棉花大麗輪枝菌培養(yǎng)性狀對(duì)比與致病力分化研究

張夢(mèng)恬

摘要：棉花大麗輪枝菌在PDA平板中能夠培養(yǎng)出菌絲型、菌核型、中間型3種性狀。其中，菌核型是棉花大麗輪枝菌的主要培養(yǎng)性狀。用PDA平板培養(yǎng)北疆棉區(qū)不同致病類型的棉花大麗輪枝菌，發(fā)現(xiàn)落葉型大麗輪枝菌中VH-2型較多，非落葉型大麗輪枝菌中VH-1型較多。用不同碳氮比的查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)2種致病棉花大麗輪枝菌，發(fā)現(xiàn)落葉型棉花大麗輪枝菌V592的菌核隨碳氮比增加而減少，低碳氮比的查氏培養(yǎng)基有利于產(chǎn)生更多孢子、菌絲。此外，棉花大麗輪枝菌的致病力與培養(yǎng)性狀、來源地?zé)o關(guān)，與致病類型、碳氮比有關(guān)。

關(guān)鍵詞：棉花;大麗輪枝菌;培養(yǎng)性狀;致病力

中圖分類號(hào)：S-3? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.19754/j.nyyjs.20200229019

前言

大麗輪枝菌能夠?qū)е旅藁ɑ忌宵S萎病，破壞我國(guó)棉花的生產(chǎn)，造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。因此，對(duì)比研究棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀，以及研究棉花大麗輪枝菌的致病力分化，對(duì)防治棉花的黃萎病，提高我國(guó)棉花產(chǎn)量，具有現(xiàn)實(shí)意義。

1對(duì)比研究棉花大麗輪枝菌培養(yǎng)性狀

1.1PDA平板培養(yǎng)出的棉花大麗輪枝菌性狀對(duì)比

1.1.1菌絲型棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀

在PDA平板上為期2周的培養(yǎng)中，有一類棉花大麗輪枝菌的氣生菌絲發(fā)達(dá)，菌落呈黃色或者白色，在培養(yǎng)期間（2周內(nèi)）始終都不產(chǎn)生黑色微菌核。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌絲型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VS型棉花大麗輪枝菌[1]。有的菌絲型菌落表面呈膜狀，有輻射狀條紋。

1.1.2菌核型棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀

在PDA平板為期2周的培養(yǎng)中，有一類棉花大麗輪枝菌的菌絲不明顯，而產(chǎn)生大量微菌核，布滿菌落基質(zhì)，以至于菌落的正反面中至少有一面完全呈黑色。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌核型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VH型棉花大麗輪枝菌。菌核型的棉花大麗輪枝菌在PDA平板培養(yǎng)中，又可根據(jù)其培養(yǎng)性狀來分為3種。其中，黑色菌落外被一圈較寬的白色菌絲圍繞的、呈同心圓狀的菌落，叫做VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落，這種菌落的表面有少量的絨毛狀氣生菌絲;黑色菌落外只被一圈很細(xì)的白色菌絲圍繞，也呈同心圓狀的菌落，叫做VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落，這種菌落的表面有稀疏的氣生菌絲，氣生菌絲的分布呈同心輪紋狀或者均勻狀;黑色菌落表面有明顯氣生菌絲，并且氣生菌絲按照同心輪紋狀排列的菌落，叫做VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。

生長(zhǎng)速度方面，在同樣時(shí)間的PDA平板培養(yǎng)中，VH-1型棉花大麗輪枝菌中的KND-2菌株的菌落生長(zhǎng)最快，長(zhǎng)出了直徑最大的菌落;VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落中的SND-6菌株的菌落生長(zhǎng)最慢，長(zhǎng)出了直徑最小的菌落。菌落培養(yǎng)性狀相同的菌株，其菌落生長(zhǎng)速度亦可存在較大的差異。由此可見，北疆棉花中的大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀分化明顯[2]。

