• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于16S rRNA基因分析蟲草寄主蝠蛾的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系

    2020-03-21 13:31:08彭樹英萬勝豪汪承巧韓蒙蒙汪雨晨耿雪俠張海軍
    關(guān)鍵詞:進(jìn)化樹冬蟲夏草蟲草

    彭樹英,李 俊,萬勝豪,汪 敏,汪 玲,汪承巧,韓蒙蒙,汪雨晨,耿雪俠,張海軍①

    (淮北師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,資源植物生物學(xué)安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽 淮北235000)

    0 引言

    冬蟲夏草(Ophiocordyceps sinensis)為麥角菌科(Clavicipitaceae)冬蟲夏草菌(Ophiocordyceps sinensis(Berk.)G.H.Sung et al.(Cordyceps sinensis Berk.))寄生在蝠蛾屬(Hepialus)昆蟲幼蟲上長(zhǎng)出的子座及幼蟲尸體所形成的蟲菌復(fù)合體[1~3]. 感染此種真菌的昆蟲幼蟲在冬天形成致密的菌核即“冬蟲”,至次年春末夏初之際蟲體頭部長(zhǎng)出子座破土而出,即“夏草”[1-3]. 冬蟲夏草是一種極為珍貴的中藥材,具有補(bǔ)肺益腎[4]、止咳化痰、調(diào)節(jié)免疫力[5]、降血糖降血脂[6-7]、抗腫瘤[8]、抗氧化[9]和抗衰老[10]等多種功效. 冬蟲夏草寄主昆蟲的地理分布雖較獨(dú)特,但有其特定規(guī)律,主要分布于青海、西藏、四川、云南和甘肅五省境內(nèi)海拔3 000 m以上的青藏高原高寒草甸區(qū)[11]. 冬蟲夏草菌主要寄主昆蟲為蝠蛾屬昆蟲,根據(jù)傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分析,中國(guó)境內(nèi)記錄的蝠蛾屬昆蟲累計(jì)達(dá)到六十多種,據(jù)推測(cè),未發(fā)現(xiàn)的種類可能會(huì)更多[12-13]. 1968年,Viette[14]以雄性生殖器抱器瓣底部明顯的突起為依據(jù),在蝙蝠蛾科下建立鉤蝠蛾屬(Thitarodes). 隨后,國(guó)外學(xué)者[15~17]將大部分蝠蛾種類歸于此屬. 由于昆蟲形態(tài)變化的可塑性及趨同進(jìn)化導(dǎo)致傳統(tǒng)分類法不夠準(zhǔn)確[18],而且對(duì)冬蟲夏草寄主的研究也多側(cè)重于形態(tài)特征、生物學(xué)特性分析,或蝠蛾屬昆蟲的種類和地理分布的研究[19~25],對(duì)我國(guó)不同產(chǎn)地冬蟲夏草寄主昆蟲之間的分子遺傳進(jìn)化關(guān)系的研究報(bào)道也較少,這將直接影響冬蟲夏草種質(zhì)資源的保護(hù)和有效利用[12].

