(寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院,寧夏銀川 750021)
隨著人們生活質(zhì)量的提高,因營養(yǎng)失衡造成的如糖尿病、肥胖癥、便秘等文明病已經(jīng)嚴(yán)重威脅著人類健康。研究證明,膳食纖維的攝入量與現(xiàn)代文明病的預(yù)防和治療密切相關(guān)[1]。膳食纖維是指在人體小腸內(nèi)抵抗消化吸收而在大腸內(nèi)能夠完全或部分發(fā)酵的多糖類碳水化合物[2],具有良好的水合特性、持油性、陽離子交換能力,吸附作用等,因能改善食品感官及流變特性[3],調(diào)節(jié)人體腸內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)、降低血清膽固醇、降低餐后血糖和預(yù)防肥胖癥[4-6]而受到人們的高度重視。
紅棗含有豐富的鉀、鈣、鐵、錳、鋅等和維生素C、B1及B2,且富含蘆丁、多糖、環(huán)磷腺苷、黃酮、皂苷等活性成分[7],可提高機(jī)體免疫力、抗氧化、防止衰老、降低膽固醇、保護(hù)肝臟等[8-9]。紅棗除鮮食、干制外,已開發(fā)為紅棗果汁、果酒等多種深加工產(chǎn)品,加工中產(chǎn)生的大量棗渣多作為廢棄物或直接用作飼料處理。棗渣除含有豐富的蛋白質(zhì)、淀粉、天然紅色素外,還含有3.1%的粗纖維[10]。目前國內(nèi)對紅棗果渣研究較少,大多集中在棗渣膳食纖維的提取、改性、功能性質(zhì)等方面。張向前等[11]、張孟凡等[12]分別采用酶解法、超聲輔助-酶解協(xié)同法研究了紅棗膳食纖維的提取工藝;孫靜等[10]研究了高溫蒸煮結(jié)合酶解改性棗渣膳食纖維;謝惠等[13]、張麗芬等[14]分別研究了紅棗可溶性膳食纖維的抗氧化活性和抗脂質(zhì)過氧化作用,有關(guān)紅棗果汁果渣與果酒果渣膳食纖維功能特性的差異有待深入探討。本實(shí)驗(yàn)研究了紅棗果汁果渣與果酒果渣膳食纖維功能特性,以期為提高紅棗深加工產(chǎn)品附加值、開發(fā)紅棗膳食纖維及膳食纖維應(yīng)用于食品提供理論指導(dǎo)。
紅棗果汁果渣、果酒果渣 寧夏大學(xué)食品化學(xué)與分析實(shí)驗(yàn)室自制;安琪SY型葡萄酒果酒專用酵母 安琪酵母股份有限公司;α-淀粉酶(≥4000 U/g) 北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;膽固醇、脫氧膽酸鈉 天津市凱通化學(xué)試劑有限公司;蒽酮、鄰苯二甲醛、糠醛、葡萄糖 均為分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;雞蛋、棕櫚油 均為食品級。
722-型可見分光光度計(jì) 上海棱光技術(shù)有限公司;HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋 天津匯科儀器設(shè)備有限公司;GL-10C離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;DHP型電熱恒溫培養(yǎng)箱 常州菲普儀器廠;85-2型恒溫磁力攪拌器 上海藍(lán)凱儀器儀表有限公司。
1.2.1 膳食纖維的制備 選擇無霉?fàn)€紅棗加入3倍重量的純凈水浸泡5 h后脫核打漿,將漿液過60目篩,濾出適量棗渣干燥后即得果汁果渣,將剩余果渣置于無菌發(fā)酵罐中,按0.4 g/L添加酵母菌,發(fā)酵8 d后,糖度不再變化,無氣泡產(chǎn)生,無明顯發(fā)酵跡象,說明此時(shí)發(fā)酵結(jié)束,過濾即得果酒果渣。將紅棗果汁果渣和發(fā)酵2、4、6、8 d的果酒果渣分別經(jīng)水洗3~5遍,除去果肉,瀝干水分,45 ℃烘干,粉碎過40目篩,以料液比1∶10 g/mL加入0.3%α-淀粉酶于60 ℃酶解1 h,100 ℃煮沸5 min滅酶活,冷卻、過濾,濾渣按1∶12 g/mL料液比加入0.01 mol/L NaOH,50 ℃堿解1 h,冷卻、過濾、65 ℃熱風(fēng)干燥即得到膳食纖維[10]。
1.2.2 持水力的測定 準(zhǔn)確稱取1.0 g紅棗果汁果渣膳食纖維和發(fā)酵2、4、6、8 d的果酒果渣膳食纖維(下同)樣品于15 mL離心管中,加入10 mL蒸餾水,充分?jǐn)嚢枋箻悠坊靹?密封后室溫靜置24 h,4000 r/min離心25 min,棄上清液,并用濾紙吸干管壁殘留水分,稱量沉淀物濕質(zhì)量,計(jì)算持水力[15]。
式(1)
