冠心病患者PCI術(shù)前血清LOX-1、Vaspin水平變化及其對病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的預測效能

李名鵬，王仲華，鐘丹丹，崔曉瑞

1郴州市第一人民醫(yī)院，湖南郴州 423000；2湘南學院附屬醫(yī)院

冠心病是臨床常見的心血管綜合征，是指冠狀動脈發(fā)生粥樣硬化而使血管腔狹窄甚至阻塞，引起心肌缺血、缺氧甚至壞死所致的疾病[1]。經(jīng)皮冠狀動脈介入(PCI)經(jīng)外周動脈開通閉塞的血管后植入支架，可有效增加管腔直徑，恢復血運重建，但是研究[2,3]顯示，PCI術(shù)后擴張部位血管再狹窄發(fā)生風險高，給患者預后帶來嚴重影響。冠狀動脈造影和血管內(nèi)成像是診斷病變冠狀動脈再狹窄的“金標準”，雖可改善患者病情，但二次手術(shù)給患者及家庭帶來巨大的疾病負擔，同時也延誤了治療最佳時機[4]。尋找簡便、快速、有效的生化指標早期預測冠心病患者PCI病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄發(fā)生風險，對輔助臨床制定針對性干預方案降低病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄，改善預后具有重要價值。血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)參與調(diào)控了氧化型低密度脂蛋白對內(nèi)皮細胞的損害過程，研究[5]顯示，LOX-1通過誘使動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定、破裂甚至脫落而介導冠心病發(fā)病。脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)是新近發(fā)現(xiàn)的由白色脂肪組織合成并分泌的脂肪因子，研究[6，7]表明，Vaspin通過多種途徑發(fā)揮抗炎、抗動脈粥樣硬化功能，其水平降低與動脈粥樣硬化的形成密切相關(guān)。目前，臨床尚無研究報道血清LOX-1、Vaspin水平與PCI病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄是否有關(guān)系。本研究對冠心病患者PCI術(shù)前血清LOX-1、Vaspin水平對病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的預測效能進行了探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年1月～2018年1月郴州市第一人民醫(yī)院心血管內(nèi)科收治冠心病患者113例，均行PCI手術(shù)。納入標準：①典型臨床表現(xiàn)即突發(fā)心前區(qū)疼痛，呈壓榨痛或發(fā)作性絞痛，結(jié)合超聲心動圖以及實驗室檢查等綜合確診為冠心病，符合冠心病診斷標準[8]；②PCI術(shù)后6個月血管擴張部位及鄰近5 mm節(jié)段內(nèi)血管腔經(jīng)血管內(nèi)超聲檢查提示直徑狹窄>50%[9]；③符合PCI手術(shù)指征；④年齡≥18歲。排除標準：①妊娠期及哺乳期的女性；②肝腎功能出現(xiàn)障礙；③有多支冠狀動脈發(fā)生病變或者血管慢性堵塞再通；④急慢性炎癥反應(yīng)性疾?。虎葑陨砻庖咝约膊?；⑥風濕性心臟病、先天性心臟病、心肌病等可能影響本研究結(jié)果的心臟疾??；⑦未行PCI術(shù)；⑧惡性腫瘤。以術(shù)后6個月擴張冠狀動脈是否發(fā)生再狹窄將患者分為再狹窄組49例，無再狹窄組64例。并于同期隨機選取55例體檢排除冠心病者作為對照組。其中再狹窄組男34例、女15例，年齡(61.27±7.63)歲，BMI(23.09±0.82)kg/m2，病變部位：前降支16例，回旋支11例、右冠脈22例，高血壓史19例、糖尿病史15例；無再狹窄組男45例、女19例，年齡(60.45±8.79)歲，BMI(22.87±0.99)kg/m2，病變部位：前降支24例、回旋支9例、右冠脈31例，高血壓史28例、糖尿病史20例；對照組男30例、女25例，年齡(60.95±8.24)歲，BMI(22.92±0.75)kg/m2，高血壓史14例、糖尿病史11例。三組性別、年齡、BMI、高血壓史、糖尿病史比較差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。研究對象及家屬在知情同意書上簽字且研究獲得醫(yī)院倫理委員會的倫理審查通過。

1.2 血清LOX-1、Vaspin檢測 采集冠心病患者入院后PCI術(shù)前5 mL肘靜脈血，志愿者于體檢當日抽取，在室溫環(huán)境下靜置30 min，以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，離心半徑為12 cm，分離血清保存于-80 ℃環(huán)境下，留待檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清LOX-1、Vaspin水平，NDM-9602G酶標儀購自于北京普朗新技術(shù)有限公司，LOX-1試劑盒購自于上海逸峰生物科技有限公司，Vaspin試劑盒購自于美國R&D公司。檢測過程嚴格按照試劑盒上的相關(guān)說明進行。