    線粒體DNA(mtDNA)為雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀DNA,具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、無組織特異性、嚴(yán)格遵守母系遺傳、不易發(fā)生重組、進(jìn)化速率快等特點(diǎn)[11]. mtDNA是研究動(dòng)物遺傳多樣性和分子進(jìn)化的有效標(biāo)記,已廣泛用于昆蟲分類和分子系統(tǒng)學(xué)的研究. 一些學(xué)者嘗試將形態(tài)分類方法和分子生物學(xué)方法結(jié)合,以彌補(bǔ)傳統(tǒng)方法的不足. 陳永久等[26]曾利用線粒體細(xì)胞色素b 基因(Cytochrome b,Cyt b)序列首次分析5 種冬蟲夏草寄主蝠蛾的分子進(jìn)化關(guān)系. 程舟等[12]通過對(duì)冬蟲夏草寄主蝠蛾的線粒體Cyt b基因片段的序列分析,構(gòu)建分子系統(tǒng)樹,分析我國(guó)冬蟲夏草寄主蝠蛾種屬的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系和地域分布格局. 鄒志文等[13,18]以蝠蛾雄性生殖器抱器瓣結(jié)構(gòu)特征為依據(jù),修訂現(xiàn)行中國(guó)蝠蛾屬昆蟲分類系統(tǒng),將中國(guó)蝠蛾屬的62個(gè)種分別歸入擬蝠蛾屬(Parahepialus)、蝠蛾屬(Hepialus)、鉤蝠蛾屬(Thitarodes)及無鉤蝠蛾屬(Ahamus)等4個(gè)屬中,同時(shí)利用26 種原蝠蛾屬種類Cyt b基因片段構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,證明將蝠蛾雄性抱器瓣特征作為分屬依據(jù)是合理可信的. 陳抒云等[27]對(duì)冬蟲夏草和其它蟲草等物種的寄主昆蟲分別通過COⅠ基因和Cyt b 基因進(jìn)行條形碼分析,表明COⅠ序列更適用于蟲草寄主昆蟲的DNA 條形碼研究. 近幾年,一些學(xué)者為深入研究蟲草寄主蝠蛾的分子進(jìn)化及其分類,已相繼測(cè)定多條蟲草寄主蝠蛾mtDNA全基因組序列[11,18,28~31].

    作為分子標(biāo)記,研究動(dòng)物進(jìn)化的mtDNA應(yīng)用最多的是Cyt b,細(xì)胞色素氧化酶亞基Ⅰ(COⅠ),NADH脫氫酶亞基(ND4),12S rRNA基因,A+T富集區(qū),腺苷三磷酸酶(ATP6或ATP8)等[32]. 16S rRNA基因亦是線粒體基因組中研究較多的基因,既含有保守序列,又含有與進(jìn)化距離相適應(yīng)的可變序列,被稱為進(jìn)化分子鐘[32]. 16S rRNA基因用于評(píng)價(jià)生物的遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系的報(bào)道很多[33~38],但在冬蟲夏草寄主蝠蛾方面的研究尚未見報(bào)道. 本研究運(yùn)用線粒體16S rRNA基因序列對(duì)不同蟲草寄主蝠蛾的進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行分析,以期為進(jìn)一步的遺傳系統(tǒng)進(jìn)化分析、種質(zhì)鑒定和資源保護(hù)奠定理論依據(jù).

    1 材料和方法

    1.1 基因序列來源

    目前已登錄至GenBank的蝠蛾科線粒體基因組全序列共有11條記錄,其中7條為蟲草寄主蝠蛾(其中6種蝠蛾基因序列有兩個(gè)序列號(hào)),亞香棒蟲草寄主蝠蛾1條,其他蝠蛾3條(其中2種蝠蛾基因序列有兩個(gè)序列號(hào)),從GenBank中獲取并下載蝠蛾科、其他科蛾類及果蠅(外群)線粒體16S rRNA和COⅠ基因序列(表1).

    表1 本研究序列來源及信息

    表1(續(xù))

    1.2 數(shù)據(jù)處理和系統(tǒng)進(jìn)化分析

    將從NCBI 中獲取的序列保存為Fasta 格式,用ClustalX 2.1 軟件進(jìn)行序列對(duì)比. 然后將比對(duì)序列用MEGA 7.0軟件統(tǒng)計(jì)不同蝠蛾科16S rRNA基因序列間的簡(jiǎn)約位點(diǎn)、可變位點(diǎn)、保守位點(diǎn)以及種間遺傳間距,并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹. 用DAMBE軟件分析基因序列的堿基組成,并分析AT或GC偏斜性,計(jì)算公式為AT-skew=[A-T]/[A+T]和GC-skew=[G-C]/[G+C][39]. 本研究基于冬蟲夏草、亞香棒蟲草的寄主昆蟲(蝠蛾類)及其他蛾類的16S rRNA基因用NJ法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹. 為評(píng)估16S rRNA基因作為分類依據(jù)分子標(biāo)記的可靠性,同時(shí)用相同物種線粒體基因組序列的16S rRNA 聯(lián)合COⅠ基因構(gòu)建ML 系統(tǒng)進(jìn)化樹. 將系統(tǒng)進(jìn)化樹中bootstrap自檢值設(shè)置為1 000.

