支氣管哮喘患兒誘導(dǎo)痰嗜酸粒細(xì)胞與肺功能及FeNO濃度的關(guān)系

吳守業(yè) 張余轉(zhuǎn)

1海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心兒科,?？?70206;2海口市第三人民醫(yī)院兒科571100

支氣管哮喘(哮喘)是兒科呼吸系統(tǒng)常見的疾病之一,其多是由于接觸反應(yīng)原導(dǎo)致的氣道炎癥反應(yīng)[1]。哮喘的診療工作中了解氣道炎癥反應(yīng)程度是指導(dǎo)用藥、監(jiān)測疾病的重要措施之一。誘導(dǎo)痰嗜酸粒細(xì)胞(eosinophil count,EOS)和呼出氣一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)都是臨床上目前用于評估氣道炎癥程度的無創(chuàng)措施之一;而肺功能檢測則是評估氣道阻塞的重要檢查[2-4]。既往在成年哮喘患者的研究中指出誘導(dǎo)痰EOS和FeNO、肺功能檢查結(jié)果存在一定相關(guān)性,但在兒童哮喘中的研究較為缺乏。因此,本次研究旨在探討兒童哮喘患兒中,誘導(dǎo)痰EOS和Fe NO、肺功能檢查的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 回顧分析了2016年10月至2018年12月在海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心兒科就診的哮喘患兒共113例的病例資料,納入觀察組,其中男61例,女52例,年齡(9.87±3.21)歲,年齡范圍為4～14歲。本研究符合 《赫爾辛基宣言》的原則。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)患兒符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組發(fā)布的 《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南(2016年版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];(2)患兒處于急性發(fā)作期。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并有嚴(yán)重心臟或其他臟器疾病;(2)近4周內(nèi)有上呼吸道感染史;(3)合并有肺結(jié)核、支氣管肺發(fā)育不良等嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)疾病;(4)有發(fā)熱等感染癥狀;(5)無法配合進(jìn)行肺功能及Fe NO濃度等檢測者。另選取在海南省婦女兒童醫(yī)學(xué)中心體檢中心體檢的健康兒童共50例納入對照組,其中男27例,女23例,年齡(10.02±3.29)歲,年齡范圍為5～14歲。2組受試者的一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。見表1。

表1 2組受試者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 肺功能檢測 采用日本福田ST75肺功能檢測儀對受試者進(jìn)行肺功能測定,每人重復(fù)3次,選擇3次中的最佳值,記錄第1秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second,FEV1)及第1秒用力呼氣容積占預(yù)計值百分比(forced expiratory volume in one second as a percentage of expected value,FEV1%pred)。

1.2.2 誘導(dǎo)痰檢測 若誘導(dǎo)前受試者測定的FEV1%pred＜80%,則予以400μg沙丁胺醇吸入,10 min后再行誘導(dǎo)檢測。清水漱口后,超聲霧化吸入3%氯化鈉溶液15 min進(jìn)行痰誘導(dǎo)。用力咳出痰至培養(yǎng)皿;若痰量不足或無痰咳出,可逐步改用4%、5%的氯化鈉溶液霧化7 min。將誘導(dǎo)痰中的痰栓取3～5 ml稱重后加入4倍體積的0.1%二硫蘇糖醇溶液,渦旋震蕩1 min后,置于37℃水浴箱內(nèi)孵育10 min至標(biāo)本液化。采用300目尼龍濾網(wǎng)過濾標(biāo)本,濾液以3 000 r/min的速度離心10 min,離心半徑10 cm,將細(xì)胞沉淀制成細(xì)胞涂片,置于55℃烤箱內(nèi)烤干,10%甲醛固定。將細(xì)胞涂片進(jìn)行瑞氏姬姆薩染色15～20 min,在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞分類計數(shù),計算400個非鱗狀上皮細(xì)胞中EOS的數(shù)量,再計算EOS百分比。

1.2.3 FeNO測定 檢測前4 h內(nèi)禁止劇烈運(yùn)動,并禁止進(jìn)食含氮量較高的食物及飲料。采用瑞典尼爾斯公司的Fe NO測定系統(tǒng)檢測Fe NO。囑受試者先排空肺內(nèi)氣體,用嘴含住過濾器,深吸氣,平穩(wěn)呼氣持續(xù)10 s,記錄檢測結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo) 比較2組受試者誘導(dǎo)痰EOS、FeNO以及FEV1%pred;分析哮喘患兒中誘導(dǎo)痰EOS水平與Fe NO、肺功能的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采取SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析。計量資料經(jīng)正態(tài)分布檢驗后采用的形式表示,組間采用獨(dú)立樣本t檢驗進(jìn)行比較;計數(shù)資料采用頻數(shù)(率)的形式表示,組間采用χ2檢驗進(jìn)行比較。相關(guān)性比較采用Pearson相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組受試者誘導(dǎo)痰EOS、FeNO及肺功能比較 觀察組患兒誘導(dǎo)痰EOS和FeNO水平顯著高于對照組(t=11.921、17.081,P值均＜0.05),而其FEV1%pred較對照組差,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=18.673,P＜0.05)。見表2。

表2 2組受試者誘導(dǎo)痰EOS、FeNO及肺功能比較()

表2 2組受試者誘導(dǎo)痰EOS、FeNO及肺功能比較()

