冠心病血瘀證形成過(guò)程動(dòng)物模型的心電圖變化

王健章，俞赟豐，周曼麗，馮宇，錢(qián)舒樂(lè)，郭志華，簡(jiǎn)維雄

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208)

心電圖(ECG)是利用心電圖機(jī)從體表記錄心臟每一心動(dòng)周期所產(chǎn)生的電活動(dòng)變化圖形的技術(shù)，能夠反應(yīng)出心肌在各個(gè)狀態(tài)的電活動(dòng)，通過(guò)對(duì)心電圖波形的分析可以對(duì)多種心臟疾病做出診斷[1]。心電圖作為診斷冠心病的方法之一，具有方便、簡(jiǎn)潔、無(wú)創(chuàng)等優(yōu)點(diǎn)。本研究通過(guò)對(duì)大鼠進(jìn)行冠心病的造模，根據(jù)其發(fā)展過(guò)程分為血瘀證前期、亞血瘀證期 心血瘀阻證期[2]，為探尋各個(gè)時(shí)期的心肌電活動(dòng)變化，通過(guò)記錄各個(gè)時(shí)期的心電圖，并分析波形，對(duì)冠心病血瘀證各個(gè)時(shí)期的病因病機(jī)進(jìn)一步探索。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

120只清潔級(jí)雄性SD健康大鼠，體質(zhì)量(250±20)g，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，喂養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學(xué)SPF實(shí)驗(yàn)室，在人工調(diào)控的環(huán)境中飼養(yǎng)(溫度：22 ℃～26 ℃,濕度：50%～70%)。自由飲水和進(jìn)食，飼養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn)。每籠3只，保持籠內(nèi)清潔。

1.2 高脂飼料配制

3%膽固醇(南京建成生物工程研究所)；0.5%膽酸鈉(南京建成生物工程研究所)； 0.2%丙基硫氧嘧啶(南通精華制藥股份有限公司)；5%白糖(裕園小區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng))；10%豬油(裕園小區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng))； 81.3%基礎(chǔ)飼料(湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)。

1.3 實(shí)驗(yàn)藥品

維生素D3粉劑1 g：10萬(wàn)IU(湖北楚米生物科技有限公司)；異丙腎上腺素(美國(guó)Sigma公司)；水合氯醛(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；鹽酸曲美他嗪緩釋片(施維雅(天津)制藥有限公司)；養(yǎng)心通脈方(飲片來(lái)自湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院)。

1.4 生理記錄儀

美國(guó)BIOPAC16導(dǎo)聯(lián)生理記錄儀(MP150)。

1.5 給藥方式

高脂飼料喂養(yǎng)7 d后,維生素D3灌胃(50萬(wàn)IU/kg)，14 d后再予以維生素D3灌胃(30萬(wàn)IU/kg)。維生素D3灌胃2個(gè)月后，予以異丙腎上腺素(ISO)5 mg/kg多點(diǎn)皮下注射，連續(xù)1周。

1.6 心電圖的測(cè)量

在使用維生素D3(80萬(wàn)IU/kg)灌胃后1月，通過(guò)對(duì)比正常組和造模大鼠血脂和血流變后，進(jìn)行血瘀證前期的心電圖測(cè)量。在使用維生素D3灌胃后2月，通過(guò)對(duì)比血瘀證前期和造模大鼠血脂和血流變后，進(jìn)行亞血瘀證期的心電圖測(cè)量。在造模大鼠達(dá)到亞血瘀證期后，予以ISO(5 mg/kg)連續(xù)1周皮下注射后，隨機(jī)分為對(duì)照組、中藥組、西藥組。中藥組：養(yǎng)心通脈方按照3.25 g/(kg·d)灌胃；西藥組：曲美他嗪按照5.4 mg/(kg·d)灌胃;平行對(duì)照組：按等量純凈水灌胃。連續(xù)灌胃20 d，灌胃結(jié)束后測(cè)量對(duì)照組、中藥組、西藥組的心電圖。心電圖測(cè)量時(shí)先使用10%水合氯醛溶液充分麻醉再測(cè)量肢體導(dǎo)聯(lián)(Ⅱ?qū)?lián)),在各個(gè)階段的心電圖采集時(shí)，正常大鼠心電圖同時(shí)采取。

2 結(jié)果

2.1 正常組心電圖

圖1及圖2心電圖提示P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，S-T段未見(jiàn)明顯壓低及抬高。