    2 結(jié)果

    2.1 序列堿基組成分析

    將16S rRNA 基因序列進(jìn)行對(duì)比排列后,長(zhǎng)度為1 411 bp,其中保守位點(diǎn)1 054個(gè),簡(jiǎn)約位點(diǎn)143個(gè),可變位點(diǎn)310個(gè). 通過計(jì)算可知,A、C、G、T堿基的平均含量分別為44.1%、5.3%、9.6%、40.0%. A+T的平均含量為85.0%,明顯高于G+C 含量(15%). 由表2 可知,AT 和GC 的偏斜度均為正值且小于1,最小ATSkew值為0.005(T.sylvina),最大AT-Skew值為0.045(A.yunnanensis),最小GC-Skew值為0.26(T.sp.),最大GC-Skew值為0.326(H.xiaojinensis),說明11種蝠蛾堿基組成對(duì)AT顯著偏移.

    表2 11種蝠蛾的16S rRNA基因堿基組成

    2.2 蝠蛾科11種蝠蛾的種間遺傳距離

    由表3可知,在11種蝠蛾中,種間遺傳距離范圍在0.005~0.117之間,人支蝠蛾(T.renzhiensis)與阿爾泰蝠蛾(T.sp.)和貢嘎蝠蛾(T.gonggaensis)的種間遺傳距離為最?。?.005),T.sylvina與蒲氏鉤蝠蛾(T.pui)間的遺傳距離是最大(0.117). 蟲草寄主蝠蛾間的遺傳距離為0.005~0.51.T.sylvina與其他蝠蛾的遺傳距離范圍在0.099~0.117,相比其他蝠蛾間的遺傳距離明顯偏大.

    表3 11種蝠蛾16S rRNA基因的遺傳距離

    2.3 系統(tǒng)進(jìn)化分析

    基于16S rRNA基因和COⅠ基因聯(lián)合16S rRNA基因構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹均明顯分為兩個(gè)大分支. 在NJ樹(如圖1)中第Ⅰ支由蝠蛾科昆蟲包括蟲草寄主蝠蛾及其他蝠蛾構(gòu)成. 在蟲草寄主蝠蛾中,人支蝠蛾(T.renzhiensis)與阿爾泰蝠蛾(T.sp.)聚為一支,與貢嘎蝠蛾(T.gonggaensis)及小金蝠蛾(H.xiaojinensis)聚成一簇,與色季拉山蝠蛾(T.sejilaensis)與蒲氏鉤蝠蛾(T.pui)聚成的一支構(gòu)成姊妹群. 云南蝠蛾(A.yunnanensis)位于此支系的基部(自展值100%). 7種蟲草寄主蝠蛾構(gòu)成一個(gè)獨(dú)立的大支系(自展值為100%),表明屬間親緣關(guān)系較近. 如蝠蛾屬的兩種蝠蛾(Endoclita signifer和Endoclita minanus)單獨(dú)聚類在一起,與湖南棒蝠蛾(N.hunanensis)和Triodia sylvina位于蟲草寄主蝠蛾類群的基部. 而在ML樹中(如圖2),蟲草寄主蝠蛾聚類與NJ樹中一致,但非蟲草寄主蝠蛾中N.hunanensis與T.sylvina單獨(dú)形成一個(gè)支系,E.signifer和E.minanus聚類形成另一個(gè)單獨(dú)支系. 兩種樹中第Ⅱ大支均由蠶蛾科、織蛾科、菜蛾科、卷蛾科、舉肢蛾科和麥蛾科蛾類構(gòu)成,NJ 樹中蠶蛾科的家蠶Bombyx mori與Bombyx huttoni聚類形成一支,然后與菜蛾(Plutella xylostella)和卷蛾(Spilonota lechriaspis)形成一支. 舉肢蛾科、織蛾科和麥蛾科聚類形成另一支.ML樹中的第Ⅱ大支稍有不同,蠶蛾科單獨(dú)聚類成一支,菜蛾(Plutella xylostella)和卷蛾(Spilonota lechriaspis)也聚類成一支,其余科的蛾類均單獨(dú)形成一支(如圖1和圖2).

