血清apo A1、apo B、apo E與特應性皮炎的相關(guān)性

唐滿玲， 周 娟， 蔣最明， 顧 敏， 林 偉， 李見紅， 胡 衛(wèi)， 李 娟， 羅文輝

（中南大學湘雅醫(yī)學院附屬株洲醫(yī)院臨床檢驗中心，湖南 株洲 412007）

特應性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一種常見的慢性瘙癢性疾病，成人的發(fā)病率為1%～3%，嬰幼兒發(fā)病率高達10%～20%；我國1～7歲兒童AD的總體發(fā)病率為12.94%[1-2]。近20年來，AD的發(fā)病率逐年增加，已成為日益嚴重的公眾健康問題[1-2]。免疫失常、皮膚屏障功能障礙、環(huán)境因素及其交互作用在AD的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用[3]，但其確切的致病機制仍不明確。近年來，有研究結(jié)果顯示，脂類相關(guān)物質(zhì)在維持皮膚正常屏障功能中發(fā)揮了重要作用，其代謝異常將破壞正常的皮膚屏障功能，并可能通過誘導皮膚固有免疫失調(diào)而誘發(fā)過敏性疾病[4-5]。TOMAZIC等[6]對過敏性鼻炎患者的鼻黏膜組織進行了活檢分析，發(fā)現(xiàn)炎性病變組織載脂蛋白（apolipoprotein，apo）A1表達顯著升高。還有研究結(jié)果顯示，AD患者病變皮膚中apo A1呈高表達[7]。過敏性鼻炎和AD均伴隨著一些脂類相關(guān)蛋白的代謝異常，如apo A2、脂肪酸結(jié)合蛋白-5、烯醇化酶α等。脂類相關(guān)蛋白在過敏反應的發(fā)生過程中發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用，可能與人體固有免疫調(diào)節(jié)功能有關(guān)。因此，脂類相關(guān)蛋白如apo A1、apo B、apo E可能與AD的發(fā)生有關(guān)。為此，本研究擬通過分析AD患者血清apo A1、apo B及apo E與免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）的關(guān)系，探討脂類相關(guān)蛋白在AD發(fā)生中的作用。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2016年1月—2017年6月中南大學湘雅醫(yī)學院附屬株洲醫(yī)院皮膚科確診且進行過敏原檢測的AD患者230例，其中男84例、女146例，年齡（23.9±16.4）歲。參照Williams診斷標準[8]，必須具有皮膚瘙癢史及以下標準中的3條或以上：（1）有屈側(cè)皮膚受累史，包括肘窩、腘窩、踝前或頸周（10 歲以下兒童包括頰部）；（2）有哮喘或過敏性鼻炎史（4歲以下兒童的一級親屬有特應性疾病史）；（3）有全身皮膚干燥史；（4）可見的屈側(cè)濕疹；（5）2歲前發(fā)病。以同期中南大學湘雅醫(yī)學院附屬株洲醫(yī)院體檢中心體檢健康者100名作為正常對照組，其中男47名、女53名，年齡（23.6±14.0）歲，排除有過敏性疾病史者、近2個月內(nèi)服用過皮質(zhì)類固醇激素或抗組胺藥物者、近2周內(nèi)使用過外用皮質(zhì)類固醇激素者。本研究經(jīng)中南大學湘雅醫(yī)學院附屬株洲醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 采集所有對象空腹靜脈血3～5 mL，離心分離血清，-20 ℃保存待測。

1.2.2 血清apo A1、apo B、apo E水平檢測 采用免疫比濁法檢測血清apo A1、apo B和apo E水平。apo A1和apo B檢測試劑、質(zhì)控品均購自瑞士羅氏公司，apo E檢測試劑和質(zhì)控品均購自寧波普瑞柏生物技術(shù)股份有限公司。檢測儀器為cobas C501全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司），儀器性能良好，在校準周期內(nèi)。