無論在北疆棉區(qū)還是江蘇省，棉花的黃萎病病菌中，菌核型棉花大麗輪枝菌是主要的培養(yǎng)性狀。

1.1.3中間型棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀

在PDA平板上為期2周的培養(yǎng)中，有一類棉花大麗輪枝菌的菌絲發(fā)達(dá)，菌落呈白色，但也會(huì)在菌落中間產(chǎn)生少量的微菌核。這一類棉花大麗輪枝菌，就是菌絲型的棉花大麗輪枝菌，也可以叫做VM型棉花大麗輪枝菌。

1.1.4PDA平板中落葉型棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀

落葉型棉花大麗輪枝菌是棉花大麗輪枝菌中一種致病性較強(qiáng)的類型。經(jīng)PDA平板為期2周的培養(yǎng)可以發(fā)現(xiàn)，來自北疆棉區(qū)的13種落葉型棉花大麗輪枝菌菌株的菌落中，有2個(gè)屬于菌絲型棉花大麗輪枝菌菌落，2個(gè)屬于中間型棉花大麗輪枝菌菌落，6個(gè)屬于VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落，1個(gè)屬于VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。由此可見，來自北疆棉區(qū)的落葉型棉花大麗輪枝菌能夠形成5種培養(yǎng)性狀的菌落;其中，形成VH-2型棉花大麗輪枝菌菌落的落葉型棉花大麗輪枝菌最多。

1.1.5PDA平板中非落葉型棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀

非落葉型棉花大麗輪枝菌是棉花大麗輪枝菌中一種致病性較弱的類型。經(jīng)PDA平板為期2周的培養(yǎng)可以發(fā)現(xiàn)，來自北疆棉區(qū)的5種非落葉型棉花大麗輪枝菌菌株的菌落中，有4個(gè)屬于VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落，1個(gè)屬于VH-3型棉花大麗輪枝菌菌落。由此可見，來自北疆棉區(qū)的非落葉型棉花大麗輪枝菌在PDA平板培養(yǎng)中更多形成VH-1型棉花大麗輪枝菌菌落。

1.2不同碳、氮比的查氏培養(yǎng)基中的棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀對(duì)比俞燕等[3]用查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)了落葉型（V592）、非落葉型（I6）2種致病的棉花大麗輪枝菌，發(fā)現(xiàn)這2種致病棉花大麗輪枝菌的菌株形成了培養(yǎng)性狀相似的菌落，菌落中的氣生菌絲均勻地分布在棉花大麗輪枝菌菌落表面，并在菌落中央形成了黑色的微菌核，而且各個(gè)棉花大麗輪枝菌菌落的生長(zhǎng)速度相近。

但是，比較不同碳、氮比的查氏培養(yǎng)基中的棉花大麗輪枝菌，會(huì)發(fā)現(xiàn)這2種致病的棉花大麗輪枝菌對(duì)查氏培養(yǎng)基中的碳、氮比的反應(yīng)不同。其中，落葉型棉花大麗輪枝菌菌落中的微菌核會(huì)隨著碳氮比的增加而減少;也就是說，較低的碳氮比（25∶1～30∶1）有利于落葉型棉花大麗輪枝菌（V592）菌落形成微菌核，較高的碳氮比（45∶1～50∶1）不利于落葉型棉花大麗輪枝菌（V592）菌落形成微菌核。而非落葉型致病棉花大麗輪枝菌（I6），在碳氮比不同的查氏培養(yǎng)基中，產(chǎn)生的微菌核數(shù)量沒有差異。

孢子方面，上述2種致病棉花大麗輪枝菌都在低碳氮比（25∶1）的查氏培養(yǎng)基中產(chǎn)生了最多的孢子、最多的菌絲，而孢子的萌發(fā)率在碳氮比為40∶1的查氏培養(yǎng)基中最高。

2研究棉花大麗輪枝菌培養(yǎng)的致病力分化

2.1棉花大麗輪枝菌致病力與培養(yǎng)性狀的關(guān)系

蔡夢(mèng)杭等學(xué)者的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，棉花大麗輪枝菌的致病力與其培養(yǎng)性狀有一些關(guān)系，如產(chǎn)生中間型菌落的2種菌株致病力最弱，產(chǎn)生菌絲型菌落的2種菌株致病力居中。但是，同一培養(yǎng)性狀的棉花大麗輪枝菌（也就是產(chǎn)生菌核型菌落的棉花大麗輪枝菌菌株）的致病力也產(chǎn)生了分化，而且與其具體培養(yǎng)性狀（即VH-1、VH-2和VH-3）無關(guān)。另外，不同學(xué)者的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)也不同，所以棉花大麗輪枝菌的致病力與培養(yǎng)性狀無關(guān)。