    圖1 基于線粒體16S rRNA基因構(gòu)建的NJ樹

    圖2 基于16S+COⅠ基因構(gòu)建的ML樹

    3 討論

    16S rRNA基因之所以成為常用的線粒體分子標(biāo)記,主要原因有如下幾點(diǎn):一是該基因存在于所有昆蟲的體內(nèi);二是16S rRNA 基因的保守性和特異性比較高[37];三是該基因序列較長(zhǎng),約含有50 個(gè)功能域[37]. COⅠ基因在線粒體DNA中分布普遍,具有多態(tài)性較高、基因進(jìn)化速率適中、適于通用引物擴(kuò)增等特點(diǎn),是昆蟲分子系統(tǒng)學(xué)研究中較為理想的分子標(biāo)記,該基因近年來在昆蟲的群體遺傳結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)進(jìn)化方面有較多的研究[40]. 因此,在本研究中同時(shí)用蟲草寄主蝠蛾16S rRNA基因聯(lián)合COⅠ全基因構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,以驗(yàn)證16S rRNA構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹的可靠性和有效性.

    通過對(duì)蝠蛾科蝠蛾線粒體16S rRNA 基因序列進(jìn)行分析,結(jié)果表明:序列中A+T 的平均含量為85.0%,G+C的平均含量為15.0%,堿基組成對(duì)A+T表現(xiàn)為顯著的偏移. 種間的最小遺傳距離為0.005(T.renzhiensis與T.sp.,T.renzhiensis與T.gonggaensis),說明三者的親緣關(guān)系較其他蛾類更近. 將蟲草寄主蝠蛾、其他蝠蛾及其他科蛾類的16S rRNA 基因全序列約1 400 bp個(gè)堿基作為系統(tǒng)進(jìn)化樹的分析位點(diǎn). NJ系統(tǒng)樹明顯分為2大支(圖1所示):第Ⅰ支由蝠蛾科昆蟲包括蟲草寄主蝠蛾及其他蝠蛾,7種蟲草寄主蝠蛾最先聚為一支,其中人支蝠蛾(T.renzhiensis)、阿爾泰蝠蛾(T.sp.)與貢嘎蝠蛾(T.gonggaensis)同屬鉤蝠蛾屬聚為一簇(種間遺傳距離最?。〗痱鸲辏℉.xiaojinensis)與3種鉤蝠蛾屬蝠蛾形成一個(gè)支系,說明小金蝠蛾(H.xiaojinensis)應(yīng)為鉤蝠蛾屬,這一結(jié)果印證并支持Kang[11]等的研究結(jié)論. 這一支系與色季拉山蝠蛾(T.sejilaensis)和蒲氏鉤蝠蛾(T.pui)形成的聚類簇互為姊妹群,而云南蝠蛾(A.yunnanensis)屬無鉤蝠蛾屬,獨(dú)立成一支. 以上結(jié)果與相關(guān)研究報(bào)道[11,18,29]所得結(jié)論一致. 同時(shí)發(fā)現(xiàn),蟲草寄主蝠蛾分布地域較近的也更趨于歸為一類,如蒲氏鉤蝠蛾(T.pui)和貢嘎蝠蛾(T.gonggaensis)均分布于西藏林芝地區(qū). 湖南棒蝠蛾(N.hunanensis)是亞香棒蟲草的寄主昆蟲,并不是冬蟲夏草的寄主昆蟲,但兩種蟲草形態(tài)卻極為相似,說明兩種蟲草寄主蝠蛾可能具有較近的親緣關(guān)系. 進(jìn)化樹分析結(jié)果亦表明,在非蟲草寄主蝠蛾中湖南棒蝠蛾(N.hunanensis)的確是與所有冬蟲夏草寄主蝠蛾關(guān)系較近的一支,而其他蝠蛾與蟲草寄主蝠蛾關(guān)系明顯稍遠(yuǎn)一些. 本研究分析蟲草寄主蝠蛾間的進(jìn)化關(guān)系而得出的結(jié)論與Zou等[18]和Kang等[11]的觀點(diǎn)基本一致. 本研究同時(shí)也用來源于相同物種線粒體基因組的COⅠ基因聯(lián)合16S rRNA構(gòu)建ML進(jìn)化樹(圖2所示),與單獨(dú)用16S rRNA基因構(gòu)建的進(jìn)化樹結(jié)果相符,在一定程度上支持鄒志文等[13]提出形態(tài)學(xué)分類的觀點(diǎn),即將蝠蛾屬以雄性生殖器抱器瓣結(jié)構(gòu)特征為依據(jù)分為4個(gè)屬的合理性. 這也說明16S rRNA基因可以進(jìn)行科屬級(jí)分類,作為系統(tǒng)進(jìn)化分析和分類的標(biāo)記基因是有效且可信的.

