濕疹患兒血清維生素D、IL-17、ECP 的相關(guān)性及其與濕疹嚴(yán)重程度的關(guān)系

王葉萍 徐建新 應(yīng)玲靜

濕疹是兒童常見的一種炎癥性皮膚病，皮疹表現(xiàn)多樣性，伴明顯瘙癢，病程較長，常反復(fù)發(fā)作[1]。研究發(fā)現(xiàn)，Th17 細(xì)胞參與濕疹的發(fā)病過程[2]。維生素D可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，參與變態(tài)反應(yīng)疾病的發(fā)生[3]。本研究通過檢測中重度濕疹嬰幼兒血清25-羥維生素D3[25-hydroxyvitamin D3，25-（OH）D3]、白細(xì)胞介素17（interleukin，IL-17）及嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白（eosinophil cationic pro-tein，ECP）水平，探討濕疹患兒25-（OH）D3、IL-17 及ECP 水平相關(guān)性及其與濕疹嚴(yán)重程度關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年7 月—2018 年12 月在浙江省金華市中心醫(yī)院皮膚科及兒科診斷為濕疹的52 例患兒為濕疹組。根據(jù)濕疹面積及嚴(yán)重度指數(shù)（eczemra area and severity index，EASI）評分法[4]，31～60 分為中度濕疹組，61～90 分為重度濕疹組，各26 例。選取同期健康體檢嬰幼兒52 名作為健康對照組（剔除既往有濕疹、過敏性鼻炎等過敏性疾病史）。本研究取得患兒家長或監(jiān)護人知情同意，并獲得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，倫理號為（2016）倫審第（80）號。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：濕疹組患兒均符合《濕疹診療指南》中關(guān)于濕疹的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，依據(jù)EASI 評分法均屬于中重度濕疹。排除標(biāo)準(zhǔn)：皮膚受損區(qū)有嚴(yán)重感染者；治療前3 個月糖皮質(zhì)激素、抗組胺類或免疫抑制類藥物治療者；伴結(jié)締組織系統(tǒng)疾病及先天性免疫缺陷等；同時參與其他臨床治療者。

1.3 觀察指標(biāo) 抽取所有患兒外周靜脈血6mL，以3000r/min 離心10min（離心半徑13.5cm），分離血清，收集上層液，置-80℃冰箱保存待檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清25-（OH）D3 水平，試劑盒購自英國IDS 公司（批號22S17112704）。采用雙抗體夾心ELISA 法測定血清IL-17 水平，試劑盒購自美國R&D Systems 公司（批號13-CGS-2146）。采用熒光酶聯(lián)免疫吸附法測ECP 水平，試劑購自瑞典Pharmacia 公司（批號36D16107302）。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較符合正態(tài)分布的使用t 檢驗分析，不符合的用Mann-Whitney U 秩和檢驗，計數(shù)資料采用卡方檢驗，相關(guān)分析采用雙變量相關(guān)分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較 中度濕疹組男14 例，女12 例，月齡（14.62±5.38）個月，出生胎齡（≥38 周）23 例，出生體質(zhì)量2.5～4.0kg 25 例，規(guī)律補充維生素D 22例，母孕期有缺鈣史5 例。重度濕疹組男11 例，女15例，月齡（14.83±4.86）個月，出生胎齡（≥38 周）25例，出生體質(zhì)量2.5～4.0kg 24 例，規(guī)律補充維生素D 21 例，母孕期有缺鈣史7 例。健康對照組男25 名，女27 名，月齡（14.76±5.24）個月，出生胎齡（≥38 周）49例，出生體質(zhì)量2.5～4.0kg 49 名，規(guī)律補充維生素D 46 名，母孕期有缺鈣史10 名。三組在性別、平均月齡、出生胎齡、出生體質(zhì)量、規(guī)律補充維生素D 及母孕期有缺鈣史例數(shù)方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較 中、重度濕疹組患兒與健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平經(jīng)分析差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)兩兩比較，中、重度濕疹組患兒血清25-（OH）D3 水平明顯低于健康對照組，IL-17、ECP 水平高于健康對照組；與中度濕疹組比較，重度濕疹組患兒血清25-（OH）D3 水平更低，IL-17、ECP 水平更高（P＜0.05），見表1。

表1 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較（）

表1 中、重度濕疹組患兒和健康對照組嬰幼兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平比較（）

注：25-（OH）D3 為25-羥維生素D3；IL-17 為白細(xì)胞介素17；ECP 為嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白；與健康對照組比較，aP＜0.05；與中度濕疹組比較，bP＜0.05

2.3 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平與濕疹嚴(yán)重程度關(guān)系 濕疹患兒血清25-（OH）D3 水平與濕疹嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.705，P＜0.01），血清IL-17、ECP 水平與濕疹嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（r=0.884、0.864，P 均＜0.01），見圖1。

2.4 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 水平相關(guān)性分析 濕疹患兒血清25-（OH）D3 與IL-17、ECP 均呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.664、-0.578，P 均＜0.01），ECP 與IL-17 呈正相關(guān)（r=0.779，P＜0.01），見圖2。