2.2棉花大麗輪枝菌致病力與致病類型的關(guān)系

蔡夢(mèng)杭等學(xué)者的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，棉花大麗輪枝菌的致病力與其致病類型有一些關(guān)系，并且同一致病類型的棉花大麗輪枝菌的致病力產(chǎn)生了分化。其中，5個(gè)非落葉型棉花大麗輪枝菌菌株中，BND-1菌株的致病力最強(qiáng)，其余4種都比其弱;13個(gè)落葉型棉花大麗輪枝菌菌株中，只有WD-3和SD-7這2種致病力弱。所以，總體來看，落葉型棉花大麗輪枝菌的致病力更強(qiáng)，但同一致病類型的大麗輪枝菌的致病力也存在一定的分化。

2.3棉花大麗輪枝菌致病力與來源地的關(guān)系

蔡夢(mèng)杭等學(xué)者的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，即便來自同一地區(qū)，只要棉花大麗輪枝菌的具體菌株不同，致病力就會(huì)產(chǎn)生明顯的分化。因此，不能采取在同一地區(qū)推廣同一耐病棉花品種的方法來防治棉花黃萎病。

2.4棉花大麗輪枝菌致病力與查氏培養(yǎng)基碳氮比的關(guān)系俞燕等學(xué)者發(fā)現(xiàn)，用前述2種棉花大麗輪枝菌感染軍綿1號(hào)（一種感病棉花品種）時(shí)，不同碳氮比的查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)后的棉花大麗輪枝菌均用了10d使軍綿1號(hào)出現(xiàn)發(fā)病癥狀，直到接種15d后，不同碳氮比的查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)后的棉花大麗輪枝菌感染的軍綿1號(hào)棉花才產(chǎn)生了明顯的差異。實(shí)驗(yàn)中，25∶1的低碳氮比查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)出的2種棉花大麗輪枝菌更能導(dǎo)致軍綿1號(hào)患病，而碳氮比高于35∶1的查氏培養(yǎng)基培養(yǎng)出棉花大麗輪枝菌的致病能力大大減弱。這可能是因?yàn)榈吞嫉扔欣诖篼愝喼a(chǎn)生更多的微菌核、氣生菌絲、孢子。

用軍綿2號(hào)（一種抗病棉花品種）做同樣的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)軍綿2號(hào)雖然也在第10天時(shí)表現(xiàn)出了發(fā)病癥狀，但是發(fā)病癥狀較軍綿1號(hào)輕;并且發(fā)現(xiàn)碳氮比適中的（35∶1）查氏培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)出對(duì)其致病能力最強(qiáng)的棉花大麗輪枝菌。

3結(jié)語

棉花大麗輪枝菌的生理型、病理型都很多，致病能力亦有強(qiáng)弱之別，而且棉花大麗輪枝菌的培養(yǎng)性狀、致病能力都會(huì)受到培養(yǎng)環(huán)境的影響。研究人員應(yīng)繼續(xù)收集棉花大麗輪枝菌，尋找對(duì)抗棉花大麗輪枝菌的辦法，從而提升我國(guó)棉花的產(chǎn)量。

參考文獻(xiàn)

[1] 喻秀秀，王卿，張昕，鄧晟，林玲.江蘇省大麗輪枝菌的培養(yǎng)、遺傳及致病特性分析[J].植物病理學(xué)報(bào)，2018，48（03）：378-388.

[2] 蔡夢(mèng)杭，徐燦，劉啟，俞燕，黃家風(fēng).北疆棉區(qū)棉花黃萎病菌培養(yǎng)性狀及致病力分化[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，56（01）：93-103.

[3] 俞燕，蔡夢(mèng)杭，徐燦，黃家風(fēng).不同碳氮比對(duì)棉花黃萎病菌主要生物學(xué)性狀及致病力的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，56（01）：84-92.