    本研究中樣本數(shù)有所欠缺,分布區(qū)域不均,因此今后研究過程中為更全面具體地進(jìn)行系統(tǒng)分類,還需要增加種群數(shù)量并結(jié)合其他分析技術(shù)手段,從而為蟲草寄主昆蟲的系統(tǒng)進(jìn)化研究提供更全面的科學(xué)依據(jù),同時(shí)為藥用蟲草資源的保護(hù)和利用奠定理論依據(jù).

    猜你喜歡
    進(jìn)化樹冬蟲夏草蟲草
    蟲草素提取物在抗癌治療中顯示出巨大希望
    中老年保健(2022年2期)2022-08-24 03:20:44
    蟲草素提取物在抗癌治療中顯示出巨大希望
    基于心理旋轉(zhuǎn)的小學(xué)生物進(jìn)化樹教學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
    常見的進(jìn)化樹錯(cuò)誤概念及其辨析*
    “冬蟲夏草”是怎樣形成的?
    軍事文摘(2020年22期)2021-01-04 02:16:52
    艾草白粉病的病原菌鑒定
    神奇的冬蟲夏草
    蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
    層次聚類在進(jìn)化樹構(gòu)建中的應(yīng)用
    冬蟲夏草的經(jīng)濟(jì)學(xué)
    a级毛色黄片| 国国产精品蜜臀av免费| 欧美三级亚洲精品| 校园春色视频在线观看| 日韩av在线大香蕉| 日韩精品有码人妻一区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 麻豆国产av国片精品| 乱人视频在线观看| eeuss影院久久| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 天堂网av新在线| 亚洲最大成人手机在线| 午夜福利18| 亚洲经典国产精华液单| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 一进一出好大好爽视频| 免费观看在线日韩| 亚洲中文日韩欧美视频| 欧美成人精品欧美一级黄| 欧美成人一区二区免费高清观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久精品国产自在天天线| 成人毛片a级毛片在线播放| 黄色配什么色好看| 国产色婷婷99| 级片在线观看| 99久国产av精品| 日本欧美国产在线视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久人人爽人人爽人人片va| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日本黄大片高清| 国产免费男女视频| 国产色婷婷99| 午夜福利成人在线免费观看| 禁无遮挡网站| 毛片一级片免费看久久久久| 精品久久久久久久久av| 国产不卡一卡二| 亚洲真实伦在线观看| 国产成人精品久久久久久| 国产探花极品一区二区| 老女人水多毛片| 精品午夜福利视频在线观看一区| 麻豆成人午夜福利视频| 男女视频在线观看网站免费| 综合色丁香网| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 网址你懂的国产日韩在线| 免费观看精品视频网站| 一本久久中文字幕| 久久久精品94久久精品| 九九在线视频观看精品| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产亚洲91精品色在线| av中文乱码字幕在线| 久久精品91蜜桃| 特级一级黄色大片| 赤兔流量卡办理| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产成人aa在线观看| 中国美女看黄片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 天堂动漫精品| 亚洲熟妇熟女久久| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲成人久久性| 亚洲国产精品合色在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产乱人偷精品视频| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美色视频一区免费| 久久综合国产亚洲精品| 久久精品影院6| 免费高清视频大片| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成人国产麻豆网| 久久国产乱子免费精品| 全区人妻精品视频| .国产精品久久| 黄色日韩在线| 亚洲av五月六月丁香网| 国产成人freesex在线 | 亚洲精品成人久久久久久| 在线观看av片永久免费下载| 国产高清不卡午夜福利| 少妇高潮的动态图| 国产精品不卡视频一区二区| 国产激情偷乱视频一区二区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲在线观看片| 校园春色视频在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产精品一区www在线观看| 午夜激情福利司机影院| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美激情在线99| а√天堂www在线а√下载| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 香蕉av资源在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| avwww免费| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲综合色惰| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 色在线成人网| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲电影在线观看av| 国语自产精品视频在线第100页| 十八禁国产超污无遮挡网站| 午夜福利成人在线免费观看| 校园春色视频在线观看| 久久99热6这里只有精品| 最近的中文字幕免费完整| 免费观看的影片在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 嫩草影院入口| 成人漫画全彩无遮挡| 俄罗斯特黄特色一大片| 色综合站精品国产| 黄色视频,在线免费观看| 欧美成人a在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 插阴视频在线观看视频| 