式中:m1為離心管質(zhì)量,g;m2為吸水后樣品和離心管質(zhì)量和,g;m0為樣品干質(zhì)量,g。
1.2.3 膨脹力的測定 準(zhǔn)確稱取1.0 g膳食纖維樣品于10 mL帶刻度試管中,測干樣品體積,并向其中加入蒸餾水5 mL,充分混勻,密封后室溫下靜置24 h,準(zhǔn)確讀取膨脹后的體積數(shù),計(jì)算膨脹力[16]。
式(2)
式中:V2為膨脹后樣品的體積,mL;V1為干樣品的體積,mL;m為樣品干質(zhì)量,g。
1.2.4 溶解性的測定 準(zhǔn)確稱取1.0 g膳食纖維樣品于離心管中,按3∶100 (g/mL)加入蒸餾水,充分?jǐn)嚢杌靹蚝?85 ℃恒溫水浴30 min,3000 r/min離心20 min,上清液于105 ℃烘至恒質(zhì)量,計(jì)算溶解性[17]。
式(3)
式中:m1為離心管質(zhì)量,g;m2為上清液烘至恒質(zhì)量和離心管的質(zhì)量,g;m0為樣品干質(zhì)量,g。
1.2.5 持油力的測定 準(zhǔn)確稱取0.5 g膳食纖維樣品于離心管中,加入花生油10 mL,充分混勻,37 ℃靜置1 h,5000 r/min離心20 min,傾去上層油,用濾紙吸干游離的花生油,記錄吸附花生油樣品質(zhì)量為m2,計(jì)算持油力[18]。
式(4)
式中:m1為樣品干質(zhì)量,g;m2為吸油后樣品的質(zhì)量,g。
1.2.6 陽離子交換能力的測定 稱取0.5 g膳食纖維于錐形瓶中,加入0.1 mol/L鹽酸溶液30 mL,室溫靜置24 h后過濾,并用蒸餾水反復(fù)洗滌濾渣,直到濾液中不含氯離子為止。在處理后的樣品中加入5%氯化鈉溶液100 mL,用磁力攪拌機(jī)攪拌均勻后,以0.5%酚酞-乙醇溶液作為反應(yīng)指示劑,用0.1 mol/L NaOH溶液滴定,邊滴定邊振搖,溶液變色5 s內(nèi)不褪色即為滴定終點(diǎn),同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn),重復(fù)測定3次。計(jì)算陽離子交換能力[19]。
式(5)
式中:V0為空白對照消耗的氫氧化鈉溶液體積,mL;V1為膳食纖維樣品消耗的氫氧化鈉溶液體積,mL;M為樣品干質(zhì)量,g;0.1為氫氧化鈉溶液濃度,mol/L。
1.2.7 吸附膽固醇能力的測定 稱取2.0 g膳食纖維樣品于錐形瓶中,加入用9倍餾水稀釋的蛋黃液50 g,調(diào)節(jié)pH至7.0,37 ℃恒溫水浴振蕩2 h,以4000 r/min離心20 min,取0.1 mL上清液,采用鄰苯二甲醛法于550 nm處測吸光度,對比固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線換算吸附膽固醇量[20]。
式(6)
式中:m0為樣品干質(zhì)量,g;m1為吸附前蛋黃中膽固醇量,mg;m2為吸附后上清液中膽固醇量,mg。
1.2.8 吸附膽酸鈉能力的測定 準(zhǔn)確稱取0.2 g膽酸鈉于錐形瓶中,加入0.15 mol/L NaCl溶液100 mL,調(diào)節(jié)pH6.0,分別加入膳食纖維樣品1.0 g,攪拌均勻,37 ℃振搖2 h,4000 r/min離心20 min,移取樣液取上清液1 mL于15 mL帶塞試管中,加45%硫酸溶液6 mL,混勻,加0.3%糠醛溶液1 mL,混勻,置65 ℃恒溫水浴30 min,冷卻至室溫后,于620 nm處測吸光度,對比膽酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線換算吸附膽酸鈉量[21]。
式(7)
式中:m0為樣品干質(zhì)量,g;m1為吸附前膽酸鈉的量,mg;m2為吸附后上清液中膽酸鈉的量,mg。
1.2.9 吸附葡萄糖能力的測定 準(zhǔn)確稱取0.5 g膳食纖維樣品于錐形瓶中,加入200 mmol/L葡萄糖溶液50 mL,充分混合,調(diào)節(jié)pH至7.0,于37 ℃水浴6 h,4000 r/min離心20 min,于540 nm測定上清液的吸光值,計(jì)算葡萄糖吸附量[22]。
式(8)
式中:m0為樣品干質(zhì)量,g;m1為吸附前葡萄糖的量,mg;m2為吸附后葡萄糖的量,mg。
所有實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行3次重復(fù)測定,測定結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行差異分析,以P<0.05判斷為差異顯著,Microsoft Excel 2010軟件作圖。
