心肌細(xì)胞增殖能力研究進(jìn)展

劉羿煬

(西安交通大學(xué)附屬中學(xué) 陜西西安 710000)

一、背景

心臟是哺乳動物最重要的器官之一，心肌細(xì)胞為心臟功能的正常進(jìn)行提供條件。心臟由左心房、左心室、右心房、右心室四個腔室組成。心臟內(nèi)部包含有多種細(xì)胞，例如，心肌細(xì)胞(幫助心臟有規(guī)律地跳動，將血液運(yùn)輸?shù)缴眢w各部)；平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞(血管的組成成分)；神經(jīng)元、成纖維細(xì)胞(心肌細(xì)胞間的填充成分)。其中，心肌細(xì)胞位于心臟內(nèi)部及表面，呈短桿狀，含有由于未分裂完全而形成的兩個細(xì)胞核，增殖能力弱，承擔(dān)著心臟收縮與舒張的功能。心臟是運(yùn)輸血液、營養(yǎng)物質(zhì)、代謝廢物的“泵”，將血液連帶氧氣運(yùn)輸?shù)缴眢w各部分，供給全身各處的細(xì)胞完成正常的代謝過程[1-2]。

隨著人們生活水平的提高，現(xiàn)代人群中肥胖者大大增加。肥胖者由于脂肪顆粒在血管內(nèi)的堆積而形成堵塞，導(dǎo)致心肌細(xì)胞得到的氧氣量減少，部分死亡，形成缺口。心臟進(jìn)行應(yīng)激反應(yīng)，部分心肌細(xì)胞膨脹以阻塞缺口，一部分成纖維細(xì)胞分泌膠原以彌補(bǔ)創(chuàng)口，創(chuàng)口處形成的瘢痕無法收縮跳動，導(dǎo)致心臟血液運(yùn)輸速率下降，進(jìn)而導(dǎo)致全身性疾病。

如何提高心肌細(xì)胞增殖能力，成為了現(xiàn)如今的一個生物學(xué)問題，也成為了心臟疾病治療過程中的關(guān)鍵問題。本研究通過閱讀文獻(xiàn)資料的方式，了解通過某些藥物可以促進(jìn)心肌細(xì)胞完成完整的有絲分裂過程，可以為心臟疾病的治療進(jìn)一步提供意見。

二、不同生長發(fā)育時期，不同物種心肌細(xì)胞增殖能力變化情況

哺乳動物發(fā)育初期實(shí)驗(yàn)：取第一天出生的四只小鼠分別做心臟創(chuàng)口處理，并在第1，2，7，21天分別對四只小鼠的心臟進(jìn)行切片處理，用HE和馬松染色，發(fā)現(xiàn)膠原剩余量少，心肌細(xì)胞恢復(fù)能力強(qiáng)。取第7天出生的四只小鼠做同樣處理，觀察到，隨著出生天數(shù)的增加，膠原剩余量增加，心肌組織恢復(fù)不完全。以上實(shí)驗(yàn)證明了隨著出生天數(shù)的增加，心肌細(xì)胞的增殖能力下降(如圖1)[3]。但是在小鼠青春期(即P15)時，用酶分離心肌細(xì)胞并計數(shù)，同時檢測心肌細(xì)胞增殖的相關(guān)基因發(fā)現(xiàn)，心肌細(xì)胞的增殖能力出現(xiàn)了瞬時恢復(fù)[4]。

圖1 小鼠心肌細(xì)胞增殖能力變化情況

通過對人體的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，20～30歲的人類的平滑肌細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞有較大程度的增長，類似小鼠的青春期的現(xiàn)象。心肌細(xì)胞在年幼時有一定的更新，但是心肌細(xì)胞的數(shù)目在人的一生中基本不會改變。在初期心肌細(xì)胞的死亡與產(chǎn)生處于動態(tài)平衡，但人類心肌細(xì)胞的增殖能力整體上較弱[5]。而對于與人類親緣關(guān)系較近的豬而言，做同樣的心臟創(chuàng)口處理后，發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞的恢復(fù)只出現(xiàn)在第一天，這說明豬心肌細(xì)胞的增殖能力較弱[6]。

而對于非哺乳動物的蠑螈和斑馬魚而言，對成年個體做同樣心臟創(chuàng)口處理并染色后發(fā)現(xiàn)，心肌細(xì)胞的增殖能力較為完全，這說明蠑螈及斑馬魚心肌細(xì)胞的增殖能力較強(qiáng)。通過以上哺乳動物及非哺乳動物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果對比，我們需要研究蠑螈等非哺乳動物，發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞增殖能力強(qiáng)的原因，并實(shí)現(xiàn)對人類心臟疾病的治療。