亚洲精品国产av成人精品 | 伦精品一区二区三区| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲性久久影院| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 中文字幕久久专区| 一本精品99久久精品77| 欧美+日韩+精品| 亚洲成av人片在线播放无| 麻豆一二三区av精品| 国产精品99久久久久久久久| 婷婷亚洲欧美| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲专区国产一区二区| 在线a可以看的网站| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 永久网站在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 91av网一区二区| 亚洲综合色惰| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 可以在线观看的亚洲视频| 久久午夜福利片| 毛片一级片免费看久久久久| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲欧美精品综合久久99| 青春草视频在线免费观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产精品野战在线观看| 国产精品野战在线观看| 国产欧美日韩精品一区二区| av在线亚洲专区| 尾随美女入室| 少妇高潮的动态图| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲专区国产一区二区| 在线观看66精品国产| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国产精品福利在线免费观看| eeuss影院久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产高清视频在线观看网站| av在线天堂中文字幕| 欧美zozozo另类| 日韩 亚洲 欧美在线| 在线看三级毛片| 99热这里只有是精品在线观看| 色av中文字幕| 国产在线精品亚洲第一网站| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 久久热精品热| 成人毛片a级毛片在线播放| 中文亚洲av片在线观看爽| 国内精品一区二区在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产色爽女视频免费观看| 欧美+日韩+精品| 插逼视频在线观看| 嫩草影视91久久| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品一区二区三区四区久久| 久久久精品94久久精品| 中国国产av一级| 国产精品久久视频播放| 老司机影院成人| aaaaa片日本免费| 亚洲第一电影网av| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产伦一二天堂av在线观看| 免费av不卡在线播放| 国产爱豆传媒在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 看非洲黑人一级黄片| 天堂动漫精品| 免费看美女性在线毛片视频| 春色校园在线视频观看| 国产视频内射| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 黄色配什么色好看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 亚洲久久久久久中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 成年版毛片免费区| 欧美又色又爽又黄视频| 日韩制服骚丝袜av| 九九热线精品视视频播放| 欧美成人a在线观看| 国产真实乱freesex| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 黄色一级大片看看| 国产精品一区二区性色av| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 日日撸夜夜添| 色哟哟·www| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 一本久久中文字幕| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产色爽女视频免费观看| 久99久视频精品免费| av视频在线观看入口| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久精品人妻少妇| 亚洲成人av在线免费| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产在视频线在精品| 国产单亲对白刺激| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲七黄色美女视频| 日韩强制内射视频| 国产精品av视频在线免费观看| 91久久精品电影网| 成年版毛片免费区| 人人妻人人看人人澡| 日本一本二区三区精品| aaaaa片日本免费| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 日韩亚洲欧美综合| 色av中文字幕| 午夜视频国产福利| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 色噜噜av男人的天堂激情| 中国国产av一级| 午夜福利在线观看吧| 一进一出抽搐动态| 日本三级黄在线观看| 日韩成人伦理影院| 全区人妻精品视频| 美女大奶头视频| 色哟哟·www| 午夜福利在线观看吧| 麻豆av噜噜一区二区三区| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲,欧美,日韩| 1000部很黄的大片| 草草在线视频免费看| 露出奶头的视频| 一级毛片我不卡| 如何舔出高潮| 国产欧美日韩精品一区二区| av福利片在线观看| 搡老岳熟女国产| 一级毛片电影观看 | 久久精品夜色国产| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲无线观看免费| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品色激情综合| 99国产精品一区二区蜜桃av| 在线免费观看不下载黄p国产| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美人与善性xxx| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 