CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值對(duì)開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染的診斷價(jià)值

杜新輝 李剛 周靜

(1石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科，新疆 石河子 832000；2貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)研究院)

開(kāi)放性骨折是一種臨床常見(jiàn)的骨科疾病，主要表現(xiàn)為骨折部位皮膚及皮下軟組織損傷撕裂，骨折端直接或間接與外界相通，皮下組織或肌肉有不同程度的損傷。此類(lèi)骨折存在開(kāi)放性傷口，術(shù)后易出現(xiàn)感染等并發(fā)癥，輕者可引起骨折斷端愈合緩慢，嚴(yán)重者可并發(fā)重要內(nèi)臟器官損傷導(dǎo)致休克〔1～3〕。因此，對(duì)開(kāi)放性骨折術(shù)后感染進(jìn)行早期診斷，并給予有效治療尤為重要。目前，臨床上常采用白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、紅細(xì)胞沉降率(ESR)等實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌感染指標(biāo)對(duì)開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染進(jìn)行診斷，但其敏感性低，特異性不強(qiáng)，具有一定的局限性〔4〕。有研究發(fā)現(xiàn)：CD64指數(shù)、中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(NLR)及CRP/白蛋白(ALB)比值作為細(xì)菌感染的特異性指標(biāo)，在感染性疾病的診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值〔5〕。本研究回顧性分析108例開(kāi)放性骨折患者相關(guān)實(shí)驗(yàn)室資料，旨在探討CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值對(duì)開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染的診斷價(jià)值，為判斷感染的嚴(yán)重程度，并采取有效措施控制感染提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2016年1月至2019年5月在石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科行手術(shù)治療的開(kāi)放性骨折患者108例作為研究對(duì)象，其中男62例，女46例，年齡45～63歲，平均(52.17±3.26)歲，骨折分型采用Gustilo-Anderson法：Ⅰ型18例，Ⅱ型49例，ⅢA型23例，ⅢB 12例，ⅢC 6例。 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合開(kāi)放性骨折臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)X線(xiàn)片、CT等檢查確診；②未合并其他感染性疾病者；③獲得知情同意，簽訂知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①閉合性骨折；②合并其他細(xì)菌、病毒感染性疾病或短期內(nèi)接受過(guò)抗菌藥物治療；③合并嚴(yán)重的心、肝、腎等功能障礙者；④存在手術(shù)禁忌證及精神異常者。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 所有患者于術(shù)后1、3、5、7 d采集空腹靜脈血6 ml進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)采集3管靜脈血于干燥的含乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝劑的負(fù)壓真空管，采用離心過(guò)濾機(jī)(生產(chǎn)廠家：上海樂(lè)楓生物科技有限公司，頻率：3 000 r/min)離心10 min，分離血清，放置在-20℃保存；

1.2.2主要試劑及儀器 ①3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司，型號(hào)：bact/ALERT)及配套血培養(yǎng)瓶；②全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(日本Sysmex公司，型號(hào)：Sysmex XE-2100)；③全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)(法國(guó)生物梅里埃公司，型號(hào)：FACSCalibur)；④循環(huán)增強(qiáng)熒光分析儀(美國(guó)羅氏，型號(hào)：Cobas z480)試劑均為原廠配套試劑，所有步驟嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行。

1.2.3檢測(cè)方法 ①CD64檢測(cè)：取2支流式試管，每支100 μl抗凝全血，加入20 μl異硫氰酸熒光素(FITC)抗體混勻，以同型免疫球蛋白(Ig)G-FITC為對(duì)照，室溫避光30 min，加入2 ml紅細(xì)胞裂解液，搖勻后放置15 min，置上清，加入1%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(PBS)0.5 ml，采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)前向散射光(FSC)/側(cè)向散射光(SSC)點(diǎn)圖顯示的形態(tài)學(xué)特征，標(biāo)記中性粒細(xì)胞群，熒光標(biāo)記的染色細(xì)胞為陰性對(duì)照，測(cè)定中性粒細(xì)胞CD64的平均熒光強(qiáng)度。②NLR檢測(cè)：采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定患者血常規(guī)，觀察WBC、中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞值，并計(jì)算NLR比值。③CRP/ALB比值檢測(cè)：采用全自動(dòng)生化分析儀和乳膠散射比濁法對(duì)CRP與ALB進(jìn)行檢測(cè)，觀察CRP、ALB值，并計(jì)算CRP/ALB比值。

1.3觀察指標(biāo) ①統(tǒng)計(jì)開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染的發(fā)生情況；②比較術(shù)后不同時(shí)間段CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值的變化情況；③評(píng)價(jià)CD64指數(shù)、NLR及CRP/Alb比值在開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染中的特異性及敏感性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染的發(fā)生情況 108例開(kāi)放性骨折患者中，經(jīng)血培養(yǎng)、分泌物和穿刺液培養(yǎng)等病原學(xué)檢查確診，術(shù)后早期出現(xiàn)細(xì)菌感染46例(42.59%)為細(xì)菌感染組，未出現(xiàn)細(xì)菌感染62例(57.41%)為非細(xì)菌感染組。

