黃蓋鰈原種培育與保存技術(shù)

李秀梅 ，張寧 ，王文豪 ，胡樂彬 ，王曉飛 ，于文松

（1.煙臺宗哲海洋科技有限公司，山東 煙臺 265617；2.煙臺市海洋經(jīng)濟(jì)研究院，山東 煙臺 264003）

黃蓋鰈為黃、渤海地區(qū)特有的一種冷水性鲆鰈魚類，以蓬萊近海為主要產(chǎn)地，地方名又稱當(dāng)?shù)厣?、地生魚、偏口魚、黃蓋、沙板、小嘴、沙蓋。黃蓋鰈體扁平呈橢圓形，頭小，口小，兩邊口裂不等長。兩眼小并均長在頭右邊，有眼一側(cè)為后頭，呈深褐色，被櫛鱗，有不規(guī)則斑駁?！芭钊R地生子”地域范圍為東經(jīng) 120°40'32.25"～121°01'26.23"，北緯 37°42'39.01"～37°50'43.45"，是山東省煙臺市蓬萊市的特產(chǎn)。黃蓋鰈原種培育與保存技術(shù)是使黃蓋鰈保持原本遺傳性狀，以達(dá)到該物種性狀穩(wěn)定效果。它包括了原種培育技術(shù)、產(chǎn)卵孵化技術(shù)、苗種培育技術(shù)、保種培育技術(shù)、隔離保護(hù)措施及質(zhì)量管理等。經(jīng)過保種培育的親本具有許多優(yōu)良性狀，表現(xiàn)出較高的生物學(xué)價值，為黃蓋鰈苗種繁育、增養(yǎng)殖創(chuàng)造了較大的經(jīng)濟(jì)效益。該試驗(yàn)在國家級山東蓬萊黃蓋鰈原種場已獲得成功，現(xiàn)將技術(shù)要點(diǎn)總結(jié)如下。

1 技術(shù)條件

1.1 生產(chǎn)設(shè)施

原種場擁有工廠化育苗與養(yǎng)殖車間38 000 m2，其中苗種車間4 000 m2（有效育苗水體面積3 200 m2），原種培育車間1 000 m2，親魚培育及良種選育車間2 000 m2；露天保種池2個，共30 hm2。場區(qū)內(nèi)各類育苗養(yǎng)殖設(shè)施齊全，餌料培育車間2 000 m2；餌料加工冷庫（600 t）一座。水、電、氣、暖系統(tǒng)完備。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

電子顯微鏡照相系統(tǒng)、解剖鏡、手術(shù)剪刀及常規(guī)儀器1套。

2 原種培育

2.1 親魚來源及選優(yōu)

采捕蓬萊黃蓋鰈國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護(hù)區(qū)內(nèi)的野生親魚或原種場內(nèi)保存的原種親魚，經(jīng)過初步篩選，選取身體肥滿、體色正常（鮮艷，無白化）、鱗片和鰭膜完整、健康無病的個體。

2.2 親魚的強(qiáng)化培育

2.2.1 培育池要求 采用室內(nèi)培育池，培育池的形狀以圓形為佳，要求水體在25 m3以上，水深在1.2 m以上，水源充足并配有充足的供排水系統(tǒng)和充氣設(shè)備。

2.2.2 強(qiáng)化培育條件 采用自然海水經(jīng)沉淀凈化處理后進(jìn)行開放式循環(huán)流水培育親魚，水源水質(zhì)符合GB 11607的要求，養(yǎng)殖用水水質(zhì)應(yīng)符合NY 5052的要求。流水的日交換量為4～6個全量/天，親魚強(qiáng)化培育密度為 3～5 尾/m2；光線強(qiáng)度 500～800 lx，水溫 10～20 ℃，鹽度 29～32，pH 值 7.6～8.6，溶解氧大于5 mg/L，氨氮小于0.02 mg/L，細(xì)菌總數(shù)小于5個/mL。