1.3 病變冠狀動脈狹窄程度的評估 PCI術(shù)后6個月采用Boston Scientific Clearview血管內(nèi)超聲儀觀察患者病變冠狀動脈狹窄程度。操作方法：肝素抗凝后在冠狀動脈內(nèi)注入硝酸甘油，然后做血管內(nèi)超聲檢查，超聲探頭設(shè)定為2.5 F，頻率設(shè)定為40 MHz，觀察支架內(nèi)病變以及病變鄰近10 mm內(nèi)動脈狹窄情況，觀察指標包括外彈力膜內(nèi)橫截面積(EEM)、最小管腔面積(MLA)、斑塊面積(PLA)。

冠心患者PCI術(shù)后6個月，對照組體檢當日，采用Gensini積分評估病變冠狀動脈狹窄的嚴重程度，評價方法[10]：100%狹窄計分為32分，91%～99%狹窄計分為16分，76%～90%狹窄計分為8分，51%～75%狹窄計分為4分，26%～50%狹窄計分為2分，≤25%狹窄計分為1分，病變冠狀動脈分為左前降支、左主干、右冠狀動脈、回旋支，Gensini積分=各分支積分之和。

2 結(jié)果

2.1 三組血清LOX-1、Vaspin水平比較 三組血清LOX-1、Vaspin水平兩兩比較，P均<0.05，見表1。

表1 三組血清LOX-1、Vaspin水平

2.2 三組EEM、MLA、PLA、Gensini積分比較 三組EEM、MLA、PLA、Gensini積分兩兩比較，P均<0.05，見表2。

表2 三組EEM、MLA、PLA、Gensini積分

2.3 冠心病患者PCI術(shù)前血清LOX-1、Vaspin水平與EEM、MLA、PLA、Gensini積分的相關(guān)性 狹窄組冠心病患者術(shù)前血清LOX-1水平與EEM、MLA、Gensini積分呈負相關(guān)性(r=-0.739、-0.702、-0.785，P<0.05)，與PLA呈正相關(guān)性(r=0.722，P<0.05)；血清Vaspin水平與EEM、MLA、Gensini積分呈正相關(guān)性(r=0.761、0.738、0.792，P<0.05)，與PLA呈負相關(guān)性(r=-0.759，P<0.05)。無再狹窄組血清LOX-1、Vaspin與其他指標無相關(guān)性(P均>0.05)。

2.4 血清LOX-1、Vaspin水平對冠心病患者病變冠狀動脈PCI術(shù)后再狹窄的預測效能 血清LOX-1水平預測病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的AUC為0.845(95%CI：0.777～0.911)，截斷值為8.67 μg/L，靈敏度和特異性分別為0.82、0.86；血清Vaspin水平預測病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的AUC為0.825(95%CI：0.753～0.897)，截斷值為0.85 μg/L，靈敏度和特異性分別為0.80、0.85；血清LOX-1與Vaspin聯(lián)合預測病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的AUC為0.933(95%CI：0.893～0.974)，靈敏度和特異性分別為0.92、0.98。見圖1。

圖1 PCI術(shù)前血清LOX-1、Vaspin水平預測冠心病患者病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄的ROC

3 討論

PCI術(shù)是臨床治療冠心病的主要手段之一，但是術(shù)后6個月內(nèi)血管再狹窄發(fā)生率高，嚴重影響臨床治療效果，造成患者預后不良，通過采用特殊的藥物涂層支架，或者利用他汀類藥物強化治療、雙重抗血小板聚集藥物治療時間延長等方式可減少PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生，但是其發(fā)生率依然可達5%～15%[11]。冠狀動脈內(nèi)膜過度增殖是PCI術(shù)后病變血管再狹窄發(fā)生的病理基礎(chǔ)，PCI術(shù)操作過程中造成動脈血管內(nèi)皮細胞損傷，誘發(fā)血小板沉積形成血栓、炎癥反應(yīng)、血管平滑肌細胞過度增殖等，導致血管重塑和血管新生內(nèi)膜形成，冠狀動脈管腔變窄，最終引起血管再狹窄[12,13]。早期預測PCI術(shù)后血管再狹窄發(fā)生風險已成為臨床研究必要，也是臨床采取個體化治療措施的重要依據(jù)。

