脂餐負荷前后脂代謝的動態(tài)變化及其與動脈硬化的關系

翟珂

作者單位：450052 河南省鄭州市骨科醫(yī)院

動脈硬化發(fā)病因素較多，脂質(zhì)代謝異常為其最重要的危險因素，空腹低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）升高及高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）降低將增加心血管發(fā)病風險。LDLC 是評估動脈硬化的主要指標，HDLC 則是抗動脈硬化的重要脂質(zhì)顆粒，兩者在動脈硬化病變中有一定的預測價值[1]。有研究顯示apoA1、apoB 及其比值與動脈硬化有一定關系，并對心血管危險性的預測價值較常規(guī)脂質(zhì)指標高[2]。apoB 為LDLC 顆粒的主要蛋白，可釋放多種炎性產(chǎn)物，促進動脈硬化進展；apoA1 是HDLC 的主要蛋白質(zhì)成分，有抗血栓形成、內(nèi)皮功能保護及抑制動脈硬化發(fā)生和發(fā)展等作用[3]；apoB/apoA1 比值可反映致動脈硬化指標和抗動脈硬化指標之間的動態(tài)平衡[4]。雖然目前臨床有關動脈硬化患者血脂指標餐后情況的報道較多，但仍存在諸多爭議，并且有關脂餐負荷前后脂代謝指標的動態(tài)變化和動脈硬化關系的研究不多，考慮到動物脂肪代謝指標檢測結果以及動脈硬化評估結果更為精準，我們對納入的12 只家兔展開實驗研究，旨在探討脂餐負荷前后脂代謝的動態(tài)變化及其與動脈硬化的關系。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及主要試劑、儀器以12 只健康雄性家兔（由我省醫(yī)學動物實驗中心提供）為研究對象，體重2～3kg，平均（2.58±0.23）kg，月齡5 個月。主要試劑：膽固醇（上海生物工程有限公司，CDO122-50g）、速眠新Ⅱ（獸醫(yī)店購買，070031582），LDLC、HDLC 檢測試劑盒（德賽診斷系統(tǒng)有限公司），apoA1、apoB 檢測試劑盒（浙江伊利康生物技術有限公司），HE 染色劑由我院病理科提供；主要儀器：離心機（TDZ5-WS）、自動生化分析儀（UniCel DxC 800，Beckman Coulter）、超聲診斷儀（意大利Esaoto 公司）、顯微鏡（Olympus BX53 光學顯微鏡照相系統(tǒng)）等。

1.2 研究方法①動物模型建立：12 只健康家兔均單籠喂養(yǎng)，單純高脂飲食（1%膽固醇、8%蛋黃、91%基礎飼料）喂養(yǎng)8 周，分別于初始階段、喂養(yǎng)4 周、8 周給予脂餐負荷，每日喂養(yǎng)飼料100g。②血脂指標測定：分別于初始階段、第4、8 周對家兔進行耳緣靜脈采血，收集空腹和餐后2、4、8h 靜脈血各2ml，全自動生化分析儀測定LDLC、HDLC、apoB、apoA1，并計算apoB/apoA1 比值。③動脈硬化病變評分：參照兔主動脈硬化病變分級記分法，分為1～4 級計分，內(nèi)中膜無增厚而管腔內(nèi)膜面光整為1 分，內(nèi)中膜增厚為2 分，管壁增厚伴管腔內(nèi)膜面不光整或粗糙為3 分，觀察到彌漫分布斑塊回聲為4 分。④病理結果：納入家兔均在8 周后用20%烏拉坦麻醉后，將其頸動脈、胸主動脈、腹主動脈、股動脈及冠狀動脈分離，分離血管行大體檢查后，生理鹽水輕沖洗，10%甲醛固定24h，乙醇脫水石蠟包埋后，切片常規(guī)行HE 染色，記錄血管壁結構變化以確定動脈粥樣硬化情況。

