探討無創(chuàng)DNA檢測和羊水細(xì)胞染色體檢查的意義

龍冠現(xiàn)

【關(guān)鍵字】孕婦；無創(chuàng)DNA檢測；羊水細(xì)胞；染色體；診斷；胎兒

近年來，我國出生缺陷率具有升高的趨勢，發(fā)病率可達(dá)6%，出生缺陷不僅會(huì)對嬰幼兒的生命以及生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響，還會(huì)為家庭以及社會(huì)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此進(jìn)行產(chǎn)前診斷工作意義重大。當(dāng)前，羊水細(xì)胞培養(yǎng)是孕婦產(chǎn)前診斷的主要方法，因具有較高的準(zhǔn)確率，也被稱為是產(chǎn)前診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但該診斷方式的不足之處在于需要對孕婦穿刺取樣，存在著較大的風(fēng)險(xiǎn)，且所用時(shí)間較長，容易為孕婦帶來較大的心理壓力，因此采用非侵入性的診斷方式進(jìn)行產(chǎn)前診斷意義重大[1-2]。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測是分析胎兒染色體非整倍體異常的一項(xiàng)技術(shù)，近年來得到較好的應(yīng)用，該方式對于檢測染色體異常具有較高的準(zhǔn)確性[3]。本次研究以100例孕婦作為研究對象，分析無創(chuàng)DNA檢測和羊水細(xì)胞染色體檢查對孕婦的應(yīng)用價(jià)值，詳細(xì)情況如下。

1 對象和方法

1.1 對象

將 2018年1月—2019年1月期間我院收治的100例孕婦作為研究對象，年齡范圍為35～46歲，平均年齡為（38.4±9.7）歲，平均孕周為（20.7±3.2）周，孕婦均具有高齡，具有出生缺陷生育史和產(chǎn)前篩查高風(fēng)險(xiǎn)等特點(diǎn)，所有孕婦均知情并同意本次研究，我院倫理委員會(huì)已批準(zhǔn)。

1.2 方法

無創(chuàng)DNA檢測；在取得孕婦同意之后，抽取5 mL靜脈血于抗凝管之中，放置在4℃的溫度下保存，采血后的4 h內(nèi)，進(jìn)行離心處理，離心后將血漿放置-80℃保存，提取血漿中游離的DNA，PCR擴(kuò)增，獲得對應(yīng)樣本DNA文庫，采用生物信息學(xué)對測序的結(jié)果進(jìn)行分析。

羊水細(xì)胞染色體檢查；在超聲引導(dǎo)下，經(jīng)腹壁穿刺抽取羊水30 mL并將其放置于無菌BD管中保存，實(shí)驗(yàn)室中細(xì)胞培養(yǎng)，制片對染色體核型進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩種檢查方式的檢出率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將數(shù)據(jù)納入SPSS 18.0軟件中分析，使用χ2和百分比表示計(jì)數(shù)資料，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

100例患者中共計(jì)10例患者染色體異常，羊水細(xì)胞染色體檢查檢出率為100%（10/10），無創(chuàng)DNA檢測檢出率為90%（9/10），兩種檢測方式無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表1。

3 討論

因我國人口基數(shù)大，出生缺陷發(fā)病率也較高，曾有相關(guān)數(shù)據(jù)表明，我國每年先天性致殘和致缺陷人數(shù)約為出生總?cè)丝跀?shù)的6%，且近年來，該比例具有不斷增加的趨勢，在各種缺陷性疾病之中，染色體病變的發(fā)生率最高[4]。胎兒染色體異常是最為嚴(yán)重的一種先天性疾病，常見的遺傳疾病有13-三體、18-三體、21-三體以及TURNER綜合征等，對孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷對于降低染色體異常發(fā)生率意義重大，盡早發(fā)現(xiàn)胎兒嚴(yán)重結(jié)構(gòu)異常和染色體異常不僅可以降低患者家庭負(fù)擔(dān)和社會(huì)壓力，還可避免孕婦受到嚴(yán)重的身心傷害。當(dāng)前，多數(shù)地區(qū)產(chǎn)前診斷主要是采用血清學(xué)方法來篩查胎兒染色體機(jī)構(gòu)異常，若存在異常情況，則利用超聲或者羊水穿刺對患者進(jìn)行進(jìn)一步診斷，從而使缺陷兒的出生率得到降低，但該種方式對孕婦的影響較大，不利于孕婦身心健康[5-6]。傳統(tǒng)對于高危孕婦的篩查方式主要有羊膜腔穿刺取樣，絨毛穿刺取樣等，但上述診斷方式均屬于侵入性的操作，對于孕婦和胎兒均具有不同程度的影響，以往，對于高風(fēng)險(xiǎn)孕婦主要采用羊水穿刺進(jìn)行診斷，但其具有較高的風(fēng)險(xiǎn)性，可能導(dǎo)致孕婦出現(xiàn)流產(chǎn)的可能，為孕婦帶來嚴(yán)重的心理負(fù)擔(dān)和精神壓力。