2.2.3 培育餌料 親魚培育中，其餌料應(yīng)以新鮮魚為主，以脂肪含量低，蛋白質(zhì)含量高的魚為佳，如小黃花魚，也可投喂配合飼料，通過優(yōu)質(zhì)餌料的強(qiáng)化飼育促進(jìn)親魚積極攝食，在培育期，應(yīng)當(dāng)盡早投喂含高蛋白、高度不飽和脂肪酸的餌料，并適量添加維生素E、維生素C以及其他微量的營養(yǎng)物質(zhì)。飼料有軟顆粒飼料和飼料魚。軟顆粒飼料主要成分為粉狀配合飼料、飼料魚等。飼料魚應(yīng)使用新鮮、冷凍、不變質(zhì)的魚。配合飼料應(yīng)符合NY 5072的要求，飼料應(yīng)大小適口，日投喂1～2次，日投喂量為魚體質(zhì)量的1%～3%。

2.2.4 日常管理 在親魚培育中，每天24 h實(shí)時測量水溫、鹽度、溶解氧、pH值等水質(zhì)因子，保證水質(zhì)的穩(wěn)定，每5～7 d徹底清刷池底1次，每半個月倒池1次，經(jīng)過控溫、控光及營養(yǎng)強(qiáng)化管理后的親魚，性腺基本發(fā)育成熟。

2.3 產(chǎn)卵與人工授精

采用人工擠卵干法授精。先擦干魚體和器皿，防止水及排泄物混入。然后按1×105粒卵加入1~5 mL精液，快速攪拌均勻使受精卵充分接觸。再插入少量經(jīng)沉淀沙濾的海水，使精液、卵子、水的體積比約為 0.5∶100∶100，繼續(xù)攪拌 1 min，然后靜置 5 min，再加入海水，靜置10~15 min，待卵粒吸水膨脹后，清水清洗1~2次，放入2 000 mL量筒中，加海水使上浮卵和沉淀卵分離。受精卵用清水沖洗2~3次，再用脫粘液清洗受精卵5~10次，直至受精卵粒不相互粘連。將脫粘后的受精卵放入桶式孵化器中進(jìn)行流水孵化或移入平面網(wǎng)箱內(nèi)孵化。

2.4 受精卵孵化

2.4.1 孵化控制條件 在孵化池中采用流水或靜水對受精卵進(jìn)行充氣孵化，孵化密度為5~10萬粒/m3，日換水量為全量的50%~70%，定時吸除死卵和污物，孵化水溫10~13℃，鹽度29~30，pH值7.8~8.0，溶解氧5~8 mg/L，光照500~1 000 lx。

2.4.2 孵化管理 在水溫10~13℃條件下，由于黃蓋鰈受精卵要經(jīng)過80 h左右才能孵化出仔魚，因此在孵化過程中一定要加強(qiáng)管理，保持水環(huán)境的相對穩(wěn)定，孵化期間定時清理水表面上的粘液，吸出池底的死卵；正常發(fā)育的受精卵，在孵化24 h后即可上浮，此時停止流水和充氣，讓好的胚胎上浮，并將其撈出，移到新的孵化池中進(jìn)行后期培育，將沉到底部的畸形胚胎以及不成熟或授精的卵去掉，對提高孵化率大有好處。

2.5 苗種培育

2.5.1 育苗池的選擇 將孵化出的仔魚按養(yǎng)殖密度2~4萬尾/m3放入室內(nèi)苗種培育池中，育苗池以圓形為好，面積為10~20 m2，水深0.6~1.0 m。

2.5.2 水質(zhì)管理 苗種培育要求水質(zhì)清新、穩(wěn)定，海水要經(jīng)過過濾，培育適宜水溫為10~17℃，水溫日變化不超過2℃；培育過程中保持恒定的鹽度28~32，pH值波動不宜過大，一般為pH值7.8~8.4，連續(xù)充氣，要求水中溶解氧大于5 mg/L，水中氨氮小于0.02 mg/L；仔魚變成稚魚前進(jìn)行靜水培育，在投喂餌料前，日換水量為總水體的10%~20%，仔魚變成稚魚后換水率逐漸從20%增加到100%~200%，每日吸污1次。

2.5.3 飼喂管理 仔魚孵出3~5 d后，逐漸開口攝食，從第3天開始投喂輪蟲和添加小球藻，小球藻投喂密度為每毫升25~30萬個，輪蟲密度為每毫升5~10個，日投喂2~3次；第15天開始投喂鹵蟲無節(jié)幼體，投喂密度每毫升0.2~1.0個，日投喂2次；第25天開始投喂人工配合餌料。