最新中文字幕久久久久| 我要搜黄色片| 国产人妻一区二区三区在| 日本三级黄在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲欧美日韩高清专用| av在线老鸭窝| 一级黄色大片毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 91久久精品国产一区二区三区| 成人av在线播放网站| 亚洲在线观看片| 小说图片视频综合网站| 久久人人精品亚洲av| 欧美性感艳星| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 麻豆一二三区av精品| 亚洲成人久久性| 亚洲av美国av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美成人精品欧美一级黄| 尾随美女入室| 亚洲av中文av极速乱| 99久久精品热视频| 免费av毛片视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 97超视频在线观看视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久久久国产a免费观看| 激情 狠狠 欧美| 免费看美女性在线毛片视频| 一个人免费在线观看电影| 夜夜爽天天搞| 禁无遮挡网站| 国产真实乱freesex| 最近的中文字幕免费完整| 麻豆av噜噜一区二区三区| 精品日产1卡2卡| 久久久久久久久久久丰满| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 99久久精品一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 91午夜精品亚洲一区二区三区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 午夜福利成人在线免费观看| 天堂影院成人在线观看| 日本爱情动作片www.在线观看 | 丰满人妻一区二区三区视频av| 一进一出好大好爽视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久久久国产网址| 在线观看一区二区三区| 亚洲高清免费不卡视频| 校园春色视频在线观看| 久久久久国产网址| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 亚洲欧美日韩东京热| 大型黄色视频在线免费观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 色视频www国产| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲av一区综合| 特大巨黑吊av在线直播| 国语自产精品视频在线第100页| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 插阴视频在线观看视频| 国产乱人偷精品视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 男女边吃奶边做爰视频| 午夜爱爱视频在线播放| 国产激情偷乱视频一区二区| 日韩一本色道免费dvd| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 午夜激情欧美在线| 内射极品少妇av片p| 国产 一区精品| 亚洲国产精品成人综合色| 国产91av在线免费观看| 九九在线视频观看精品| 我的女老师完整版在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产精品电影一区二区三区| av中文乱码字幕在线| 天美传媒精品一区二区| 在线播放国产精品三级| 亚洲专区国产一区二区| 久久精品国产清高在天天线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产片特级美女逼逼视频| 国产在线男女| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲欧美清纯卡通| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产男靠女视频免费网站| 99国产精品一区二区蜜桃av| 丝袜喷水一区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 午夜亚洲福利在线播放| 女人被狂操c到高潮| 看十八女毛片水多多多| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲成人久久爱视频| 国产探花极品一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久精品国产亚洲网站| 国产伦一二天堂av在线观看| eeuss影院久久| 亚洲四区av| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产 一区精品| 一级毛片我不卡| 国产精品野战在线观看| 91av网一区二区| 俺也久久电影网| 国产精品不卡视频一区二区| 在线观看一区二区三区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 成人精品一区二区免费| 国产真实伦视频高清在线观看| 一夜夜www| 在线播放国产精品三级| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲av一区综合| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲电影在线观看av| 97在线视频观看| 久久草成人影院| 日本黄色视频三级网站网址| 国国产精品蜜臀av免费| 女人被狂操c到高潮| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 免费高清视频大片| 亚洲成人久久爱视频| 白带黄色成豆腐渣| 久久精品综合一区二区三区| 校园春色视频在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美性感艳星| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 91久久精品电影网| 天美传媒精品一区二区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产爱豆传媒在线观看| 一区二区三区四区激情视频 | 亚洲av电影不卡..