3 討論

濕疹是一種內(nèi)外因素共同作用的遲發(fā)型超敏反應(yīng)，其發(fā)病與皮膚屏障功能障礙、免疫異常、炎癥介質(zhì)等多因素有關(guān)[5]。近年研究發(fā)現(xiàn)，25-（OH）D3 與嬰幼兒濕疹關(guān)系密切[6-7]。維生素D 作為免疫系統(tǒng)的重要調(diào)節(jié)因子越來越被認(rèn)可。維生素D 可阻礙B 淋巴細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)活化的B 淋巴細(xì)胞凋亡，抑制漿細(xì)胞的分化及免疫球蛋白的分泌[8]。25-（OH）D3 還可增強巨噬細(xì)胞吞噬趨化能力，增強單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的抗菌肽活性，殺傷多種病原體。Camargo 等[9]研究發(fā)現(xiàn)，補充維生素D 可改善兒童特應(yīng)性皮炎癥狀。本研究發(fā)現(xiàn)，濕疹患兒血清25-（OH）D3 水平明顯低于健康對照組（P<0.05），且與濕疹嚴(yán)重程度負(fù)相關(guān)（P<0.05），與李垣君等[10]報道一致，提示25-（OH）D3 水平不足與濕疹的發(fā)病及其嚴(yán)重程度有一定相關(guān)性。

近年研究認(rèn)為，除Thl/Th2 失衡學(xué)說外，可能還存在新的細(xì)胞亞群，如Th17 細(xì)胞、Treg 細(xì)胞等[11]。Th17 細(xì)胞可分泌IL-17、IL-22 等多種細(xì)胞因子，其中IL-17 是Th17 細(xì)胞的主要效應(yīng)分子。IL-17 在多種炎癥性疾病、自身免疫性及變態(tài)反應(yīng)性疾病患者體內(nèi)高表達(dá)，證實其可誘導(dǎo)多種促炎介質(zhì)分泌并參與炎癥級聯(lián)反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示，濕疹患兒血清IL-17 明顯高于健康對照組，且與濕疹嚴(yán)重程度明顯相關(guān)，與沈斌、麥衛(wèi)華等[2，12]報道一致。然而，IL-17 參與濕疹發(fā)病的機制尚不明確，有研究表明，IL-17 通過受體介導(dǎo)的多種信號途徑誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生IL-8、IL-6 等，趨化并激活中性粒細(xì)胞，促進炎癥細(xì)胞產(chǎn)生強大促炎活性，參與各種炎癥反應(yīng)及免疫性疾病的發(fā)生[13]。IL-17 還可刺激皮膚的角質(zhì)形成細(xì)胞分泌多種炎癥因子，誘導(dǎo)釋放趨化因子，并能增強角質(zhì)T 細(xì)胞的毒性和粘附性，進而放大T 細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。

圖1 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 與濕疹EASI 評分相關(guān)性分析

圖2 濕疹患兒血清25-（OH）D3、IL-17、ECP 之間相關(guān)性分析

在濕疹發(fā)病過程中，嗜酸性粒細(xì)胞被活化后，釋放ECP，抑制T 細(xì)胞增殖，促進肥大細(xì)胞釋放組胺，破壞嗜酸粒細(xì)胞及角質(zhì)形成細(xì)胞。ECP 能反映機體被致敏后嗜酸性粒細(xì)胞在炎癥過程中活化程度和脫顆粒釋放毒性介質(zhì)的能力，可作為濕疹炎性反應(yīng)活動的評價指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，濕疹患兒血清ECP 水平明顯高于對照組（P<0.05），與IL-17、濕疹嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P<0.05），由此推斷ECP 與IL-17 共同趨化嗜酸性粒細(xì)胞在組織中浸潤，且ECP 能較好的反映濕疹的嚴(yán)重程度。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，中重度濕疹嬰幼兒血清25-（OH）D3 水平與ECP、IL-17 水平呈明顯負(fù)相關(guān)（P<0.05），說明25-（OH）D3 水平不足與Th17 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)有一定相關(guān)性。然而25-（OH）D3、IL-17 共同參與濕疹發(fā)病的具體機制尚不明確，有研究表明，25-（OH）D3 可影響活化T 細(xì)胞分化，抑制CD4+細(xì)胞分泌IL-17，抑制IL-17 細(xì)胞反應(yīng)[14-15]。本研究樣本量少，由于兒科及皮膚科住院患兒屬于輕度濕疹人數(shù)相對少，病情相對輕，依從性不高，故選取中重度濕疹嬰幼兒為研究對象，有一定局限性。因此，中重度濕疹嬰幼兒25-（OH）D3 與Th17 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)之間相關(guān)性機制有待更深入的研究。

綜上所述，25-（OH）D3、IL-17、ECP 共同參與嬰幼兒中重度濕疹的發(fā)病，且與濕疹的嚴(yán)重程度有關(guān)。此外，25-（OH）D3、IL-17 及ECP 之間存在一定相關(guān)性。