2.2兩組術(shù)后CD64指數(shù)水平變化比較 術(shù)后1 d，兩組CD64指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；術(shù)后3、5、7 d細(xì)菌感染組CD64指數(shù)顯著高于非細(xì)菌感染組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.3兩組術(shù)后NLR變化比較 術(shù)后1 d，兩組NLR水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；術(shù)后3、5、7 d細(xì)菌感染組NLR水平顯著高于非細(xì)菌感染組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組術(shù)后CD64指數(shù)及NLR變化比較

2.4兩組術(shù)后CRP/ALB比值變化比較 術(shù)后1 d，兩組CRP/ALB比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；術(shù)后3、5、7 d細(xì)菌感染組CRP/ALB比值顯著高于非細(xì)菌感染組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組術(shù)后CRP/ALB比值變化比較

2.5CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值的敏感性及特異性比較 當(dāng)CD64指數(shù)的曲線(xiàn)下面積為0.893時(shí)，對(duì)開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染診斷的敏感性和特異性，均優(yōu)于NLR 、CRP/ALB比值單獨(dú)診斷效率；當(dāng)三者聯(lián)合進(jìn)行預(yù)測(cè)時(shí)，其敏感性和特異性有明顯提高。 見(jiàn)表3。

表3 CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值的敏感性及特異性比較

3 討 論

開(kāi)放性骨折是指骨折部位皮膚及皮下軟組織損傷撕裂，骨折端直接或間接與外界相通的骨折類(lèi)型。手術(shù)是開(kāi)放性骨折患者主要的治療方法，而感染是開(kāi)放性骨折患者術(shù)后愈合的重要干擾因素，若不能早期發(fā)現(xiàn)并給予有效治療可導(dǎo)致皮膚壞死、骨外露，嚴(yán)重者可導(dǎo)致骨髓炎和膿毒血癥，嚴(yán)重威脅患者的生命健康〔6，7〕。血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)是開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染的輔助診斷手段〔8〕。有研究認(rèn)為：CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值與術(shù)后感染存在相關(guān)性，可作為開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染的診斷預(yù)測(cè)指標(biāo)〔9〕。

機(jī)體抵御細(xì)菌入侵主要依靠機(jī)體內(nèi)固有免疫系統(tǒng)，特別是中性粒細(xì)胞發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。中性粒細(xì)胞作為早期吞噬細(xì)胞具有趨化、吞噬和氧化猝發(fā)能力，能上調(diào)受體表達(dá)含量，釋放大量的細(xì)胞因子，其中就包括CD64分子〔10〕。CD64作為IgG合成的Fc片段受體，多表達(dá)于巨噬細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞表明。靜息狀態(tài)下，CD64在中性粒細(xì)胞中呈低水平表達(dá)，當(dāng)機(jī)體處于感染、術(shù)后創(chuàng)傷及炎性疾病狀態(tài)時(shí)，中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)水平可在短時(shí)間內(nèi)迅速升高，并在22 h內(nèi)達(dá)到高峰〔11，12〕。在非細(xì)菌性感染時(shí)，中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)呈低水平表達(dá)；而在細(xì)菌感染時(shí)，CD64指數(shù)明顯升高。因此，CD64指數(shù)可作為開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染的診斷及鑒別標(biāo)志物〔13〕。人類(lèi)抗感染免疫反應(yīng)依賴(lài)于血液細(xì)胞功能作用，當(dāng)機(jī)體處于感染狀態(tài)時(shí)，血液細(xì)胞數(shù)量及功能也會(huì)受到影響。NLR與機(jī)體淋巴細(xì)胞數(shù)量密切相關(guān)〔14，15〕。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌感染時(shí)，NLR比值迅速升高，以抵抗機(jī)體感染，NLR比值能客觀地反映機(jī)體的感染狀況〔16〕。CRP是肝細(xì)胞合成的多肽分子，參與機(jī)體的免疫應(yīng)答，當(dāng)機(jī)體受到微生物侵襲或組織損傷時(shí)，CRP水平迅速升高，并快速達(dá)到峰值。ALB是血清中的主要蛋白質(zhì)成分，其水平變化與多種急性感染性疾病的病情發(fā)展有關(guān)〔17〕。研究認(rèn)為，CRP/ALB比值可在一定程度上反映機(jī)體的炎性平衡，而這種平衡可能在開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染過(guò)程中發(fā)揮重要作用〔18〕。

本研究結(jié)果說(shuō)明CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值是診斷開(kāi)放性骨折患者術(shù)后細(xì)菌性感染的重要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。CD64指數(shù)、NLR 、CRP/ALB比值這3種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)能相互補(bǔ)充，進(jìn)一步提高對(duì)開(kāi)放性骨折患者術(shù)后早期感染的準(zhǔn)確性。

綜上所述，CD64指數(shù)、NLR及CRP/ALB比值測(cè)定均有助于開(kāi)放性骨折術(shù)后早期感染的診斷，其中CD64指數(shù)的診斷效果優(yōu)于單純使用NLR及CRP/ALB比值，而三者聯(lián)合檢測(cè)的靈敏性和特異性有明顯提高，進(jìn)一步提高了診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。