1.3 統(tǒng)計學方法采用SPSS 19.0 統(tǒng)計學軟件進行分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，計量資料用±s表示，組間對比分別行χ2、t檢驗，組內(nèi)不同時間點LDLC、HDLC、apoB、apoA1 及apoB/apoA1 水平比較采用重復測量數(shù)據(jù)方差分析（F檢驗），服從正態(tài)分布各變量間相關性比較采用Pearson 直線相關性分析，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 動脈硬化病變評分情況初始階段、喂養(yǎng)第4周、第8 周，家兔動脈硬化病變評分分別為（1.02± 0.10）分、（1.78±0.25）分、（2.79±0.26）分，經(jīng) 重復測量方差分析提示，隨著脂餐負荷時間延長，實驗模型家兔動脈硬化病變評分隨之明顯升高（F=12.356，P<0.05）。

2.2 血清LDLC、HDLC 動態(tài)變化隨著高脂飲食時間延長，血清LDLC 水平呈升高趨勢，8 周內(nèi)脂餐負荷前最高，餐后降低；8 周內(nèi)脂餐負荷后HDLC水平較負荷前降低，隨著動脈硬化進展，各時間段HDLC 水平均呈降低趨勢，見表1。

2.3 血清apoB、apoA1 動態(tài)變化隨著高脂飲食時間延長，脂餐負荷后apoB 水平均呈上升趨勢，4 周內(nèi)脂餐負荷后8h apoB 水平最低；8 周時apoA1 水平有下降趨勢，8 周時脂餐負荷后4h apoA1 水平最高，見表2。

表1 12 只家兔血清LDLC、HDLC 動態(tài)變化（±s，mmol/L）

表1 12 只家兔血清LDLC、HDLC 動態(tài)變化（±s，mmol/L）

時間 LDLC 動態(tài)變化 HDLC 動態(tài)變化空腹 餐后2h 餐后4h 餐后8h 空腹 餐后2h 餐后4h 餐后8h初始階段 0.60±0.49 0.43±0.55 0.42±0.60 0.52±0.39 0.50±0.07 0.45±0.12 0.44±0.09 0.42±0.09第4 周 5.62±2.02 3.95±1.98 4.18±2.15 3.44±2.82 1.16±0.25 1.04±0.26 1.02±0.25 1.00±0.22第8 周 12.56±0.91 11.17±1.12 11.09±1.22 10.26±1.80 1.30±0.27 1.25±0.24 1.23±0.22 1.25±0.25

表2 12 只家兔血清apoB、apoA1 動態(tài)變化（±s，g/L）

表2 12 只家兔血清apoB、apoA1 動態(tài)變化（±s，g/L）

時間 apoB 動態(tài)變化 apoA1 動態(tài)變化空腹 餐后2h 餐后4h 餐后8h 空腹 餐后2h 餐后4h 餐后8h初始階段 0.02±0.04 0.04±0.03 0.04±0.03 0.01±0.01 0.40±0.03 0.39±0.02 0.39±0.03 0.38±0.02第4 周 0.17±0.08 0.16±0.10 0.16±0.09 0.12±0.11 0.41±0.04 0.41±0.03 0.42±0.04 0.41±0.04第8 周 0.29±0.11 0.26±0.12 0.25±0.11 0.25±0.12 0.33±0.07 0.32±0.06 0.35±0.05 0.34±0.04

2.4 血清apoB/apoA1 比值變化隨著高脂飲食時間延長，apoB/apoA1 比值在第8 周時最高，第4 周后脂餐負荷后呈下降趨勢，見表3。

表3 12 只家兔血清apoB/apoA1 比值動態(tài)變化（±s）

表3 12 只家兔血清apoB/apoA1 比值動態(tài)變化（±s）

時間 空腹 餐后2h 餐后4h 餐后8h初始階段 0.06±0.09 0.09±0.07 0.10±0.07 0.03±0.02第4 周 0.45±0.22 0.40±0.25 0.39±0.19 0.30±0.24第8 周 1.22±1.27 0.94±0.92 0.61±0.52 0.62±0.67

