正交實驗法優(yōu)化中藥狼毒多糖的提取

鄭美玲，郝曉亮，方志剛，代淑娟

（遼寧科技大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，遼寧 鞍山 114051）

多糖，廣泛存在于動物、植物、微生物等有機(jī)體中，人們對多糖的研究越發(fā)地深入，并已成功將提取出來的多糖用于保健食品和醫(yī)藥品的開發(fā)。祁小妮，馬梅等人利用雙水相萃取法提取藏藥瑞香狼毒中的多糖[1-2]。目前利用甲醇來提取中藥多糖的研究文獻(xiàn)并不多見，本研究希望通過對狼毒多糖進(jìn)行提取并對抗氧化性能進(jìn)行研究，為中藥多糖的提取和利用提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

狼毒購于市售；無水甲醇、葡萄糖、苯酚、硫酸等均為分析純，由遼寧科技大學(xué)生物實驗室提供。

1.3 狼毒多糖提取試驗

1.3.1 單因素試驗

提取溫度分別設(shè)為 30℃、40℃、50℃、60℃、70℃，超聲提取時間分別設(shè)為 20、30、40、50、60 min，料液比分別設(shè)為 1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60，考查對多糖提取率的影響。

1.3.2 多糖含量的測定

多糖含量測定采用苯酚——硫酸法[3]，多糖提取率計算公式：

式中：C——由葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到的多糖含量；V——提取液定容體積，mL；W——樣品取樣質(zhì)量，g。

2 實驗結(jié)果討論與分析

2.1 單因素實驗結(jié)果

2.1.1 提取溫度對狼毒多糖提取率的影響

如圖1所顯示，發(fā)現(xiàn)隨著溫度的提高，狼毒多糖提取率呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，由此可知在提取溫度為60℃時，多糖提取率最大。

2.1.2 提取時間對狼毒多糖提取率的影響

如圖2所顯示，提取率隨著時間的延長而逐漸增加，在提取時間為40 min時，提取率最大[4-5]。

2.1.3 料液比對狼毒多糖提取率的影響

如圖3所顯示，隨著料液比的增大，狼毒提取率迅速增大，當(dāng)料液比為1∶50時，達(dá)到最大，此后維持平衡。

2.1.4 甲醇濃度對狼毒多糖提取率的影響

如圖4所顯示，當(dāng)甲醇濃度有50%上升到60%時，提取率迅速增大，分析原因可能是此條件下的溶劑極性有利于提取。此后，雖然甲醇濃度進(jìn)一步增加，但提取率呈下降的趨勢。

2.2 正交試驗結(jié)果

通過正交試驗列制見表1，發(fā)現(xiàn)第5組實驗結(jié)果最好，驗證性實驗也證明結(jié)果可靠真實。

表1 正交設(shè)計實驗直觀分析表Tab.1 Visual analysis of orthogonal design experiment

3 結(jié)論

針對狼毒多糖提取的最優(yōu)工藝進(jìn)行了研究。由正交試驗可見，在提取溫度為60℃、提取時間為40 min、料液比為1∶60、甲醇濃度為50%時，狼毒多糖提取率最大，為1.62%。有關(guān)狼毒多糖的結(jié)構(gòu)及其他功能研究，還會在以后的研究中繼續(xù)進(jìn)行。