PCR技術(shù)在乙型肝炎檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果分析

郝艷霞　白紅艷

【摘 要】目的：分析PCR技術(shù)于乙型肝炎患者檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值。方法：運(yùn)用隨機(jī)數(shù)字表法分組，將我院2018年4月～2019年4月區(qū)間擷取120例乙型肝炎患者，將全部乙型肝炎患者均分為了試驗(yàn)組及參照組。試驗(yàn)組應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)PCR技術(shù)檢驗(yàn)，參照組使用化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)，對(duì)比兩組患者診斷效果的差異性。結(jié)果：試驗(yàn)組的診斷準(zhǔn)確率>參照組的診斷準(zhǔn)確率，組間比較有顯著差異性，P<0.05。結(jié)論：乙型肝炎檢驗(yàn)中PCR技術(shù)的應(yīng)用，有助于提高患者的診斷準(zhǔn)確率，為更好的編制患者臨床治療方案奠定基礎(chǔ)，建議在臨床方面予以應(yīng)用、推廣。

【關(guān)鍵詞】PCR技術(shù);乙型肝炎;檢驗(yàn)效果

【中圖分類號(hào)】R51【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2020）02-03--01

乙型肝炎，為經(jīng)乙型肝炎病毒所致的以肝臟病變?yōu)橹鞯膫魅拘约膊　ＥR床表現(xiàn)：食欲下降、惡心嘔吐、上腹不適、肝區(qū)疼痛、乏力等[1]。這一疾病屬于全世界范圍的嚴(yán)重傳染病，部分患者因慢性感染進(jìn)展為肝硬化、肝癌，所以及早進(jìn)行臨床診斷非常必要，以此在確診后制定針對(duì)性方案實(shí)行治療，有效改善乙型肝炎患者的預(yù)后。本次研究將我院2018年4月～2019年4月擷取的乙型肝炎患者為主，主要分析采取PCR技術(shù)、化學(xué)發(fā)光法，分別于乙型肝炎檢驗(yàn)中應(yīng)用的臨床價(jià)值。

1 臨床一般資料、方法

1.1 臨床一般資料

通過隨機(jī)數(shù)字表法實(shí)行分組，將我院2018年4月～2019年4月擷取的120例乙型肝炎患者，分為試驗(yàn)組（n=60）、參照組（n=60）。試驗(yàn)組男性人數(shù)、女性人數(shù)分別為：33例、27例;年齡在35～42歲的范圍，中位年齡（38.5±2.4）歲。參照組男性人數(shù)為35例，女性人數(shù)為25例;年齡在35～41歲的范圍，中位年齡（38.1±2.2）歲。而兩組乙型肝炎病例上述臨床一般資料實(shí)行比較處理，沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果有意義有對(duì)比差異，P>0.05。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①疑似乙型肝炎;②自愿參與到本次研究;③簽署知情協(xié)議。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①精神障礙;②感覺功能障礙;③意識(shí)障礙;④并發(fā)免疫功能疾病;⑤癌癥。

1.2 方法

兩組患者均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)，采集靜脈血液標(biāo)本3ml，實(shí)行離心處理后獲取血清，放置在冰箱（-20°C）中保存、備用。

1.2.1 參照組患者通過化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢驗(yàn)，選擇化學(xué)發(fā)光儀及試劑檢驗(yàn)，遵循說明書操作。

1.2.2 試驗(yàn)組患者采取PCR技術(shù)檢驗(yàn)， 選擇乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按試劑說明書操作，熒光定量PCR擴(kuò)增、分析結(jié)果，均通過ABI 7500PCR設(shè)備完成。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組患者的診斷準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析

本研究數(shù)據(jù)均借助統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS25.0的作用分析與處理，計(jì)數(shù)資料率%、兩組患者診斷準(zhǔn)確率的比較，運(yùn)用X?檢驗(yàn);對(duì)比數(shù)據(jù)結(jié)果P<0.05，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗(yàn)組與參照組患者診斷準(zhǔn)確率進(jìn)行比較，統(tǒng)計(jì)結(jié)果有差異性，P<0.05