2.6 成魚養(yǎng)殖

2.6.1 養(yǎng)殖池 養(yǎng)殖池以圓形為佳，也可用抹角方形池或橢圓形池，面積一般在30~50 m2，水深1.0~1.2 m，進(jìn)排水設(shè)計(jì)合理。

2.6.2 養(yǎng)殖用水 水質(zhì)要符合NY5052標(biāo)準(zhǔn)，海水經(jīng)過充分沉淀、砂濾，保證清潔無懸浮物和雜質(zhì)。

2.6.3 養(yǎng)殖條件 光照強(qiáng)度500~1 000 lx，水溫為常溫，控制夏季水溫不超過27℃，冬季不低于2℃，鹽度25~32，pH值7.8~8.4，溶解氧大于5 mg/L，因此要微量充氣，日換水量不少于2個全量；水中氨氮小于0.02 mg/L。

2.6.4 飼喂管理 飼料選用配合飼料或鮮雜魚，配合飼料的日投喂量為魚體質(zhì)量的1%~2%，鮮雜魚的日投喂量為魚體質(zhì)量的3%~5%，日投喂2次。

3 保種

3.1 保種池條件

3.1.1 室外保種池條件 圍堰保種池寬50 m，長300 m，圍堰頂部設(shè)擋浪胸墻。由于黃蓋蝶具有喜埋伏于沙層的生活習(xí)性，因此必須對底質(zhì)進(jìn)行改造。采取的主要措施是清污整池后在池內(nèi)深水區(qū)處鋪設(shè)沙層，增加底質(zhì)中沙的含量，以利于黃蓋蝶棲息。為防止風(fēng)暴潮等惡劣天氣對保種池構(gòu)成威脅，需定期對保種池塘實(shí)施除險加固、清淤護(hù)坡，尤其對池塘靠海一側(cè)進(jìn)行修繕加固。

3.1.2 室內(nèi)養(yǎng)殖池條件 室內(nèi)越冬的大棚采用南北朝向，車間設(shè)計(jì)為單跨建筑，排架結(jié)構(gòu)。親魚培育池為圓形魚池最佳，直徑為5.0 m，單池標(biāo)稱水面19 m2，水深0.6～1.10 m（可調(diào)），池內(nèi)壁采用防水做法，每池設(shè)單獨(dú)的固液分離裝置，清水回收，少量濃縮污水定時排放；排污地溝，內(nèi)設(shè)循環(huán)水回水管道。

3.2 親魚的放養(yǎng)

捕撈和運(yùn)輸親魚時，應(yīng)嚴(yán)防其體表受傷，要采用質(zhì)地柔軟（尼龍線）編織的、小網(wǎng)目（小于5 cm）網(wǎng)具捕撈，捉魚等操作動作要準(zhǔn)確、熟練，動作要輕，裝魚容器的內(nèi)壁要光滑。運(yùn)輸時要充氣，盡量縮短運(yùn)輸時間。雄魚放養(yǎng)密度15~20尾/m2，雌魚放養(yǎng)密度8~12尾/m2，放養(yǎng)前要注意溫度差不超過2℃。

3.3 飼養(yǎng)管理

自然水溫，夏季不超過20℃，冬季不低于10℃，當(dāng)水溫高于20℃或低于10℃時應(yīng)該黃蓋鰈親魚移至室內(nèi)培育池。鹽度25~32；pH值7.8~8.4；溶解氧5 mg/L以上，因此要微量充氣；自然光照強(qiáng)度；每天換水量為培育水體的1/3~2/3。餌料應(yīng)以新鮮魚為主，以脂肪含量低，蛋白質(zhì)含量高的魚為佳，如小黃花魚，也可投喂配合飼料（應(yīng)符合NY 5072）。日投喂1~2次，日投喂量為魚體重的1%~3%。要勤于觀測魚的攝食、活動和生長，發(fā)現(xiàn)問題及時處理。

3.4 清池除害

3.4.1 清污整池 室外培育池使用3年以上，一定要清污整池。應(yīng)將培育池、溝渠等積水排凈，封閘曬池，維修堤壩，不得將池中污泥直接排入海中；室內(nèi)培育池也應(yīng)定期清污、刷池、消毒。