1.2.3 血清IgE水平檢測 血清IgE水平采用AllergyScreen過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒（免疫印跡法，德國麥德威斯分析有限公司）檢測。特異性免疫球蛋白E（specific immunoglobulin E，sIgE）結(jié)果為定量數(shù)據(jù)。總IgE結(jié)果為分類數(shù)據(jù)，以＜100、100～200、＞200 kU/L表示。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件和Excel 2007軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的計量資料采用表示，2個組之間比較采用t檢驗。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗。采用Logistic回歸分析評估各項目及其與AD發(fā)病風險的關(guān)系。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 AD組與正常對照組血清apo A1、apo B、apo E水平的比較

AD組和正常對照組女性血清apo A1水平均高于同組男性（P＜0.05），血清apo B、apo E水平差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。AD組女性血清apo A1水平高于正常對照組女性（P＜0.05），而男性2個組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。AD組男性血清apo B水平低于正常對照組男性（P＜0.01），而女性2個組之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。AD組與正常對照組同性別之間血清apo E水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 AD組與正常對照組血清apo A1、apo B、apo E水平的比較

2.2 AD患者血清總IgE水平和sIgE陽性率的分布

230例AD患者中有198例（86.1%）sIgE陽性，其中男70例（35.4%）、女128例（64.6%）；有132例（57.4%）總IgE＞200 kU/L，其中男51例（38.6%）、女81例（61.4%）。sIgE陽性者的男女比例與總IgE ＞200 kU/L者比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

230例AD患者中有56例患者≤7歲，其中sIgE陽性者49例（87.5%）、總IgE＞200 kU/L者26例（53.1%）；有174例患者＞7歲，其中sIgE陽性者149例（85.6%）、總IgE＞200 kU/L者106例（60.9%）。2個年齡組之間sIgE陽性率和總IgE＞200 kU/L的比例差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.3 apo A1、apo B及apo E之間的相關(guān)性分析

apo A1、apo B與apo E均呈正相關(guān)（r值分別為0.190、0.287，P＜0.01）。apo A1與apo B無相關(guān)性（r=0.030，P＞0.05）。apo A1/apo B比值與apo E無相關(guān)性（r=-0.060，P＞0.05）。apo A1、apo B和apo E均與年齡呈正相關(guān)（r值分別為0.191、0.417、0.143，P＜0.01）。

2.4 apo A1、apo B及apo E與AD患病風險的關(guān)系

Logistic回歸分析結(jié)果顯示，未校正混雜因素（年齡和性別）時，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風險增加4.438倍[比值比（odds ratio，OR）=4.438，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）為1.636～12.041，P=0.003]；apo B每升高1 g/L，AD的患病風險是原來的0.254倍（OR=0.254，95%CI 為0.100～0.640，P=0.004）。進一步校正年齡、性別后，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風險增加7.346倍（OR=7.346，95%CI為2.349～22.977，P=0.001）；apo B校正年齡、性別后不再與AD患病風險有關(guān)。apo E無論是否校正年齡和性別均與AD患病風險無關(guān)。年齡每增加1歲，AD的患病風險是原來的0.96倍（OR=0.960，95%CI為0.939～0.971，P＜0.001）。性別與AD的患病風險無關(guān)。

2.5 apo A1、apo B及apo E與總IgE、sIgE的關(guān)系

無論是否校正混雜因素（年齡和性別），apo A1、apo E均與總IgE無關(guān)。未校正混雜因素（年齡和性別）時，apo B每升高1 g/L，總IgE＞200 kU/L的風險增加6.436倍（OR=6.436，95%CI為1.857～22.304，P=0.003）；校正混雜因素（年齡和性別）后，apo B每升高1 g/L，總IgE＞200 kU/L的風險增加6.694倍（OR=6.694，95%CI為1.739～25.762，P=0.006）。無論是否校正混雜因素（年齡和性別），apo A1、apo B及apo E均與sIgE無關(guān)。

3 討論

apo A1和apo B是評估人體內(nèi)血脂水平的重要指標，多年來一直被認為是2個重要的心血管疾病相關(guān)因素，因此多數(shù)研究集中于其參與動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的機制。近年來，隨著研究的不斷深入，載脂蛋白與人體非特異性免疫功能的相關(guān)性也越來越明確。有研究結(jié)果顯示，apo A1能夠抑制脂多糖誘導的炎癥反應[9]，某些腫瘤組織中apo A1表達會升高，某些腫瘤患者血清apo A1水平也會升高[10-11]。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，apo A1在一些常見的過敏性疾病病變組織中表達異常增高，并且伴隨著其他脂類蛋白表達的異常[6-7]。這些研究結(jié)果提示脂類相關(guān)蛋白在維持人體正常的固有免疫中扮演了重要角色。脂類蛋白如apo A1、apo B和apo E等代謝異?？赡軈⑴c了過敏性疾病的發(fā)生、發(fā)展。