在线观看| 在线天堂最新版资源| 亚洲无线在线观看| 91av网一区二区| 哪里可以看免费的av片| 一级黄片播放器| 99久久九九国产精品国产免费| 我的女老师完整版在线观看| 国产成人aa在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产在视频线在精品| 欧美又色又爽又黄视频| videossex国产| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲精品一区av在线观看| 欧美成人a在线观看| 伦精品一区二区三区| 欧美精品国产亚洲| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 身体一侧抽搐| 免费人成视频x8x8入口观看| 网址你懂的国产日韩在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久久国内精品自在自线图片| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品一及| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 久久久久久九九精品二区国产| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 韩国av在线不卡| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产精品,欧美在线| 秋霞在线观看毛片| 国产精品久久久久久久电影| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 免费av毛片视频| 成人二区视频| 国产高潮美女av| 日韩欧美精品免费久久| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩三级伦理在线观看| 国产精品伦人一区二区| 老熟妇仑乱视频hdxx| 插阴视频在线观看视频| 亚洲无线观看免费| 99在线人妻在线中文字幕| 人妻久久中文字幕网| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲四区av| 三级经典国产精品| 成人漫画全彩无遮挡| 黄色欧美视频在线观看| 热99在线观看视频| 免费看av在线观看网站| 一进一出抽搐gif免费好疼| 午夜福利在线观看吧| 免费看光身美女| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲av成人精品一区久久| 99久久精品热视频| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲经典国产精华液单| 最近中文字幕高清免费大全6| 97超碰精品成人国产| АⅤ资源中文在线天堂| 级片在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 秋霞在线观看毛片| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美成人a在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 欧美一区二区国产精品久久精品| av在线老鸭窝| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲美女黄片视频| 国产真实乱freesex| 日本黄色视频三级网站网址| 在线观看午夜福利视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲性夜色夜夜综合| 99久久精品一区二区三区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久午夜福利片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久久久久久午夜电影| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲乱码一区二区免费版| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产乱人视频| 久久久国产成人免费| 在线观看免费视频日本深夜| 色播亚洲综合网| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 中文字幕久久专区| 美女黄网站色视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| www.色视频.com| 欧美国产日韩亚洲一区| 精品人妻视频免费看| a级毛色黄片| av中文乱码字幕在线| 久久精品夜色国产| 成人毛片a级毛片在线播放| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲中文字幕日韩| 日韩欧美精品免费久久| 白带黄色成豆腐渣| 夜夜爽天天搞| 黄色配什么色好看| 搡老妇女老女人老熟妇| 中国美白少妇内射xxxbb| 一级毛片电影观看 | av在线蜜桃| 俺也久久电影网| 成人特级黄色片久久久久久久| 成人无遮挡网站| 国产精品1区2区在线观看.| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 校园人妻丝袜中文字幕| 国产午夜精品论理片| 亚洲av熟女| 成年av动漫网址| 日韩精品有码人妻一区| 校园春色视频在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产真实乱freesex| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久久色成人| 国产高潮美女av| 亚洲成人久久爱视频| 国产爱豆传媒在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 22中文网久久字幕| 亚洲最大成人手机在线| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲最大成人手机在线| 我的老师免费观看完整版| 精品人妻熟女av久视频| 日韩人妻高清精品专区| 99热全是精品| 免费看a级黄色片| 国产单亲对白刺激| 国产不卡一卡二| 亚洲人成网站在线播| 久久久久久伊人网av| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 69av精品久久久久久| 网址你懂的国产日韩在线| 在线观看午夜福利视频| 免费观看在线日韩| 麻豆国产av国片精品| 中文字幕av成人在线电影| 秋霞在线观看毛片| 欧美日本亚洲视频在线播放| 男人狂女人下面高潮的视频| avwww免费| 天堂影院成人在线观看| 波多野结衣高清作品| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o|