畜產(chǎn)品中喹諾酮類藥物檢測技術(shù)

楊丹

喹諾酮類藥物，特別是氟喹諾酮類抗生素的發(fā)展史可追溯到半個世紀(jì)之前。氟喹諾酮類藥物又可稱為吡啶酮酸類、吡酮酸類、沙星類藥物，屬于含氟第三代氟喹諾酮類化學(xué)合成抗生素，是廣泛應(yīng)用的人工合成抗菌藥。喹諾酮類藥物主要通過阻斷DNA回旋酶，造成細(xì)菌DNA不可逆損害來達到抗菌效果，它們具有抗菌、抗支原體、抗球蟲等作用。因喹諾酮類藥物對多種革蘭氏陰性菌具有良好的殺菌作用，是養(yǎng)殖中常用到的三大類藥物之一，主要用于預(yù)防和治療畜禽及魚類的感染性病狀。因為喹諾酮類藥物價格低廉、抗菌譜廣，被廣泛應(yīng)用于臨床和獸藥領(lǐng)域。

濫用引發(fā)的環(huán)境危害和人類疾病風(fēng)險成為目前的焦點，甚至在經(jīng)濟利益的誘惑下，在養(yǎng)殖、加工貯存等過程中添加過量的抗菌藥物，造成抗生素類藥物殘留量超標(biāo)。喹諾酮類藥物殘留通過食物進入人體，造成人類中毒、過敏，甚至致癌、致畸、致突變等嚴(yán)重后果，給消費者的健康帶來潛在的危害。有些國家將喹諾酮類藥物列為禁藥，或嚴(yán)格要求用量。目前，歐盟制定的喹諾酮類藥物在動物源性食品中的殘留標(biāo)準(zhǔn)是不超過100納克/毫升。

目前，常用于畜產(chǎn)品中氟喹諾酮類抗生素殘留的前處理方法有固相萃取法、基質(zhì)固相分散萃取法、超臨界流體萃取法、固相微萃取、分子印跡聚合物法、分散液液微萃取等方法。檢測畜產(chǎn)品中殘留的喹諾酮的方法有高效液相色譜法、液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜—四極桿—飛行時間質(zhì)譜法、熒光免疫測定法、免疫學(xué)方法等。膠體金免疫層析技術(shù)分為競爭法、間接法和雙抗夾心法。膠體金法檢測原理是以條狀纖維層析材料為固相，樣品溶液在毛細(xì)作用下在層析條上泳動，使樣品中的層析材料上針對待測物質(zhì)的受體與待測物產(chǎn)生特異性強、親和性高的結(jié)合。在層析過程中免疫復(fù)合物容易被截留或富集在層析材料的一定范圍內(nèi)，可以通過酶促的顯色反應(yīng)或直接使用可目測的著色標(biāo)記物來標(biāo)記，在短時間內(nèi)就可以觀察到直觀的實驗結(jié)果。禽蛋中的藥物殘留主要使用膠體金免疫層析技術(shù)的競爭法。試紙條對含有恩諾沙星、沙拉沙星、雙氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、培氟沙星、依諾沙星和惡喹酸等藥物的豬尿樣品的檢出限值為20微克/升，檢測的特異性高，在37℃時可保存160天左右;在4℃時，可保存24個月。膠體金免疫層析技術(shù)在基層養(yǎng)殖場易操作、易廣泛應(yīng)用，對工作人員的專業(yè)要求技術(shù)水平不高，應(yīng)用到基層養(yǎng)殖場比較切合實際且便捷。

質(zhì)譜分析是先將樣品離子化，按離子的質(zhì)荷比再進行分離，測量每個離子譜峰的強度，實現(xiàn)分析目的的分析方法。色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用將色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能相配合起來，實現(xiàn)對復(fù)雜混合物進行更精準(zhǔn)的定量和定性分析，簡化了樣品的前處理過程，使分析樣品的過程更簡單、快捷。高效液相色譜法擁有靈敏、快速、高分辨率、重復(fù)性穩(wěn)定的優(yōu)點，已經(jīng)普遍應(yīng)用到物質(zhì)的定量和定向分析檢測。在分析氟喹諾酮類抗生素殘留中，高效液相色譜需要根據(jù)不同動物源性樣品選用相應(yīng)的檢測器進行操作，通過回收率、定量限和檢出限等系列參數(shù)計算出喹諾酮類藥物的殘留量。