3.4.2 消毒除害 清污整池后，應(yīng)清除黃蓋鰈的敵害生物，致病生物及攜帶病原的中間宿主。

4 隔離保護(hù)措施及質(zhì)量管理

原種場內(nèi)的黃蓋鰈原種由技術(shù)水平較高、責(zé)任心強(qiáng)的技術(shù)人員進(jìn)行專池培育，專人管理，通過控制餌料、溫度、光照、流水等環(huán)境條件減少病害發(fā)生，降低死亡數(shù)量；每年不斷淘汰狀態(tài)不好、老化的親本，并將收集的野生黃蓋鰈親本和原種群體繁育保存的親本補(bǔ)充到原種群體，同時控制雌雄比例，始終使親本群體具有原始遺傳性狀。詳細(xì)記錄黃蓋鰈原種隔離培育的時間、地點(diǎn)、數(shù)量、規(guī)格、成活率及培育的親本情況；后備親本養(yǎng)殖面積、水深、放養(yǎng)、選育情況；黃蓋鰈育苗水體、選育、出池情況。

對保存的原種定期進(jìn)行生態(tài)環(huán)境、形態(tài)、生長、生理和遺傳性狀的種質(zhì)測定。對售出的苗種進(jìn)行跟蹤調(diào)查，掌握生長和質(zhì)量狀況。通過近5年的養(yǎng)殖效果看，黃蓋鰈性狀穩(wěn)定，沒有出現(xiàn)種質(zhì)退化現(xiàn)象。

6 小結(jié)與討論

6.1 親本來源及性腺發(fā)育情況

親本選擇是原種保存培育成敗的關(guān)鍵。蓬萊近海是黃蓋鰈的重要產(chǎn)地，這里有豐富的種質(zhì)資源。一是通過就近捕撈野生魚，再經(jīng)過選優(yōu)、強(qiáng)化培育等措施，最終將其培育成原種親本；二是從原種親本人工繁殖的子代中進(jìn)行篩選獲得。經(jīng)過我們多年的實(shí)踐證明，兩種技術(shù)路線都能保證親本具備黃蓋鰈的原始種質(zhì)特征。

黃蓋鰈屬于分批成熟多次產(chǎn)卵型魚類，卵為粘性卵，卵徑大約為600~700μm，不太透明，不易觀察油球，完全透明而失去粘性的卵子為過熟卵，沒有呈現(xiàn)半透明的則是未成熟的卵子。未成熟黃蓋鰈卵質(zhì)成熟度差異較大，極易造成受精后發(fā)育不同步，甚至不發(fā)育，這樣會嚴(yán)重影響孵化效果，造成仔魚因?yàn)槁腰S營養(yǎng)供應(yīng)不足而在變態(tài)過程中大量脫落，影響育苗生產(chǎn)成敗。

6.2 控制雌雄比例

為了保證精子的數(shù)量充足，提高卵子的受精率，雌、雄親魚配比一般以3∶1~4∶1為宜，少者也可3∶1搭配。嚴(yán)格按照一定的雌雄比例進(jìn)行擠卵、人工授精，以便達(dá)到同步受精，提高孵化效果和發(fā)育同步性。

6.3 保持原種性狀穩(wěn)定

首先由野生黃蓋鰈原種繁育苗種，苗種經(jīng)過中間培育成為后備親本，再選擇優(yōu)質(zhì)后備親本進(jìn)行強(qiáng)化培育，在室外保種池內(nèi)保種，每年繁殖季節(jié)繁育苗種，如此反復(fù)，最大限度保持了黃蓋鰈性狀穩(wěn)定性，確保了種質(zhì)不退化。

6.4 室內(nèi)越冬度夏

夏冬兩季要嚴(yán)密注意水溫的變化，避免水溫過高或過低，引起黃蓋蝶死亡。在水溫過高或過低時，一般采用深井水培育，水溫適宜且穩(wěn)定。雖然黃蓋蝶是一種廣溫性魚類，其適溫范圍在2~29℃（最適生長溫度在16~26℃），理論上可在圍堰池內(nèi)自然越冬，但是冬天正是性腺發(fā)育的關(guān)鍵時期，最好是移入室內(nèi)培育池進(jìn)行強(qiáng)化培育。