圖1 正常心電圖1

圖2 正常心電圖2

2.2 血瘀證前期

圖3及圖4心電圖與正常心電圖對(duì)比提示心率為竇性心律，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，J點(diǎn)無(wú)明顯抬高及壓低，圖3當(dāng)中S-T段未見(jiàn)明顯壓低及抬高，然圖4與正常組心電圖相比可見(jiàn)S-T段有稍許抬高，但抬高程度≤0.05 mV。

圖3 血瘀證前期心電圖1

圖4 血瘀證前期心電圖2

2.3 亞血瘀證期

圖5及圖6心電圖提示竇性心率，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，J點(diǎn)無(wú)明顯改變，圖5當(dāng)中S-T段抬高，抬高程度≤0.05 mV，圖6與正常心電圖相比可見(jiàn)S-T段有稍許抬高，但抬高程度≤0.1 mV。

圖5 亞血瘀證期心電圖1

圖6 亞血瘀證期心電圖2

2.4 心血瘀阻證期

2.4.1 中藥組

圖7心電圖提示竇性心率，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，與正常組心電圖相比，J點(diǎn)上抬明顯，S-T段明顯抬高，抬高程度>0.1 mV，T波高尖，T波高度超過(guò)QRS波主波高度的1/2。

圖8心電圖提示竇性心率，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，與正常組心電圖相比，J點(diǎn)上抬明顯，S-T段明顯抬高，抬高程度>0.1 mV，T波高尖，T波高度比QRS波主波高度約為1∶1。

圖7 中藥組心電圖1

圖8 中藥組心電圖2

圖9 西藥組心電圖1

2.4.2 西藥組

圖9心電圖提示竇性心率，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，與正常組心電圖相比，J點(diǎn)上抬明顯，S-T段明顯抬高，抬高程度>0.1 mV，T波高尖，T波高度比QRS波主波高度約為1∶1。

圖10心電圖提示竇性心率，P波規(guī)律出現(xiàn)，P-R間期及R-R間期大致相同，QRS波波形規(guī)律，無(wú)寬大畸形，與正常組心電圖相比，J點(diǎn)壓低明顯，S-T段明顯壓低，并伴有雙向倒置，壓低程度>0.1 mV。

圖10 西藥組心電圖2

2.4.3 對(duì)照組

圖11心電圖提示未見(jiàn)明顯P波，R-R間期大致相同，QRS波呈QS型，J點(diǎn)不明顯，S-T段明顯壓低，T波低平，壓低程度>0.1 mV。

圖12心電圖提示竇性心率，P2波提前出現(xiàn)，隨之出現(xiàn)的QRS波呈QS型，T波上抬明顯；且P1-P2、P2-P3、P3-P4 R-R間期不相等，其余QRS波大致正常，J點(diǎn)明顯上抬，S-T段明顯抬高，抬高程度>0.1 mV。

圖11 對(duì)照組心電圖1

圖12 對(duì)照組心電圖2

由圖7～圖12提示在冠心病心血瘀阻證期時(shí)，心電圖的改變存在著多種形式，包括心律失常、QRS波異常、J點(diǎn)的抬高或壓低、S-T段上抬或壓低以及T波的改變，這與人類(lèi)心肌缺血時(shí)相類(lèi)似。

由上述心電圖及表1可知，冠心病血瘀證的發(fā)展是一個(gè)漸進(jìn)的過(guò)程，各個(gè)時(shí)期的心電圖與前一階段相比都存在心肌缺血更加嚴(yán)重的情況，其中在血瘀證前期時(shí)缺血改變不明顯(S-T段≤0.05 mV)；亞血瘀證期時(shí)，可能是存在個(gè)體差異的原因，少許動(dòng)物模型出現(xiàn)S-T段的明顯改變，表明存在心肌缺血；心血瘀阻證期時(shí)，心電圖的改變存在著多種形式，其中83.3%的動(dòng)物模型出現(xiàn)了S-T段的改變，其中對(duì)照組出現(xiàn)S-T段的改變?yōu)?3.3%，由圖13可知，心血瘀阻證期，J點(diǎn)位移明顯，提示心肌缺血明顯；出現(xiàn)心律失常及QRS波異常的情況分別為26.7%和33.3%。

表1 各時(shí)期心電圖改變的頻數(shù)統(tǒng)計(jì) (只)

注：*S-T段改變?yōu)樯咸Щ驂旱汀?.01 mV

圖13 各時(shí)期J點(diǎn)位移(mV)

