GDM患者腸道微生物分布特征及與妊娠結(jié)局關(guān)系

張鋒英 邵秀蘭 吳春峰 徐鳳英

上海市金山區(qū)亭林醫(yī)院(201505)

腸道菌群一般分布在胃、十二指腸、空腸、回腸以及結(jié)腸等部位，在生物機體正常生理功能中具有重要作用，尤其是在代謝性疾病人群中的調(diào)控作用也逐漸成為醫(yī)務(wù)人員關(guān)注重點[1-3]。妊娠期糖尿病(GDM)對新生兒健康、成長可造成嚴(yán)重的影響[4]。GDM發(fā)病機制復(fù)雜，普遍認(rèn)為與妊娠期膳食結(jié)構(gòu)不合理、能量過剩有關(guān)，傳統(tǒng)治療多以飲食控制、適度運動為主，雖然能控制產(chǎn)婦體重但血糖控制效果不佳，影響妊娠結(jié)局[5-7]。既往對娠期糖尿病患者腸道微生物的研究不多[8]。故本次研究分析GDM患者腸道微生物分布特征，探究腸道微生物對妊娠結(jié)局以及新生兒的可能影響。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月—2019年1月本院婦產(chǎn)科產(chǎn)前檢查孕婦作為研究對象，根據(jù)孕婦是否存在GDM分組行前瞻性研究分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：①GDM患者符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；②單胎，初次妊娠；②年齡22～32歲；④孕周23～32周；⑤妊娠期間未采用其他干擾治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕前存在糖耐量異常病史；②合并嚴(yán)重心、肺等器官疾病，合并嚴(yán)重感染性疾病以及血液系統(tǒng)疾病，合并嚴(yán)重腸道疾??；③有腸道手術(shù)史；④長期服用抗生素、激素或使用過益生菌相關(guān)制劑史。孕婦或孕婦家屬知情并簽署知情同意書；本研究提交本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核并通過。

1.2 治療方法

GDM組采用綜合治療，包括飲食控制、胰島素皮下注射以及適量運動，要求孕婦盡量減少糖的攝入量，并根據(jù)孕婦的實際病情注重膳食搭配以及營養(yǎng)均衡，盡可能保證胎兒在孕婦體內(nèi)正常發(fā)育。一旦血糖超出范圍，飲食治療手段不能有效控制血糖時及時注射胰島素。經(jīng)確診后采集孕婦空腹靜脈血，采用免疫比濁法測定超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，酶聯(lián)免疫吸附試驗測定白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10以及腫瘤壞死因子(TNF-α)，采用美國曼庫爾特DxFLEX流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群(CD3、CD4、CD8以及CD4/ CD8)；無菌收集新鮮糞便培養(yǎng)計數(shù)，根據(jù)菌落形態(tài)、格蘭染色鑒定菌群。

1.3 觀察指標(biāo)

①血糖控制標(biāo)準(zhǔn)，空腹血糖<5.6mmol/L，餐后血糖<6.7mmol/L；②妊娠結(jié)局，包括妊娠期高血壓綜合征、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血以及產(chǎn)褥感染，新生兒影響判斷需比較兩組新生兒巨大兒情況、新生兒畸形情況、新生兒低血糖情況以及胎兒窘迫情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 基本情況

共納入160例孕婦，GDM組83例，年齡(28.3±2.4)歲，孕周(27.8±4.9)周，體質(zhì)指數(shù)(25.0±3.2)kg/m2；對照組77例，年齡(28.3±2.4)歲，孕周(27.8±4.9)周，體質(zhì)指數(shù)(24.9±3.2)kg/m2；兩組孕婦上述指標(biāo)比較無差異(P>0.05)。

2.2 兩組炎癥因子表達水平

GDM組hs-CRP、TNF-α及IL-6表達水平均高于對照組，IL-10表達水平低于對照組(均P<0.05)。見表1。

2.3 兩組T細(xì)胞亞群比較

GDM組CD3、CD4及CD4/CD8表達水平低于對照組，CD8表達水平高于對照組(均P<0.05)。見表2。

表1 兩組炎癥因子表達水平比較

表2 兩組T細(xì)胞亞群比較

2.4 兩組腸道菌群培養(yǎng)情況

GDM組腸桿菌以及酵母菌高于對照組，雙歧桿菌、乳桿菌以及擬桿菌低于對照組(均P<0.05)。見表3。

2.5 兩組妊娠結(jié)局

GDM組妊娠期高血壓綜合征發(fā)生、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血及產(chǎn)褥感染比例均高于對照組(P<0.05)。見表4。

表3 兩組腸道菌群培養(yǎng)情況比較(IgN/g濕便，

表4 兩組妊娠結(jié)局比較[例(%)]

2.6 兩組新生兒情況

GDM組新生兒存在3例四肢畸形，2例頭面部畸形，2例循環(huán)系統(tǒng)畸形；對照組新生兒存在1例四肢畸形。GDM組新生兒出現(xiàn)巨大兒、新生兒畸形、新生兒低血糖以及胎兒窘迫比例高于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 兩組新生兒情況比較[例(%)]