LOX-1是由血管內(nèi)皮細胞合成并分泌的氧化型低密度脂蛋白的特異性受體，主要在活化的血管平滑肌細胞、活化的血小板以及成纖維細胞中呈高水平表達。研究[14]顯示，LOX-1通過識別和攝取氧化型低密度脂蛋白誘使內(nèi)皮細胞損傷而致炎癥反應(yīng)，同時促進內(nèi)皮細胞凋亡并加速泡沫細胞的增殖，進而介導動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程。Akhmedov等[15]證實，LOX-1表達升高增加了心血管疾病發(fā)生風險，并且在PCI術(shù)后2 d至術(shù)后6個月一直維持在較高水平。Zou等[16]研究發(fā)現(xiàn)，LOX-1通過激活NF-κB信號通路可誘使炎癥細胞大量釋放炎性因子，通過作用于血管內(nèi)皮并使血管內(nèi)皮細胞損傷，導致血小板活化而形成斑塊。Vaspin是由415個氨基酸殘基構(gòu)成的細胞脂肪因子，通過抑制游離脂肪酸所致的內(nèi)皮細胞凋亡以及拮抗血管平滑肌細胞合成并分泌炎性細胞因子，進而保護血管內(nèi)皮細胞[17]，同時，Vaspin通過抑制p38/hsp27信號通路可以阻斷平滑肌細胞增殖和遷移，延緩動脈粥樣硬化進展[18]。Stancik等[19]的研究表明，Vaspin低表達參與了動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程，是動脈粥樣硬化診療新靶點之一。張鑫等[20]證實,Vaspin在冠心病患者中表達低于健康人，并且與血管病變支數(shù)呈負相關(guān)性，提示其可作為評估冠心病病情嚴重性的生化指標。閆杰等[7]在校正了混雜因素后發(fā)現(xiàn)，Vaspin升高的冠心病患者PCI術(shù)后病變血管再狹窄發(fā)生風險增加75.5%。

本研究結(jié)果顯示，冠心病患者PCI術(shù)前血清LOX-1水平高于對照組，Vaspin水平低于對照組，并且PCI術(shù)后血管再狹窄的患者血清LOX-1水平更高，Vaspin水平更低，提示血清LOX-1、Vaspin異常改變參與了冠心病發(fā)病過程，并且與PCI術(shù)后冠狀動脈再狹窄密切相關(guān)。LOX-1表達升高與氧化型低密度脂蛋白特異性結(jié)合后激活NF-κB信號通路，損傷血管內(nèi)皮細胞并引發(fā)炎癥反應(yīng)，炎性細胞因子在血管內(nèi)膜大量沉積，損傷血管內(nèi)皮細胞活化血小板，導致動脈粥樣斑塊形成，炎性因子進一步促使斑塊不穩(wěn)定破裂和脫落，堵塞血管，使血管腔變狹窄；同時，LOX-1通過參與調(diào)控AMP-AMPK/PKC/NADPH信號通路可促進活性氧大量釋放參與動脈粥樣硬化過程。Vaspin表達降低減弱了其抗炎功能以及拮抗內(nèi)皮細胞凋亡的功能，導致炎性細胞因子和活性氧大量增加，促進血管內(nèi)膜損傷和內(nèi)皮細胞凋亡，形成冠狀動脈斑塊，最終導致心臟疾病發(fā)生；同時Vaspin通過轉(zhuǎn)錄激活子-3信號通路可磷酸化內(nèi)皮源性一氧化氮合酶并使其活性增強，并進一步使二甲基精氨酸二甲胺水解酶活性增強而抑制非對稱二甲基精氨酸水平，最終抑制動脈粥樣硬化發(fā)病，當Vaspin水平降低時抑制作用減弱，此時斑塊不穩(wěn)定性增強，破裂甚至脫落而使動脈管腔狹窄。

本研究還發(fā)現(xiàn)，冠心病患者EEM、MLA大于對照組，且再狹窄組大于無再狹窄組，PLA則在再狹窄組中最小，提示EEM、MLA、PLA是評估冠狀動脈血管狹窄程度的重要指標。EEM、MLA越大提示血管狹窄程度嚴重，PLA越小提示血管管腔越狹窄。Gensini積分是評估冠狀動脈狹窄程度的重要指標，積分越大提示狹窄程度越嚴重，本研究證實了這一結(jié)果，即再狹窄組血管管腔最窄，其Gensini積分最高。經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，病變冠狀動脈PCI術(shù)后再狹窄的冠心病患者血清LOX-1、Vaspin與EEM、MLA、Gensini積分呈不同程度相關(guān)性，提示血清LOX-1、Vaspin作為無創(chuàng)、快速簡單的生化指標，早期檢測有助于臨床輔助評估冠心病患者PCI術(shù)后病變血管再狹窄情況。通過繪制ROC，可以評估術(shù)前血清LOX-1、Vaspin對PCI術(shù)后病變血管再狹窄的預測價值，結(jié)果顯示，兩指標對冠心病患者病變冠狀動脈PCI術(shù)后再狹窄具有較高的預測價值，AUC分別為0.845、0.825，并且聯(lián)合檢測能明顯提高預測價值，AUC可達0.933，提示術(shù)前血清LOX-1、Vaspin有望成為臨床早期預測病變冠狀動脈PCI術(shù)后再狹窄的指標。

綜上所述，冠心病患者PCI術(shù)前血清LOX-1、Vaspin水平對病變冠狀動脈術(shù)后再狹窄預測效能較好，聯(lián)合預測效能更佳，提示血清LOX-1、Vaspin可作為預測病變冠狀動脈PCI術(shù)后再狹窄的指標。本研究納入的樣本量相對較少，下一步重點開展多中心前瞻性隊列研究，以進一步探討術(shù)前血清LOX-1、Vaspin對病變血管PCI術(shù)后再狹窄的預測價值。