膳食纖維持水力是指在外力作用下水分子束縛在水合纖維里的含量[23]。紅棗果汁果渣(0 d)和果酒果渣(8 d)膳食纖維的持水力分別為6.13和6.76 g/g,且隨發(fā)酵天數(shù)增加,紅棗果渣膳食纖維的持水力逐漸增大(圖1)。紅棗果酒果渣膳食纖維持水力增加,可能是發(fā)酵作用改變了膳食纖維結(jié)構(gòu),使其由緊密排布變得疏松多孔,比表面積增大,促使膳食纖維中更多的親水基團(tuán)暴露出來,使其對水分的束縛力增加[24]。高持水性膳食纖維可使糞便體積增加,排便速度加快,減輕直腸內(nèi)壓力,防止便秘[25]。
圖1 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維持水力的影響Fig.1 Effect of fermentation time on water holding capacity of dietary fiber from jujube pomace注:不同字母表示在P<0.05水平差異顯著。圖2~圖8同。
膳食纖維分子表面含有許多親水性基團(tuán)(如羥基),富含膳食纖維的食物進(jìn)入人體消化道內(nèi),在胃中可吸水膨脹形成高粘度的溶膠或凝膠,易產(chǎn)生飽腹感[21]。紅棗果汁果渣(0 d)膳食纖維的膨脹力為4.71 mL/g,顯著低于果酒果渣(8 d)膳食纖維5.25 mL/g(P<0.05),隨發(fā)酵天數(shù)延長,紅棗果渣膳食纖維的膨脹力逐漸增大(圖2)。果酒果渣膳食纖維膨脹力增加可能是發(fā)酵過程中淀粉、蛋白質(zhì)發(fā)生水解[26],使膳食纖維部分結(jié)構(gòu)發(fā)生斷裂,纖維素、半纖維素等成分中親水基團(tuán)暴露出來,增加了膳食纖維與水的接觸機(jī)會;另外,纖維顆??锥吹臄?shù)量和體積增加,使纖維結(jié)構(gòu)變得較疏松,增強(qiáng)了膳食纖維對水的親和能力[27]。
圖2 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維膨脹力的影響Fig.2 Effect of fermentation time on swelling capacity of dietary fiber from jujube pomace
圖3 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維溶解性的影響Fig.3 Effect of fermentation time on solubility of dietary fiber from jujube pomace
膳食纖維的持油力取決于纖維的表面性質(zhì)、電荷密度、厚度及顆粒的疏水性[19]。圖4結(jié)果顯示,果酒果渣(8 d)膳食纖維的持油力顯著高于果汁果渣(0 d)膳食纖維(P<0.05),隨發(fā)酵天數(shù)延長,膳食纖維持油力逐漸增大,但發(fā)酵4和6 d間無顯著差異(P>0.05)。發(fā)酵8 d果酒果渣膳食纖維的持油力為1.43 g/g,較果汁果渣膳食纖維1.03 g/g增加了1.39倍,可能是發(fā)酵作用使膳食纖維比表面積增大,表面毛細(xì)孔增多,親油基團(tuán)暴露[24],表現(xiàn)為膳食纖維持油力增加。
圖4 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維持油力的影響Fig.4 Effect of fermenting time on oil holding capacity of dietary fiber from jujube pomace
膳食纖維結(jié)構(gòu)中含有呈弱酸性的羧基、羥基等側(cè)鏈基團(tuán),類似陽離子交換樹脂作用,可與陽離子進(jìn)行可逆交換[31]。若體內(nèi)Na+被膳食纖維交換后隨糞便排出體外,可有效預(yù)防高血壓等[32]。果酒果渣(8 d)膳食纖維的陽離子交換能力為0.69 mmol/L(圖5),顯著優(yōu)于果汁果渣(0 d)膳食纖維0.34 mmol/L(P<0.05),是果汁果渣膳食纖維的2.03倍,并隨發(fā)酵天數(shù)延長,膳食纖維陽離子交換能力逐漸增強(qiáng)。膳食纖維陽離子交換能力強(qiáng)弱與其中的糖醛酸含量有關(guān)[33],表明發(fā)酵作用可暴露出膳食纖維中的糖醛酸側(cè)鏈基團(tuán)。
