共刺激分子B7-H3 在過敏性紫癜中的表達及臨床意義

張志玲 邱彩玲 陳祥云 潘忠泉 余路新

過敏性紫癜(henoch-Schonlein syndrome,HSP)是一種由免疫復合物介導的全身性小血管炎,可能與各種抗原刺激易感個體而產(chǎn)生的免疫反應(yīng),多發(fā)于兒童,其特征為非血小板減少性的皮膚紫癜,常伴有腹痛、關(guān)節(jié)痛和腎損害［1］。目前關(guān)于過敏性紫癜的病因和發(fā)病機制尚未明確,也缺乏特異性的診斷指標。過敏性紫癜的診斷和治療均存在較大困難。近年來的研究表明,共刺激分子B7-H3 作為B7 家族新發(fā)現(xiàn)的成員之一,具有正性和負性雙重免疫調(diào)節(jié)作用以及非免疫調(diào)控功能［2］,但B7-H3 分子是否與過敏性紫癜有相關(guān)性及其在其中的具體作用目前未見報道。本研究通過檢測過敏性紫癜患者血漿可溶性B7-H3 分子的濃度,以探討其能否成為臨床診斷過敏性紫癜的有效指標,旨在為臨床過敏性紫癜患者提供診斷依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年5 月～2018 年10 月本院收治的50 例過敏性紫癜患者作為觀察組,選取同期本院25 例體檢的健康成人和兒童作為對照組。觀察組男33 例,女17 例；兒童34 例,成人16 例。對照組男16 例,女9 例。兩組一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。過敏性紫癜患者均有雙下肢紫癜樣皮疹,均進行血、尿、糞常規(guī)檢查,部分患兒進行血沉、C 反應(yīng)蛋白(CRP)、抗鏈球菌溶血素“O”(ASO)、腎早期損傷指標、免疫球蛋白及補體相關(guān)檢查；所有患者均符合過敏性紫癜診斷標準［3］。過敏性紫癜患者根據(jù)臨床特點分為單純皮膚型、腹型、關(guān)節(jié)型、腎型、混合型；臨床表現(xiàn)單純皮膚型16 例,腹型11 例,關(guān)節(jié)型10 例,腎型7 例,混合型6 例。所有患兒入選標準均符合《諸福棠實用兒科學》第8 版過敏性紫癜的診斷標準。過敏性紫癜的診斷標準：①皮膚紫癜；②急性彌漫性腹痛；③組織學檢查以免疫球蛋白A(IgA)免疫復合物沉積為主的白細胞碎裂性血管炎；④關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛；⑤腎臟受累。上述標準中①為必要條件,加上②～⑤中的至少1 條者診斷為過敏性紫癜。

1.2 方法 所有研究對象于門診就診或入院后分別抽取靜脈血1.5 ml,血標本注入加有EDTA 及抑肽酶的塑料試管中,搖勻,靜置30～60 min,低溫離心(-4℃,4000 r/min,10 min),分離血漿后置于-70℃冰箱中保存待測,去除溶血標本,送檢標本均僅編號,不注明其他信息,血清B7-H3 的可溶性形式sB7-H3 分子應(yīng)用ELISA 法一次性檢測,檢測由專人負責,操作嚴格按照使用說明書；所有研究對象均于門診就診或入院后第1 天進行周圍血象、尿常規(guī)、大便隱血、血沉、抗核抗體及類風濕因子等檢測。

1.3 觀察指標 比較兩組血漿B7-H3 分子水平。比較觀察組兒童和成人的B7-H3 分子水平。分析過敏性紫癜患者血清B7-H3 水平變化的多因素。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS25.0 統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗；多因素分析采用多元線性回歸分析。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血漿B7-H3 分子水平比較 觀察組血漿B7-H3 分子水平分別為(429.99±230.07)pg/ml,高于對照組的(36.00±14.68)pg/ml,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 觀察組兒童和成人的B7-H3 分子水平比較 觀察組兒童B7-H3 分子水平與成人比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表2。

2.3 過敏性紫癜患者血清B7-H3 水平變化的多因素分析 采用逐步引入-剔除法(Stepwise)分析,血清B7-H3 水平與年齡、性別、分型等因素無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。見表3。

