肝素結(jié)合蛋白在感染性肺炎診斷中的價值分析*

唐小娟，侯思遠，劉美，馮星火，趙鴻梅

(1.遼寧省人民醫(yī)院暨中國醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院a. 檢驗醫(yī)學(xué)科，b.重癥醫(yī)學(xué)科，沈陽110016; 2.吉林省腫瘤醫(yī)院輸血科，長春 130012)

細菌性肺炎是繼發(fā)于細菌感染的下呼吸道和肺實質(zhì)的獲得性炎癥[1]，是臨床上一種常見的呼吸道系統(tǒng)疾病，具有相當高的發(fā)病和死亡率。目前實驗室檢測的常用感染指標如降鈣素原(procalcitonin，PCT)、白細胞(white blood cell，WBC)計數(shù)、C反應(yīng)蛋白(C reactive protein，CRP)及白細胞介素6(interleukin-6，IL-6)的影響因素較多，診斷感染性疾病的敏感性及特異性欠理想。因此，有關(guān)感染性疾病診斷標志物的研究一直是醫(yī)學(xué)研究熱點。

肝素結(jié)合蛋白(heparin-binding protein，HBP)由活化的中性粒細胞釋放，是唯一存在于中性粒細胞顆粒中的可分泌蛋白質(zhì)。HBP具有廣泛的抗微生物活性，由細菌感染激活的中性粒細胞釋放，可通過影響血管內(nèi)皮細胞通透性誘導(dǎo)血管發(fā)生滲漏和水腫形成，具有促炎作用。血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A,SAA)主要在肝臟中產(chǎn)生，在健康人中有少量存在，創(chuàng)傷、感染、急慢性炎癥時SAA表達水平會升高[2]。本研究通過細菌性肺炎及非細菌性肺炎患者血液HBP、SAA、PCT及WBC水平，評估各指標在感染性肺炎中的臨床應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2017年3月至12月在遼寧省人民醫(yī)院住院的細菌性肺炎患者51例，男29例，女22例，年齡(63.92±15.62)歲，符合任一標準：(1)痰標本細菌培養(yǎng)陽性；(2)影像學(xué)診斷為炎癥；非細菌性肺炎患者44例，男20例，女24例，年齡(59.09±10.82)歲，其中28例肺炎支原體(MP)感染，16例肺炎衣原體(CP)感染，所有非細菌性肺炎患者痰細菌培養(yǎng)陰性，經(jīng)MP/CP IgM抗體檢測為陽性，急性期或恢復(fù)期檢測MP/CP IgG抗體滴度升高4倍以上；同期體檢健康者51名作為對照組，男27例，女24例，年齡(51.78±9.72)歲，門診體檢血常規(guī)、尿常規(guī)、肝腎功能及肺CT檢查正常且排除近期感染。各組患者間年齡、性別差異無統(tǒng)計學(xué)意義。清晨空腹采集枸櫞酸鈉抗凝血、無抗凝劑血、EDTA抗凝血各1管，EDTA抗凝血混勻后直接用于血常規(guī)WBC的檢測；將枸櫞酸鈉(1∶9)抗凝血與無抗凝劑血1 610×g離心5 min分離血漿/血清并分裝做好標記后放入-70 ℃冰箱儲存，以待檢測HBP、SAA及PCT。本試驗研究已通過遼寧省人民醫(yī)院倫理委員會批準(倫理批件號：HS004)。

1.2儀器與試劑 cobas e702全自動生化分析儀(Roche公司)，血漿HBP試劑盒(杭州中翰盛泰醫(yī)療器械有限公司)；AFS-1000干式熒光免疫分析儀及其配套血清SAA檢測試劑(廣州藍勃生物科技有限公司)；cobas e601電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套PCT檢測試劑(Roche公司)；XN2000血細胞分析儀及其配套試劑(Sysmex公司)。

1.3方法 在cobas e702全自動生化分析儀上用免疫比濁法檢測血漿HBP，在AFS-1000干式熒光免疫分析儀用免疫比濁法檢測血清SAA，在cobas e601電化學(xué)發(fā)光分析儀上用免疫熒光層析法檢測血清PCT水平，WBC計數(shù)采用XN2000血細胞分析儀及其配套試劑檢測，所有標本檢測過程均嚴格按照廠家提供的試劑說明書及相應(yīng)SOP文件進行。

2 結(jié)果

2.1各組患者血液中HBP、SAA、PCT及WBC檢測結(jié)果的比較 細菌性肺炎組HBP、SAA與非細菌性肺炎組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Z=-6.90和Z=-4.16，P<0.05)，而PCT及WBC計數(shù)水平與非細菌性肺炎組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.53,t=1.27，P>0.05)。非細菌肺炎組SAA、PCT及WBC水平與健康人對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，HBP水平與健康人對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.23，P=0.07)。見表1。