圖5 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維的陽離子交換能力的影響Fig.5 Effect of fermentation time on cation exchange capacity of dietary fiber from jujube pomace
膳食纖維具有吸附或包埋人體內(nèi)膽固醇的能力,可降低血漿膽固醇水平,減少機(jī)體對膽固醇的吸收,排出體內(nèi)吸附的多余的膽固醇[34]。果酒果渣(8 d)膳食纖維吸附膽固醇的能力為27.51 mg/g(圖6),顯著高于果汁果渣(0 d)膳食纖維18.42 mg/g(P<0.05),隨發(fā)酵天數(shù)延長,其吸附膽固醇能力逐漸增強(qiáng)。果酒果渣膳食纖維吸附膽固醇能力較強(qiáng),可能是發(fā)酵使不溶性膳食纖維向可溶性膳食纖維轉(zhuǎn)變,可溶性膳食纖維較不溶性膳食纖維表現(xiàn)為更強(qiáng)的生物學(xué)活性[35],可提高了紅棗果渣膳食纖維吸附膽固醇的能力。
圖6 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維膽固醇吸附量的影響Fig.6 Effect of fermentation time on cholesterol adsorption capacity of dietary fiber from jujube pomace
膳食纖維通過吸附膽酸鹽排出體外,促進(jìn)膽固醇的代謝,減少膽汁酸的重吸收,阻斷膽固醇的腸肝循環(huán),使體內(nèi)膽固醇水平下降[36],因此,了解膳食纖維對膽酸鹽的吸附能力有助于了解其調(diào)節(jié)血脂的能力。圖7結(jié)果顯示,果酒果渣(8 d)膳食纖維吸附膽酸鈉的能力顯著高于果汁果渣(0 d)膳食纖維(P<0.05),隨發(fā)酵時(shí)間延長,吸附膽酸鈉能力逐漸增加,超過6 d后增速趨于平緩。果渣膳食纖維吸附膽酸鈉能力增加可能是由于發(fā)酵過程中膳食纖維多糖被部分利用,使膳食纖維結(jié)構(gòu)變得疏松,比表面積增大[37],吸附膽酸鈉能力增大。發(fā)酵末期,膳食纖維吸附膽酸鈉能力趨于平穩(wěn),可能是膳食纖維經(jīng)發(fā)酵后,結(jié)構(gòu)已經(jīng)變得疏松,比表面積增加達(dá)到了最大。表明發(fā)酵可使紅棗果渣膳食纖維吸附膽酸鈉能力增加。
圖7 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維膽酸鈉吸附量的影響Fig.7 Effect of fermentation time on deoxycholic acid sodium adsorption capacity of dietary fiber from jujube pomace
膳食纖維具有降低餐后血糖水平的生理功效,是因其可以吸附葡萄糖[38]。圖8結(jié)果顯示,紅棗果酒果渣(8 d)膳食纖維對葡萄糖的吸附能力顯著優(yōu)于果汁果渣(0 d)膳食纖維(P<0.05),隨發(fā)酵天數(shù)延長,吸附葡萄糖的能力逐漸增強(qiáng),果汁果渣中膳食纖維吸附葡萄糖的能力為0.18 mg/g,發(fā)酵8 d果酒果渣膳食纖維吸附葡萄糖的能力為0.33 mg/g,較果汁果渣膳食纖維提高了0.15 mg/g,果酒果渣膳食纖維吸附葡萄糖能力強(qiáng)是由于果渣膳食纖維經(jīng)發(fā)酵后,不溶性膳食纖維向可溶性膳食纖維轉(zhuǎn)變,且可溶性膳食纖維在溶液中的黏性較大,當(dāng)可溶性膳食纖維在溶液中的含量增多,溶液的黏性隨之增強(qiáng),表現(xiàn)為對葡萄糖分子的吸附能力增強(qiáng)[39]。表明發(fā)酵后棗渣膳食纖維可提高對葡萄糖的吸附能力。
圖8 發(fā)酵時(shí)間對紅棗果渣膳食纖維葡萄糖吸附量的影響Fig.8 Effect of fermentation time on glucose adsorption capacity of dietary fiber from jujube pomace
紅棗果酒果渣膳食纖維的持水力、膨脹力、溶解性、持油力、陽離子交換能力以及吸附膽固醇、膽酸鈉、葡萄糖能力均明顯優(yōu)于果汁果渣膳食纖維,且隨發(fā)酵天數(shù)延長,果酒果渣膳食纖維的持水力、膨脹力、溶解性、持油力、陽離子交換能力以及吸附膽固醇、膽酸鈉、葡萄糖能力均逐漸增強(qiáng),表明發(fā)酵能提高紅棗果渣膳食纖維的功能特性。若后期進(jìn)一步研究和利用紅棗果渣膳食纖維,開發(fā)功能性膳食纖維保健產(chǎn)品,還需研究紅棗果渣膳食纖維的化學(xué)組成及生理活性的構(gòu)效關(guān)系。