3 討論

乙型肝炎的診斷方法較多，通過化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)?zāi)苡陔姌O表面通過電化學(xué)產(chǎn)生的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。然后，借助化學(xué)發(fā)光劑的作用作以標(biāo)記處理，使用抗原、抗體反應(yīng)、磁珠分離技術(shù)等，將發(fā)光劑于電極上發(fā)出光強(qiáng)度定量/定性檢測(cè)抗原/抗體[2]。經(jīng)過臨床實(shí)踐可見，這一方法實(shí)行乙型肝炎檢驗(yàn)存在一定的假陰性可能性，會(huì)對(duì)乙型肝炎檢驗(yàn)患者的診斷結(jié)果準(zhǔn)確度造成不同程度影響，無法確保診斷結(jié)果的可信度[3]。針對(duì)于此，本次研究采用了PCR技術(shù)檢驗(yàn)，該診斷方法也可以叫作體外基因擴(kuò)增技術(shù)，為分子生物學(xué)領(lǐng)域中的產(chǎn)物，在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)不同的學(xué)科中應(yīng)用，均可獲得較好的臨床效果，可直接反應(yīng)出DNA復(fù)制水平，防止發(fā)生假陰性情況。值得一提的是，PCR技術(shù)作用原理為天然復(fù)制DNA過程，構(gòu)成部分為變性、負(fù)性、延伸，這時(shí)模板DNA能夠經(jīng)加熱溫度保持一段時(shí)間后，促使PCR技術(shù)擴(kuò)增形成雙鏈/模板DNA雙鏈DNA，進(jìn)行解離而形成單鏈[4]。溫度<55°C時(shí)，模板DNA單鏈互補(bǔ)序列可與引物配對(duì)結(jié)合。在聚合酶條件下，有助于將DNA模板、引物復(fù)合物能dNTP，當(dāng)作反應(yīng)原料;將靶序列當(dāng)作模板，結(jié)合剪輯配對(duì)、半保留復(fù)制的原理，合成形成模板DNA鏈半保留復(fù)制鏈。循環(huán)進(jìn)行變性、負(fù)性、延伸的過程，從而可獲得半保留復(fù)制鏈。乙型肝炎患者康復(fù)的過程，乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)錄反應(yīng)能力下降，血清中的乙肝表面抗原水平會(huì)隨之改變，而產(chǎn)生假陰的狀況[5]。如此一來，必然會(huì)增加乙型肝炎檢驗(yàn)的漏誤診發(fā)生率，對(duì)患者檢驗(yàn)結(jié)果真實(shí)性、準(zhǔn)確性構(gòu)成不良影響。借助PCR技術(shù)的作用，可經(jīng)熒光標(biāo)記乙型肝炎病毒，檢驗(yàn)乙型肝炎病毒DNA轉(zhuǎn)錄情況，故此不易于受到DNA復(fù)制水平因素影響，而且可以切實(shí)減少血清中抗體假陰性情況的發(fā)生率，并且確保乙型肝炎檢驗(yàn)的準(zhǔn)確，為患者的臨床治療提供數(shù)據(jù)支持。本次研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組診斷準(zhǔn)確率>參照組診斷準(zhǔn)確率，組間比較差異性存在，P<0.05。由此表示，采用PCR技術(shù)檢驗(yàn)乙型肝炎患者，較采取化學(xué)發(fā)光法檢驗(yàn)的效果更加理想，主要表現(xiàn)在PCR技術(shù)檢驗(yàn)診斷準(zhǔn)確率更高的方面。

綜上所述，PCR技術(shù)于乙型肝炎檢驗(yàn)中運(yùn)用，可以提高診斷的準(zhǔn)確率，減少漏誤診情況的發(fā)生，在患者確診后為臨床醫(yī)師制定治療方案提供數(shù)據(jù)支持，故而建議在乙型肝炎檢驗(yàn)中應(yīng)用及推廣。

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