注:EOS為嗜酸粒細(xì)胞;FeNO為呼出氣一氧化氮;FEV 1%pred為第1秒用力呼氣容積占預(yù)計值百分比

組別 例數(shù) 誘導(dǎo)痰EOS(%)FeNO(ppb)FEV1%pred(%)觀察組 113 13.48±7.58 54.85±16.42 56.49±10.16對照組 50 0.67±0.42 13.47±7.22 92.18±13.42 t值 11.921 17.081 18.673 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 誘導(dǎo)痰EOS和FeNO的相關(guān)性 針對觀察組患兒誘導(dǎo)痰EOS和FeNO數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)FeNO與痰EOS水平呈正相關(guān)(r=0.265,P=0.005)。見圖1。

圖1 支氣管哮喘患兒急性發(fā)作期誘導(dǎo)痰EOS和FeNO的相關(guān)性

2.3 誘導(dǎo)痰EOS與肺功能的相關(guān)性 針對觀察組患兒誘導(dǎo)痰EOS和FEV1%pred的數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)肺功能FEV1%pred與痰EOS水平無明顯相關(guān)性(r=0.158,P=0.093),見圖2。

圖2 支氣管哮喘患兒急性發(fā)作期誘導(dǎo)痰EOS和FEV 1%pred的相關(guān)性

3 討論

哮喘是一種慢性的呼吸道變態(tài)反應(yīng)癥所致的氣道高反應(yīng),其在兒童中的發(fā)病率較高。部分患兒可能是上呼吸道感染后誘發(fā),但大部分患兒是由于吸入過敏原發(fā)病[5]。檢測呼吸道炎癥情況是臨床上哮喘診療中的一大難題,支氣管肺泡灌洗以及支氣管內(nèi)膜活檢能夠較為準(zhǔn)確地評估呼吸道的炎癥情況,但上述兩項檢查均為有創(chuàng)檢查,對于部分患者,特別是兒童患者,耐受性和配合度較差,很難完成檢查[6-7]。因此,尋找無創(chuàng)性的檢查方式評估氣道炎癥情況,是非常重要的。

誘導(dǎo)痰EOS是目前臨床上應(yīng)用較多的一項臨床檢查。氣道炎癥反應(yīng)多由EOS參與,因此檢測氣道分泌物中EOS的濃度,能夠在一定程度上幫助評估氣道炎癥反應(yīng)[8]。目前對于誘導(dǎo)痰EOS的研究多集中于成人哮喘,這可能是由于兒童患者配合度較差,標(biāo)本獲取不易有關(guān)。金芬華等[9]、古麗班努等[10]的研究均發(fā)現(xiàn),成人哮喘患者的誘導(dǎo)痰EOS水平明顯升高。張志海等[11]的研究則進(jìn)一步指出誘導(dǎo)痰EOS與哮喘的急性發(fā)作有密切關(guān)系。我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),兒童哮喘患者的誘導(dǎo)痰EOS水平也有明顯上升,這與上述[9-11]的研究結(jié)果相似。

FeNO是由呼吸道上皮細(xì)胞及炎癥細(xì)胞等產(chǎn)生的一種分子物質(zhì),其能夠在患者呼出的氣體中檢測,被認(rèn)為是一種無創(chuàng)地評估氣道炎癥程度的標(biāo)志物之一,也是指導(dǎo)哮喘治療方案調(diào)整以及檢測患者依從性的重要指標(biāo)[12-13]。丁靜等[14]的研究結(jié)果顯示,不同病情階段的哮喘患兒其FeNO水平有明顯差距,急性發(fā)作期FeNO最高,緩解期較低,提示FeNO是評估氣道當(dāng)前炎癥程度的可靠指標(biāo)。本次研究僅將急性發(fā)作期的患兒納為研究對象,結(jié)果顯示,觀察組患兒的FeNO水平顯著高于對照組,與既往的研究結(jié)果相似[15]。哮喘患者由于氣道高反應(yīng)導(dǎo)致肺功能損傷。我們的研究和既往的研究結(jié)果均提示哮喘患者的FEV1%pred水平明顯降低。

既往在成年哮喘患者中的研究指出患者誘導(dǎo)痰EOS水平與Fe NO呈正相關(guān)[16]。我們的研究證實(shí)在兒童患者中這一現(xiàn)象仍然存在,但相關(guān)性系數(shù)略低,這可能是由于不同研究之間樣本量的不同有關(guān),也可能與兒童自身免疫系統(tǒng)的相對不穩(wěn)定性有一定的關(guān)系。吳淑紅等[16]的研究結(jié)果顯示除了誘導(dǎo)痰EOS,哮喘外周血EOS水平與FeNO呈正相關(guān)。臨床上,外周血EOS的檢測樣本更容易獲得,且更利于隨訪監(jiān)控。但我們的研究結(jié)果提示,哮喘患兒誘導(dǎo)痰EOS水平與肺功能的相關(guān)性不大,這可能與研究樣本較少有關(guān)。此外,肺功能檢測更能反映氣道阻塞的情況,而非炎癥水平,提示在哮喘患兒中氣道阻塞程度與炎癥程度并不直接相關(guān),這在既往研究EOS與肺功能的相關(guān)性研究中也得到證實(shí)。

綜上所述,哮喘患兒誘導(dǎo)痰EOS水平與FeNO呈正相關(guān),但與肺功能無明顯相關(guān)性。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突