免费| 看免费av毛片| 婷婷色综合www| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 熟女av电影| 美女主播在线视频| 青青草视频在线视频观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美av亚洲av综合av国产av| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲国产欧美网| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产真人三级小视频在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 精品欧美一区二区三区在线| 精品久久久精品久久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 免费高清在线观看日韩| 国产国语露脸激情在线看| 久久久久久久久免费视频了| 高清欧美精品videossex| videos熟女内射| 久久鲁丝午夜福利片| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产精品一区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲精品国产av蜜桃| 三上悠亚av全集在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 精品人妻在线不人妻| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲专区国产一区二区| 啦啦啦 在线观看视频| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 老熟女久久久| 大型av网站在线播放| 欧美久久黑人一区二区| 悠悠久久av| 天堂中文最新版在线下载| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美 日韩 精品 国产| 成人免费观看视频高清| 成人三级做爰电影| 午夜两性在线视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲国产av新网站| 欧美中文综合在线视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| av国产精品久久久久影院| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜福利乱码中文字幕| 国产成人精品久久二区二区91| 国产成人欧美在线观看 | 9191精品国产免费久久| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 好男人电影高清在线观看| 亚洲九九香蕉| 69精品国产乱码久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 午夜福利影视在线免费观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲国产日韩一区二区| 国产精品一国产av| 搡老乐熟女国产| 9热在线视频观看99| 99久久人妻综合| 久久女婷五月综合色啪小说| 99热网站在线观看| 99久久综合免费| 精品人妻1区二区| 国产精品av久久久久免费| 波多野结衣一区麻豆| 黑人欧美特级aaaaaa片| 免费日韩欧美在线观看| 赤兔流量卡办理| 成人免费观看视频高清| 国产精品成人在线| 黄片播放在线免费| 国产亚洲av高清不卡| 国产xxxxx性猛交| www.av在线官网国产| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 99国产精品一区二区三区| 日韩电影二区| 国产成人精品无人区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 大码成人一级视频| 国产精品99久久99久久久不卡| av欧美777| 观看av在线不卡| 无限看片的www在线观看| 国产在线一区二区三区精| 天天添夜夜摸| 成年女人毛片免费观看观看9 | 十分钟在线观看高清视频www| 大片电影免费在线观看免费| 麻豆乱淫一区二区| 国产一卡二卡三卡精品| 成人黄色视频免费在线看| 日本vs欧美在线观看视频| 一级毛片女人18水好多 | 午夜福利免费观看在线| 午夜老司机福利片| 国产精品久久久久成人av| 国产亚洲一区二区精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲,欧美,日韩| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久久网色| 熟女av电影| 777米奇影视久久| 少妇粗大呻吟视频| 伊人亚洲综合成人网| 热re99久久国产66热| 少妇被粗大的猛进出69影院| 观看av在线不卡| netflix在线观看网站| 一区福利在线观看| 视频区图区小说| 在线 av 中文字幕| 99精国产麻豆久久婷婷| 成人三级做爰电影| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲欧洲日产国产| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 岛国毛片在线播放| 免费av中文字幕在线| 欧美成人午夜精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 永久免费av网站大全| 高潮久久久久久久久久久不卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 中文字幕最新亚洲高清| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 欧美人与善性xxx| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品亚洲av一区麻豆| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产免费福利视频在线观看| 国产av国产精品国产| 两个人免费观看高清视频| 精品国产一区二区久久| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 午夜日韩欧美国产| h视频一区二区三区| 一区在线观看完整版| 五月天丁香电影| 黄色视频不卡| av网站在线播放免费| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 美女福利国产在线| 国产午夜精品一二区理论片| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲精品第二区| 国产精品一区二区在线观看99| 多毛熟女@视频| 乱人伦中国视频| 中国美女看黄片| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美激情极品国产一区二区三区| 91麻豆av在线| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 男女之事视频高清在线观看 | 亚洲国产精品国产精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一本大道久久a久久精品| 国产在线视频一区二区| 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产成人精品久久二区二区91| 中文字幕av电影在线播放| 两个人免费观看高清视频| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲欧美激情在线| 精品国产乱码久久久久久男人| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 十分钟在线观看高清视频www| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲一码二码三码区别大吗| 黄片播放在线免费| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中文欧美无线码| 日本欧美国产在线视频| 亚洲久久久国产精品| 少妇的丰满在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲精品一二三| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲国产成人一精品久久久| 免费看十八禁软件| 