2.7 GDM患者腸道微生物分布與妊娠結(jié)局關(guān)系

采用皮爾森距離分析GDM孕婦腸道微生物分布與妊娠結(jié)局的相關(guān)性，孕婦不良妊娠結(jié)局包括妊娠期高血壓綜合、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血以及產(chǎn)褥感染。分析結(jié)果，妊娠期高血壓綜合、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血以及產(chǎn)褥感染均與GDM孕婦腸道微生物分布無相關(guān)性(P>0.05)，見圖1(1936頁)。

3 討論

既往研究表明，妊娠期腸道細(xì)菌數(shù)量、多樣性以及分布狀態(tài)會隨著妊娠時間的延長逐漸出現(xiàn)變化，通常表現(xiàn)為孕婦腸內(nèi)益生菌減少、致病菌增多等現(xiàn)象[10]。既往研究認(rèn)為糖尿病的發(fā)生、發(fā)展與人體體內(nèi)腸道菌群失調(diào)有一定相關(guān)性[11]。腸道菌群平衡在機體代謝中起到至關(guān)重要作用，能成為天然屏障抵御外來病原菌侵襲，同時保護黏膜相關(guān)淋巴組織進而達到改善黏膜免疫屏障功能的作用；其中雙歧桿菌、乳桿菌具有改善人體腸道酸性環(huán)境、抑制腸桿菌、球菌以及酵母菌的生長繁殖等作用，是具有維持腸道菌群穩(wěn)定的一類菌群[12-14]。既往研究表明，糖尿病患者通常伴隨嚴(yán)重的腸道菌群失調(diào)，故考慮腸道菌群失調(diào)與糖尿病存在一定相關(guān)性[15]。

本次研究GDM組孕婦腸桿菌以及酵母菌均高于對照組，雙歧桿菌、乳桿菌以及擬桿菌低于對照組，提示GDM孕婦存在腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象，可能與腸道微生態(tài)環(huán)境遭受破壞有關(guān)；GDM組孕婦妊娠期高血壓綜合征發(fā)生、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血以及產(chǎn)褥感染等不良妊娠結(jié)局高于對照組，分析原因：孕期孕婦血糖控制不佳會造成一系列血管病變進而導(dǎo)致孕婦血壓升高、水腫，導(dǎo)致妊娠期高血壓；且孕婦血管嚴(yán)重病變、血管內(nèi)皮出現(xiàn)增厚、組織出現(xiàn)供血不足、血管痙攣以及妊娠高血壓綜合征，增加了產(chǎn)后大出血風(fēng)險[16]。妊娠期糖尿病對新生兒的生命健康會造成一定不利影響[17]。本次研究GDM組孕婦的新生兒出現(xiàn)巨大兒、新生兒畸形、新生兒低血糖以及胎兒窘迫等發(fā)病率高于對照組，提示GDM對新生兒生命健康有嚴(yán)重影響[18]。 既往研究提示，GDM孕婦腸道微生物分布與妊娠結(jié)局有一定相關(guān)性，GDM孕婦腸道炎性疾病發(fā)生風(fēng)險高于非GDM者，但本次研究結(jié)果，妊娠期高血壓綜合、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血以及產(chǎn)褥感染與GDM孕婦腸道微生物分布未見到相關(guān)性，考慮本次研究樣本量較少且為單中心樣本等局限性，今后將可加大樣本量并選取多中心進行深入研究。

另外，本研究還探討了炎性因子與T淋巴細(xì)胞亞群與妊娠期糖尿病的關(guān)系。妊娠期胰島素抵抗是妊娠期糖尿病的發(fā)病基礎(chǔ)，微炎性因子水平升高是胰島素抵抗的主要表現(xiàn)結(jié)果之一，以IL-6、TNF-α等促炎性因子釋放為中心的慢性炎性反應(yīng)過程為主，但臨床上通常不會出現(xiàn)明顯臨床癥狀。本次研究中GDM組孕婦hs-CRP、TNF-α及IL-6表達水平均高于對照組，IL-10低于對照組，表明以上各炎癥指標(biāo)與GDM的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。CD4和CD8 是T淋巴細(xì)胞亞群主要組成成分，對維持機體的正常免疫功能具有至關(guān)重要的意義。本次研究中GDM組CD3、CD4及CD4/CD8水平均低于對照組，CD8表達水平高于對照組，提示GDM可對機體細(xì)胞免疫功能造成一定程度紊亂。

綜上所述，GDM孕婦存在腸道菌群紊亂現(xiàn)象，表現(xiàn)為腸道益生菌數(shù)量減少，致病菌數(shù)增加，對妊娠結(jié)局以及新生兒均會造成不良影響，但與患者妊娠期高血壓綜合、羊水過多、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血等發(fā)生未見到相關(guān)性；另外患者伴隨有炎癥因子異常以及細(xì)胞免疫功能下降現(xiàn)象，應(yīng)加強孕期保健并采取有效干預(yù)措施。