表1 各組HBP、SAA、PCT及WBC水平的比較

注：a，與非細菌性肺炎組比較，P<0.05；b，與健康人對照組比較，P<0.05。

2.2HBP與SAA診斷細菌性肺炎感染的效能評價 根據(jù)細菌性肺炎組與對照組(包括健康人對照組和非細菌性肺炎組)HBP、SAA、PCT及WBC水平繪制ROC曲線，見圖1。HBP的ROC曲線下面積(AUC)為0.917，以19.50 ng/mL作為HBP最佳截斷值時敏感性為80.4%，特異性為88.4%；血清SAA的AUC為0.834，以18.84 mg/L作為SAA最佳截斷值時敏感性為78.4%，特異性為81.1%。HBP與SAA聯(lián)合檢測診斷細菌性肺炎時敏感性和特異性分別為90.2%和80.0%，可以提高對細菌性肺炎診斷的敏感性。見表2。

圖1 各指標診斷細菌性肺炎的ROC曲線

表2 各指標對細菌性肺炎診斷的性能參數(shù)

2.3HBP、SAA、PCT及WBC在鑒別診斷細菌性肺炎與非細菌性肺炎中的效能評價 在鑒別診斷細菌性肺炎與非細菌性肺炎中，HBP的AUC值為0.908(95%CI：0.849～0.967)，高于SAA、PCT及WBC的AUC值0.748(95%CI：0.644～0.853)、0.623(95%CI：0.509～0.738)和0.611(95%CI：0.495～0.726)，當HBP最佳截斷值為20.50 ng/mL時，鑒別診斷細菌性肺炎和非細菌性肺炎的敏感性為78.4%，特異性為88.6%，其鑒別診斷價值高于SAA、PCT。見圖2和表3。

圖2 各指標鑒別細菌性與非細菌肺炎感染的ROC曲線

表3各指標在鑒別細菌性與非細菌性肺炎感染中的診斷價值

參數(shù)曲線下面積P值cut off值敏感性(%)特異性(%)HBP(ng/mL)0.9080.00020.5078.488.6SAA(mg/L)0.7480.00016.3186.354.5PCT(ng/mL)0.6230.0390.1247.168.2WBC(×109/L)0.6110.064---

3 討論

HBP 具有顯著的殺菌活性、趨化特性以及增加血管內(nèi)皮細胞通透性及調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用。健康人血漿中HBP含量很低，一般不超過10 ng/mL，嚴重膿毒癥或感染性休克患者血漿HBP水平顯著升高，且HBP水平升高與死亡風(fēng)險增加有關(guān)[3]。此外，對呼吸道感染[4]、顱內(nèi)感染[5]、尿路感染[6]等感染性疾病的研究發(fā)現(xiàn)HBP與感染的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

在本研究中，細菌性肺炎組HBP水平皆顯著高于非細菌性肺炎組和健康人對照組，在非細菌性肺炎組和健康人對照組間HBP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，提示HBP是較敏感的細菌性感染標志物。血清SAA水平在細菌性肺炎組、非細菌肺炎及健康對照組各組間比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，提示SAA對炎癥反應(yīng)較敏感；聯(lián)合檢測HBP和SAA可為鑒別診斷細菌感染、支原體、衣原體感染提供有力的支持。本研究PCT及WBC在細菌性肺炎組、非細菌肺炎組的水平高于對照組，表明PCT和WBC也是輔助判斷是否有感染的一個重要指標。

HBP與SAA診斷細菌性肺炎的AUC分別為0.917和0.834，分析得出識別細菌性肺炎的HBP最佳截斷值為19.50 ng/mL，對應(yīng)的敏感性為80.4%，特異性為88.4%；SAA的最佳截斷值為18.84 mg/L時，敏感性為78.4%，特異性為81.1%，這也與陳鳳華等[2]的研究結(jié)果基本一致；聯(lián)合應(yīng)用HBP與SAA診斷細菌性肺炎的敏感性和特異性分別為90.2%和80.0%。因此，HBP與SAA聯(lián)合檢測有助于快速早期診斷細菌性肺炎。吳苑等[4]研究表明HBP在鑒別呼吸道細菌感染和非細菌感染時的診斷價值較其他炎癥指標較優(yōu)越，對輔助各專科醫(yī)生分析不同部位細菌感染有重要的診斷作用。本研究中HBP在鑒別診斷細菌性與非細菌性肺炎時的AUC為0.908，敏感性和特異性分別為78.4%和88.6%，其綜合鑒別診斷價值優(yōu)于SAA、PCT與WBC，這進一步支持血漿HBP可用于鑒別感染性肺炎的病原體類型。血清SAA鑒別診斷感染類型的特異性為54.5%，說明SAA是一種非特異性的感染標志物，只提示感染，是輔助診斷感染的一個敏感指標。

綜上所述，血漿HBP是較理想的細菌感染標志物，與血清SAA聯(lián)合檢測可提高鑒別診斷細菌性肺炎的敏感性，HBP在鑒別細菌與非細菌肺炎中的診斷價值較高，所以檢測HBP對確認感染類型有很大臨床意義，有利于指導(dǎo)醫(yī)生對癥使用抗菌藥物治療。本研究的局限性在于不能完全排除患者在入院前已使用抗炎藥物治療，會降低病原微生物陽性檢出率及對結(jié)果的檢測產(chǎn)生影響。