国产精品久久久久成人av| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 嫩草影视91久久| 久久精品亚洲av国产电影网| a级毛片黄视频| 国产免费现黄频在线看| 9色porny在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产一区二区在线观看av| 热re99久久精品国产66热6| 51午夜福利影视在线观看| 在线观看免费高清a一片| 久久亚洲国产成人精品v| 久久久国产一区二区| 日本五十路高清| 免费观看a级毛片全部| 一级黄色大片毛片| 久久精品国产亚洲av高清一级| 热re99久久国产66热| 国产欧美日韩精品亚洲av| 精品第一国产精品| 午夜免费观看性视频| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美日韩黄片免| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品一区二区在线不卡| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲国产av新网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久久久久久久久久久久大奶| 不卡av一区二区三区| 老司机影院毛片| 国产一区二区 视频在线| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美久久黑人一区二区| 欧美在线黄色| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 激情视频va一区二区三区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲av片天天在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 久久ye,这里只有精品| 亚洲国产看品久久| 欧美黄色淫秽网站| 好男人电影高清在线观看| 只有这里有精品99| 国产精品免费视频内射| 大话2 男鬼变身卡| 美女福利国产在线| 欧美日本中文国产一区发布| 男女高潮啪啪啪动态图| 日韩视频在线欧美| 亚洲成国产人片在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲九九香蕉| 一级毛片 在线播放| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久精品成人免费网站| 国产99久久九九免费精品| 国产欧美日韩一区二区三 | 亚洲美女黄色视频免费看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 中文字幕色久视频| av线在线观看网站| 日本一区二区免费在线视频| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲av成人精品一二三区| 欧美 日韩 精品 国产| 国产黄频视频在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 黄频高清免费视频| 亚洲国产最新在线播放| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲免费av在线视频| 久久国产精品影院| 国产成人精品久久二区二区91| 老司机深夜福利视频在线观看 | 天堂中文最新版在线下载| 日韩免费高清中文字幕av| 国产不卡av网站在线观看| 日韩大片免费观看网站| av在线app专区| 亚洲伊人久久精品综合| 99热全是精品| 1024视频免费在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 一区福利在线观看| 精品久久蜜臀av无| 国产在线观看jvid| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 精品人妻1区二区| 性少妇av在线| 午夜免费成人在线视频| 人人妻人人澡人人看| 亚洲 国产 在线| 人人妻人人澡人人看| 自线自在国产av| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 亚洲久久久国产精品| 成年女人毛片免费观看观看9 | 一区在线观看完整版| 大片免费播放器 马上看| 国产淫语在线视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美性长视频在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲国产欧美在线一区| 午夜视频精品福利| 99国产精品一区二区蜜桃av | 桃花免费在线播放| 亚洲熟女毛片儿| 成人亚洲欧美一区二区av| 男女边吃奶边做爰视频| 嫩草影视91久久| 男女边摸边吃奶| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产极品粉嫩免费观看在线| 欧美日韩av久久| 亚洲中文av在线| 男女国产视频网站| 午夜免费成人在线视频| 欧美日韩成人在线一区二区| 婷婷色综合www| www.999成人在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产成人欧美| 国产福利在线免费观看视频| 午夜福利视频精品| 亚洲人成77777在线视频| 午夜91福利影院| 精品国产乱码久久久久久男人| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久人妻熟女aⅴ| 不卡av一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av | 久久狼人影院| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲成国产人片在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 女人精品久久久久毛片| videos熟女内射| 大码成人一级视频| 成年动漫av网址| 久久久久精品国产欧美久久久 | 新久久久久国产一级毛片| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 午夜影院在线不卡| xxx大片免费视频| 久热这里只有精品99| av天堂久久9| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 九草在线视频观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 亚洲国产欧美网| 国产亚洲精品久久久久5区| 成年人午夜在线观看视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 国产黄频视频在线观看| 黄色 视频免费看| 国产成人av教育| 免费黄频网站在线观看国产| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 久久久精品免费免费高清| 伦理电影免费视频| 91精品三级在线观看| 99国产精品99久久久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美在线一区亚洲| 欧美成人午夜精品| 美女主播在线视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产xxxxx性猛交| 欧美少妇被猛烈插入视频| 免费在线观看完整版高清| 日日夜夜操网爽| 成人亚洲欧美一区二区av| 在现免费观看毛片| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲av综合色区一区| 日本wwww免费看| 天天影视国产精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 美女中出高潮动态图| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 啦啦啦在线免费观看视频4| 丝袜美腿诱惑在线| 精品福利观看| 国产色视频综合| 999精品在线视频| e午夜精品久久久久久久| 成年动漫av网址| 国产成人av激情在线播放| av有码第一页| 亚洲精品国产av成人精品| 男女免费视频国产| 日韩一区二区三区影片| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲av在线观看美女高潮| 精品国产一区二区久久| 国产野战对白在线观看| 精品欧美一区二区三区在线| 国产av一区二区精品久久| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事|