2.5 血脂指標與動脈硬化進展程度相關性分析Pearson 相關性分析結果顯示，脂餐負荷前后LDLC、apoB 水平及apoB/apoA1 比值與動脈硬化病變評分呈正相關（r=0.327、0.405、0.398，P<0.01），HDLC、apoA1 與動脈硬化病變評分呈負相關（r=-0.335、-0.392，P<0.01）。

3 討論

研究表明LDLC 升高、HDLC 降低是顱內(nèi)外動脈硬化的重要危險因素[5，6]；隨著臨床對動脈硬化研究的不斷深入，apoB、apoA1 及兩者比值在動脈硬化形成中的作用成為研究熱點。早期Tang 等[7]研究提示血清apoB、apoA1 等可有效預測冠狀動脈疾病進展情況。由鳳秋等[8]研究指出對動脈硬化性腦梗死患者進行血脂調(diào)節(jié)時，除監(jiān)測TC、TG、LDLC、HDLC水平外，還應同時觀察apoB、apoA1 及apoB/apoA1比值變化。李煥敏等[9]的研究表明，在急性缺血性卒中患者中，apoB 水平和apoB/apoA1 比值增高是顱內(nèi)動脈粥樣硬化性狹窄的獨立危險因素，apoA1水平增高為顱內(nèi)動脈粥樣硬化性狹窄的獨立保護因素。國內(nèi)外有關apoB、apoA1 在心血管疾病發(fā)生中作用的研究雖然較多，而對于脂餐負荷前后脂代謝指標的動態(tài)變化及其與動脈硬化的關系仍存在諸多爭議。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，隨著高脂飲食時間延長，8 周內(nèi)脂餐負荷前LDLC 最高，餐后降低，8 周內(nèi)脂餐負荷后HDLC 水平較負荷前降低，隨著動脈硬化進展，各時間段HDLC 水平均呈降低趨勢。隨著高脂飲食時間延長，空腹及脂餐負荷后apoB 水平呈上升趨勢，4 周內(nèi)脂餐負荷后8h apoB 水平最低，8 周時apoA1 水平有下降趨勢，8 周時脂餐負荷后4h apoA1 水平最高。隨著高脂飲食時間延長，apoB/apoA1 比值在第8 周時最高，第4 周后脂餐負荷前后呈下降趨勢，表明隨著動脈硬化進展，LDLC 水平明顯升高，機體抗動脈硬化能力明顯增強，脂餐負荷后apoB 清除增快。相關性分析結果提示，脂餐負荷前后LDLC、apoB 水平及apoB/apoA1 比值與動脈硬化病變評分呈正相關，HDLC、apoA1 與動脈硬化病變評分呈負相關，初步證實了LDLC、HDLC、apoB、apoA1 及apoB/apoA1 比值的動態(tài)變化在評估動脈硬化程度中有明確的臨床參考價值。

apoA1 是HDLC 的主要載脂蛋白，可作為HDLC的結構蛋白并維持其結構穩(wěn)定性和完整性[10]，還可作為一種輔助因子，參與激活卵巢脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶活性，使其游離膽固醇酯化，參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運過程，防止動脈粥樣硬化性心血管疾病，是延緩動脈硬化的一種保護因子，apoA1 及HDLC表達水平與動脈硬化程度呈負相關[11]。apoB 受體結合區(qū)可與靶細胞LDLC 受體結合，介導血漿中LDLC 受體決定性蛋白質(zhì)，參與動脈硬化生理病理過程[12]，apoB、LDLC 水平與動脈硬化呈正相關，apoB/apoA1 比值變化與動脈硬化也呈明顯正相關。本研究結果表明，HDLC 在脂餐前后變化幅度較小，因而空腹狀態(tài)下LDLC、HDLC 水平更能預測動脈硬化程度，而餐后apoA1、apoB 和apoB/apoA1 比值動態(tài)變化更能反映動脈硬化的進展情況[13]。

基于以上分析，脂餐負荷前后apoA1、apoB 及apoB/apoA1 比值動態(tài)變化與動脈硬化程度有明顯相關性，臨床工作中應嚴密監(jiān)測患者血清脂質(zhì)水平變化，對評估疾病進展和指導合理防治措施有重要意義。