當(dāng)前產(chǎn)前診斷有創(chuàng)技術(shù)已經(jīng)發(fā)展的較為成熟，但對患者進(jìn)行有創(chuàng)檢查時(shí)可能存在著較大的風(fēng)險(xiǎn)性，在采取標(biāo)本的過程中可能會(huì)導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)心動(dòng)過緩，流產(chǎn)以及早產(chǎn)等情況發(fā)生，此外，羊水穿刺檢查會(huì)在一定程度增加孕婦的心理負(fù)擔(dān)和精神壓力，導(dǎo)致其依從性不高，對胎兒染色體異常征象的篩查具有一定的缺陷[7]。無創(chuàng)基因檢測屬于一種新型的產(chǎn)前診斷方式，具有無創(chuàng)，便捷等優(yōu)勢，檢測時(shí)，僅需采集患者5 mL靜脈血即可，在一定程度上減少了羊水穿刺的步驟，降低了患者流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)，緩解了孕婦的心理壓力，該診斷方式的目的主要是提高產(chǎn)前診斷準(zhǔn)確率，減少孕婦的診斷風(fēng)險(xiǎn)。該診斷方式主要是利用大規(guī)模的平行測序技術(shù)對母體外周血中游離的DNA進(jìn)行深度測序，從而取得胎兒染色體的關(guān)鍵信息[8-10]。研究報(bào)道，孕婦在第4周便可以檢測到胎兒游離的DNA，在妊娠7周之后，檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率更高，可盡早的得出有關(guān)胎兒DNA水平的狀態(tài)，且具有含量高，半衰周期短，提取方便等顯著優(yōu)勢，因此屬于有效、無創(chuàng)、簡單的一種診斷方式。通常在對患者進(jìn)行詳細(xì)的介紹后，家屬和孕婦均會(huì)配合檢測，基本無拒絕和不理解的情況，由此也證明，無創(chuàng)DNA基因檢測技術(shù)與侵入性檢查相比較，更容易被患者及家屬認(rèn)可和接受。但就目前而言，該診斷依舊具有一定的不足，如該方式不適用于孕婦自身具有染色體異常的情況，不可用于多胎孕婦；無法準(zhǔn)確檢測出重復(fù)，倒位以及移位等染色體異常疾?。辉袐D外周血中cffDNA濃度是影響該檢查結(jié)果的重要指標(biāo)，若濃度過低可能會(huì)影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性[11-13]。

在本次研究中，無創(chuàng)DNA檢測與羊水細(xì)胞染色體檢查的準(zhǔn)確率具有較高的一致性，數(shù)據(jù)對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明無創(chuàng)DNA檢測可作為產(chǎn)前檢查的重要手段，具有安全性高，無創(chuàng)以及準(zhǔn)確率高等顯著優(yōu)勢，更容易被孕婦所接受，在降低出生缺陷率等方面發(fā)揮著重要作用。但在臨床中，無創(chuàng)DNA檢測并不能完全取代羊水穿刺檢查，臨床應(yīng)將其作為一種輔助手段，對于檢測結(jié)果提示異常的患者，應(yīng)建議孕婦進(jìn)行羊水穿刺診斷，保證診斷準(zhǔn)確率，避免誤診和漏診情況的發(fā)生。

表1 兩種檢查方式的檢出率對比

綜上所述，對孕婦采用無創(chuàng)DNA檢測具有較高的準(zhǔn)確率，使用價(jià)值高，值得在臨床進(jìn)一步推廣使用。