3 討論

冠心病的發(fā)病機(jī)制根據(jù)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展過(guò)程形成了多種學(xué)說(shuō)，包括脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說(shuō)、內(nèi)皮損傷反應(yīng)學(xué)說(shuō)、血栓形成學(xué)說(shuō)、炎癥學(xué)說(shuō)和遺傳學(xué)說(shuō)等，無(wú)論那種學(xué)說(shuō)，冠心病的發(fā)生都與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化造成的冠脈血管狹窄程度及斑塊的穩(wěn)定最為密切[3-8]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為冠心病是“本虛標(biāo)實(shí)”之證，由于人體自身先天或后天稟賦不足，不能正常的運(yùn)行氣血津液，導(dǎo)致血瘀阻遏心脈，從而發(fā)生胸痹、心痛。

冠心病血瘀證是一個(gè)逐漸加重的過(guò)程，形成前期主要是以血流不暢，正氣虧虛，導(dǎo)致心臟濡養(yǎng)失司，但此時(shí)不一定會(huì)有癥狀表現(xiàn)出來(lái)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，血瘀證前期動(dòng)物模型出現(xiàn)血脂增高，血流變學(xué)指標(biāo)提示黏度提高，未造成冠脈管腔狹窄，對(duì)心肌供血產(chǎn)生不產(chǎn)生明顯影響，因此心電圖未產(chǎn)生明顯變化[9]。

但隨著正氣虧損的程度加深，到達(dá)亞血瘀證期時(shí)血流不暢則可致瘀，瘀阻心脈則出現(xiàn)胸悶、胸痛，在心電圖上的表現(xiàn)主要以S-T段輕度抬高為主，且抬高程度≤0.1 mV，提示心肌存在輕度的缺血；本次實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，亞血瘀證期出現(xiàn)S-T段改變的概率為25%，表明當(dāng)冠狀動(dòng)脈狹窄到一定程度時(shí)就會(huì)影響心肌供血，且有著較高的發(fā)生率。

心血瘀阻證期是日久營(yíng)血瘀滯，痰瘀互結(jié)，沉積血府，最終痹阻心脈。實(shí)驗(yàn)當(dāng)中通過(guò)皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素后造成冠狀動(dòng)脈供血不足引起的心肌缺血[10]，通過(guò)表1可以很明顯的發(fā)現(xiàn)，83.3%的動(dòng)物模型出現(xiàn)了S-T段的改變，且抬高或壓低≥0.1 mV，其中對(duì)照組、中藥組、西藥組出現(xiàn)S-T段的改變?yōu)?3.3%、73.3%、80%，說(shuō)明養(yǎng)心通脈方以及曲美他嗪對(duì)改善心肌缺血有一定的幫助，出現(xiàn)心律失常及QRS波異常的情況分別為26.7%和33.3%，遠(yuǎn)低于出現(xiàn)S-T段改變的百分比，且S-T段改變與其他時(shí)期相比存在明顯的差異性。心肌缺血有可能導(dǎo)致心律失常，但考慮到水合氯醛溶液也可以引起心律失常，尤其是在心肌缺血后，使用水合氯醛溶液導(dǎo)致心肌失代償[11]。且中藥組及西藥組改善心律失常及QRS波異常情況≥50%，但中藥組與西藥組無(wú)明顯差異。同時(shí)圖13提示伴隨著冠心病血瘀證的進(jìn)程，J點(diǎn)位移程度愈加明顯，提示心肌缺血愈加嚴(yán)重[12]。進(jìn)行治療后，J點(diǎn)位移變小，也證實(shí)養(yǎng)心通脈方以及曲美他嗪對(duì)可以改善心肌缺血。

4 結(jié)論

通過(guò)查閱文獻(xiàn)，目前對(duì)大鼠心電圖的解讀無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，影響因素眾多，主要為儀器的種類(lèi)不同和采樣頻率不一致，大多數(shù)都是通過(guò)和正常組的心電圖對(duì)比進(jìn)行解讀。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)冠心病血瘀證各時(shí)期動(dòng)物模型的心電圖進(jìn)行測(cè)量后，認(rèn)為冠心病血瘀證是一個(gè)逐漸發(fā)展的過(guò)程，隨著時(shí)間的推移，心肌供血的程度會(huì)愈加嚴(yán)重，且通過(guò)心電圖當(dāng)中J點(diǎn)及S-T段的改變程度，可為冠心病血瘀證的心血瘀阻提供依據(jù)。