表1 兩組血漿B7-H3 分子水平比較(±s,pg/ml)

表1 兩組血漿B7-H3 分子水平比較(±s,pg/ml)

注：與對照組比較,aP＜0.05

表2 觀察組兒童和成人的B7-H3 分子水平比較(±s,pg/ml)

表2 觀察組兒童和成人的B7-H3 分子水平比較(±s,pg/ml)

注：兩組比較,aP＞0.05

表3 過敏性紫癜患者血清B7-H3 水平變化的多因素分析

3 討論

過敏性紫癜是兒童時期常見的血管炎之一。以非血小板減少性紫癜、關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛、腹痛、胃腸道出血及腎炎為主要表現(xiàn)［3］。過敏性紫癜患者的發(fā)病原因可能與感染、藥物或食物過敏、被昆蟲叮咬、疫苗接種等［4］因素相關(guān),病理學上表現(xiàn)為變態(tài)反應(yīng)性血管炎,血管通透性增高,滲出增多,鄰近組織水腫、出血從而引起臨床癥狀［5］。

目前關(guān)于過敏性紫癜尚缺乏統(tǒng)一和特異性診斷標準,在臨床診治過程中,根據(jù)病史,具備可觸性紫癜伴彌漫性腹痛、關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛、腎臟受損表現(xiàn)、任何部位活檢免疫球蛋白A(IgA)沉積四項任何之一者都可以診斷。但在皮疹出現(xiàn)之前的非典型病例,表現(xiàn)為乏力、食欲減退、頭痛、腹痛等非特異性表現(xiàn)時臨床容易誤診,本病并發(fā)癥多,復發(fā)率高,若不能及早診斷、及早治療將會導致嚴重的后果,因此探討過敏性紫癜發(fā)生的機制尤為重要［6,7］。

B7-H3 作為B7 家族新發(fā)現(xiàn)的成員之一,有研究在2001 年于樹突狀細胞(DC)中發(fā)現(xiàn),其廣泛表達于活化的T 細胞、B 細胞、單核細胞、DC 細胞以及一些腫瘤細胞上［8］。作為機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,B7/CD28 是重要的一對協(xié)同刺激分子。B7 家族的成員作為配體,在抗原特異性T細胞介導的免疫應(yīng)答中發(fā)揮了關(guān)鍵的調(diào)控作用［9］。

本研究結(jié)果顯示,觀察組血漿B7-H3 分子水平高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。觀察組兒童B7-H3 分子水平與成人比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。因此無論是兒童還是成人,當患有過敏性紫癜時血清sB7-H3 水平的表達均明顯升高,提示共刺激分子sB7-H3 可能參與了過敏性紫癜的發(fā)病。既往研究證實,膜型B7-H3 在炎癥狀態(tài)下異常高表達,隨后實驗也發(fā)現(xiàn)sB7-H3 在膿毒癥患者體內(nèi)水平顯著增高［10］。本研究結(jié)果顯示,過敏性紫癜患者外周血sB7-H3 分子表達水平顯著升高,因此認為可溶性B7-H3 分子可能是重要的炎癥指標。但過敏性紫癜患兒血漿sB7-H3水平升高的確切機制尚不十分清楚,提示有關(guān)研究仍有待進一步深入。本次研究結(jié)果還顯示,血清B7-H3水平與年齡、性別、分型等因素無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。表明血清sB7-H3 的升高與過敏性紫癜的疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān),而與發(fā)病的不同年齡、不同性別、臨床表現(xiàn)的不同無關(guān)。

綜上所述,正常人血清也有sB7-H3 分子表達,但過敏性紫癜患者血清sB7-H3 分子表達水平顯著升高,表明sB7-H3 分子的檢測有助于判斷過敏性紫癜,可作為早期診斷、早期干預、判斷預后的參考指標。目前關(guān)于過敏性紫癜的各項診斷標準均具有一定的局限性,本研究對過敏性紫癜患兒sB7-H3 分子的變化進行了初步研究,但還需要進一步加大樣本量進行深入研究。