三、心肌細(xì)胞的產(chǎn)生方式

新細(xì)胞可以由干細(xì)胞分化和原細(xì)胞分裂兩種途徑產(chǎn)生。但心臟中無干細(xì)胞，所以新的心肌細(xì)胞無法通過分化的方式產(chǎn)生。通過觀察斑馬魚及小鼠心臟創(chuàng)口實(shí)驗(yàn)可發(fā)現(xiàn)：心臟在受損后可以刺激原有的心肌細(xì)胞通過退分化的方式將肌節(jié)解聚，該過程有助于心肌細(xì)胞分裂過程的完全(如圖2)[3，7]。以上結(jié)論說明，新產(chǎn)生的心肌細(xì)胞可以由原來已經(jīng)存在的細(xì)胞通過退分化的方式增殖產(chǎn)生。那么，在疾病治療時，我們是否可以尋找能否促進(jìn)心肌細(xì)胞退分化的藥物進(jìn)行處理，從而刺激不能分裂的心肌細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期呢？

圖2 心肌細(xì)胞可由原心肌細(xì)胞退分化產(chǎn)生

四、影響心肌細(xì)胞增殖能力的因素

我們可以發(fā)現(xiàn)斑馬魚、老鼠及蠑螈個體在出生時，即氧氣濃度較低的情況下心肌細(xì)胞的增殖能力較強(qiáng)，而在氧氣濃度較高的情況下，心肌細(xì)胞的增殖能力較弱。因此，設(shè)計以下實(shí)驗(yàn)證明氧氣是否與心肌細(xì)胞的增殖能力有關(guān)。取小鼠分別置于高氧、低氧和普通環(huán)境下，發(fā)現(xiàn)置于低氧情況的小鼠心臟質(zhì)量占比增多，用WGA染色的方法發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞體積減小，因此說明心肌細(xì)胞數(shù)目增多，心肌細(xì)胞增殖能力變強(qiáng)，而置于高氧條件下的小鼠大致不變。向剛出生的小鼠體內(nèi)注射可產(chǎn)生活性氧的藥物，發(fā)現(xiàn)在該情況下心臟質(zhì)量占比大致不變，而細(xì)胞體積變大，因此說明細(xì)胞的數(shù)目減小，心肌細(xì)胞的增殖能力變?nèi)?，而在注射可降解活性氧的藥物的成年小鼠個體上發(fā)現(xiàn)心臟質(zhì)量占比大致不變，而細(xì)胞體積減小。因此說明細(xì)胞數(shù)目增加，心肌細(xì)胞的增殖能力變強(qiáng)(如圖3)[8]。

圖3 氧氣濃度影響心肌細(xì)胞增殖能力

微小RNA是由15～22個堿基組成，并且無法轉(zhuǎn)錄出蛋白質(zhì)，但可以調(diào)控細(xì)胞的代謝及增殖過程。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著出生天數(shù)的增多，miR-128的表達(dá)能力變強(qiáng)，因此設(shè)計以下實(shí)驗(yàn)證明miR-128的表達(dá)是否會影響心肌細(xì)胞的增殖。首先使幼鼠體內(nèi)的miR-128基因過表達(dá)，發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞的增殖能力變?nèi)?。而取一敲減miR-128基因的成年鼠，觀察到其心臟體積大致不變，心肌細(xì)胞體積減小，說明心肌細(xì)胞的數(shù)目增多，心肌細(xì)胞的增殖能力變強(qiáng)，上述實(shí)驗(yàn)證明了miR-128基因的表達(dá)會抑制心肌細(xì)胞的增殖(如圖4)[9]。

圖4 miR-128影響心肌細(xì)胞增殖能力

五、討論

隨著人們肥胖率的不斷提升，心臟疾病治療的研究刻不容緩。通過哺乳動物和非哺乳動物的對比可以看出，首先，我們需研究非哺乳動物發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞增殖能力強(qiáng)的原因，并實(shí)踐于人類心臟疾病的治療。其次，我們可以通過藥物刺激的方法使原有的心肌細(xì)胞通過退分化的方式將肌節(jié)解聚，使心肌細(xì)胞分裂過程完全。最后，我們可以通過注射可降解活性氧的藥物的方式使心肌細(xì)胞處于低氧環(huán)境，或通過敲減miR-128基因的方式使心肌細(xì)胞的增殖能力變強(qiáng)。以上方法是否在心臟疾病治療過程中可行，還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，本研究將對心臟疾病的治療提供些許借鑒意見。