本研究的主要目的是初步探索apo A1、apo B和apo E與AD發(fā)生的相關(guān)性。結(jié)果顯示，血清apo A1水平與性別有關(guān)，血清apo B和apo E水平與性別無關(guān)，與文獻報道[12]一致。但這3種載脂蛋白均與年齡存在明顯的關(guān)聯(lián)，這與文獻報道[13]不同，可能與本研究樣本量較小有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，apo A1、apo B與apo E均呈正相關(guān)（r值分別為0.190、0.287，P＜0.01），apo A1與apo B無相關(guān)性（r=0.030，P＞0.05）。apo A1、apo B及apo E之間的相關(guān)性目前還未見相關(guān)報道?？赡苁怯捎赼po E存在于乳糜微粒、低密度脂蛋白、中間密度脂蛋白和高密度脂蛋白中，而apo A1與高密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān)、apo B與低密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān)，所以apo A1、apo B與apo E均呈正相關(guān)，而apo A1與apo B之間無相關(guān)性。

由于AD好發(fā)于7歲以下幼兒，因此本研究以7歲為年齡分界線，分析了不同年齡患兒sIgE和總IgE水平的分布情況，總IgE以200 kU/L作為臨界值。結(jié)果顯示，≤7歲和＞7歲患兒sIgE陽性率和總IgE＞200 kU/L的比例差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），這可能是因為以7歲為年齡分界線，2個組的患兒特異性免疫基礎(chǔ)均較成熟，特異性免疫力無明顯差異。本研究結(jié)果還顯示，無論是否校正年齡和性別，apo A1與AD的發(fā)生風險均顯著相關(guān)，與文獻報道[6-7]一致。這表明apo A1是AD發(fā)生的危險因子。apo B在校正年齡、性別后與AD的發(fā)生風險無關(guān)，這可能與apo B受年齡、性別的影響較大有關(guān)。有研究結(jié)果顯示，隨著年齡的增加，AD的患病風險呈遞減的趨勢，這與AD好發(fā)于幼兒及兒童相符[14]。另外，apo E無論是否校正年齡和性別，均與AD的發(fā)生風險無關(guān)。

總IgE及sIgE與AD的發(fā)生有關(guān)，二者是輔助診斷AD常用的實驗室指標，且總IgE水平會隨著疾病的嚴重程度而升高[15-16]。為此，本研究分析了apo A1、apo B、apo E與總IgE、sIgE之間的關(guān)系，但未發(fā)現(xiàn)apo A1與總IgE、sIgE有相關(guān)性。由于AD存在IgE或非IgE介導的免疫學機制[17]，所以apo A1可能是獨立于IgE介導的參與AD發(fā)生的危險因子。本研究結(jié)果顯示，apo B可增加總IgE水平升高的風險，但不能增加sIgE水平升高的風險。這可能與本研究檢測的過敏原并未覆蓋所有的過敏原種類，有些sIgE水平很低的樣本會出現(xiàn)高總IgE水平的情況，導致sIgE水平與總IgE水平不呈平行變化有關(guān)。另外，apo E與總IgE、sIgE均無關(guān)。

綜上所述，本研究初步闡明了apo A1、apo B、apo E與AD的關(guān)系。apo A1可能是獨立于IgE介導的參與AD發(fā)生的危險因子，apo E與AD的發(fā)病風險無關(guān)，apo B由于受年齡、性別等因素的多重影響，其與AD發(fā)病風險的關(guān)系尚不明確，但能增加總IgE水平升高的風險，具體的機制尚需進一步研究。本研究結(jié)果為AD患兒脂質(zhì)相關(guān)免疫機制研究提供了新的依據(jù)。