囊胚質(zhì)量對(duì)單囊胚移植妊娠結(jié)局及子代的影響

張建瑞，管一春，申春艷，章露文，劉曉陽(yáng)，周鵬飛，許小燕，王興玲

1)鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心 鄭州 450052 2)鄭州人民醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)科 鄭州450003

近年來(lái)有研究[1]表明囊胚移植與第3天的胚胎移植相比，其臨床妊娠率更高。囊胚培養(yǎng)可以篩選發(fā)育潛能更好的胚胎，同時(shí)囊胚移植時(shí)囊胚與子宮內(nèi)膜同步性更好[2]，所以囊胚移植可以得到更高的臨床妊娠率和著床率[3]。目前認(rèn)為囊胚的發(fā)育速度和囊胚質(zhì)量是影響臨床妊娠率的重要因素，一般認(rèn)為囊胚的發(fā)育速度越快，囊胚級(jí)別越高，臨床妊娠率和種植率越高。但是目前大部分對(duì)于囊胚移植的研究[4]僅僅關(guān)注于臨床妊娠率及種植率，而缺乏對(duì)新生兒出生結(jié)局的關(guān)注。已有學(xué)者[5]呼吁關(guān)注囊胚移植對(duì)新生兒健康的影響。本研究回顧性分析了不同質(zhì)量單囊胚新鮮周期移植和凍融周期移植妊娠結(jié)局和子代情況，以期為臨床應(yīng)用提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象選取2015年1月至2018年3月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心接受IVF-ET/FET治療的患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≤40歲。②新鮮周期第5天移植囊胚1枚。③FET周期移植囊胚1枚。排除標(biāo)準(zhǔn)：①胚胎植入前遺傳學(xué)診斷/篩查周期。②子宮畸形和輸卵管積水。③多胎妊娠。④妊娠信息不完整。新鮮周期移植和凍融周期移植均按照囊胚質(zhì)量分為優(yōu)質(zhì)囊胚組和非優(yōu)質(zhì)囊胚組。

1.2控制性超排卵方案依據(jù)患者個(gè)體情況采用短方案、長(zhǎng)方案或超長(zhǎng)方案，垂體降調(diào)節(jié)采用促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑；根據(jù)患者年齡、體質(zhì)指數(shù)及基礎(chǔ)性激素水平等決定FSH啟動(dòng)劑量。4個(gè)以上卵泡直徑≥18 mm時(shí)，肌內(nèi)注射250 μg艾澤(默克雪蘭諾有限公司)。37 h后靜脈全麻下行取卵術(shù)。

1.3囊胚培養(yǎng)及評(píng)級(jí)取卵后3～6 h根據(jù)患者適應(yīng)證進(jìn)行IVF 或 ICSI。所有胚胎培養(yǎng)均采用序貫培養(yǎng)。培養(yǎng)液蓋油后置于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)6%CO2、5%O2和89%N2的CO2培養(yǎng)箱中。受精后第1天觀察受精情況；第2～3天觀察胚胎的細(xì)胞數(shù)及碎片，依據(jù)2011年伊斯坦布爾共識(shí)對(duì)胚胎進(jìn)行分級(jí)，冷凍2枚Ⅲ級(jí)以上胚胎后剩余胚胎行囊胚培養(yǎng)；第5～6天根據(jù)Garnder囊胚分級(jí)法對(duì)形成的囊胚進(jìn)行評(píng)級(jí)?？衫媚遗撸?期及3期以上、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)評(píng)分≥B。優(yōu)質(zhì)囊胚：3期及3期以上、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層評(píng)分均≥B。

1.4新鮮囊胚移植取卵術(shù)后第5天，根據(jù)患者情況，移植1枚囊胚，剩余優(yōu)質(zhì)及非優(yōu)質(zhì)囊胚均行玻璃化冷凍。所有移植囊胚未行激光輔助孵化。

1.5凍融囊胚移植囊胚玻璃化冷凍及解凍試劑、開(kāi)放式冷凍載體均購(gòu)自日本Kitazato公司，囊胚的冷凍及解凍按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，囊胚冷凍前均激光皺縮。凍融囊胚移植及內(nèi)膜準(zhǔn)備按文獻(xiàn)[6]方法進(jìn)行。

1.6妊娠及新生兒情況判定臨床妊娠、流產(chǎn)及異位妊娠參考文獻(xiàn)[7]定義，早產(chǎn)指妊娠≥28周且<37周間分娩。新生兒低體重指出生體重<2 500 g。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2組年齡、不孕時(shí)間、體質(zhì)指數(shù)、內(nèi)膜厚度、胎齡、出生身長(zhǎng)、出生體重、Apgar評(píng)分的比較采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn), 2組臨床妊娠率、異位妊娠率、流產(chǎn)率、早產(chǎn)率、剖宮產(chǎn)率、低體重率、男嬰比例、出生缺陷率的比較采用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1不同質(zhì)量囊胚新鮮周期移植基本情況及妊娠結(jié)局比較新鮮囊胚移植948例，其中移植優(yōu)質(zhì)囊胚613例,移植非優(yōu)質(zhì)囊胚335例。優(yōu)質(zhì)囊胚組臨床妊娠率高于非優(yōu)質(zhì)囊胚組，見(jiàn)表1。

表1 不同質(zhì)量囊胚新鮮周期移植基本情況及妊娠結(jié)局比較

2.2不同質(zhì)量囊胚新鮮周期移植后子代情況比較優(yōu)質(zhì)囊胚組和非優(yōu)質(zhì)囊胚組分別分娩新生兒354和143名。兩組胎齡、早產(chǎn)率、剖宮產(chǎn)率、出生身長(zhǎng)、出生體重、低體重率、Apgar評(píng)分、男嬰比例及出生缺陷率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2 不同質(zhì)量囊胚新鮮周期移植后子代情況比較

2.3不同質(zhì)量囊胚凍融周期移植基本情況及妊娠結(jié)局比較凍融囊胚移植1 549例，其中移植優(yōu)質(zhì)單囊胚710例，移植非優(yōu)質(zhì)單囊胚839例。優(yōu)質(zhì)囊胚組臨床妊娠率高于非優(yōu)質(zhì)囊胚組，流產(chǎn)率低于非優(yōu)質(zhì)囊胚組，見(jiàn)表3。

表3 不同質(zhì)量囊胚凍融周期移植基本情況及妊娠結(jié)局比較

2.4不同質(zhì)量囊胚凍融周期移植后子代情況比較優(yōu)質(zhì)囊胚組和非優(yōu)質(zhì)囊胚組分別分娩新生兒330和290名。兩組胎齡、早產(chǎn)率、剖宮產(chǎn)率、出生身長(zhǎng)、出生體重、低體重比率、Apgar評(píng)分、男嬰比例及出生缺陷率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表4。

表4 不同質(zhì)量囊胚凍融周期移植后子代情況比較

3 討論

囊胚是人類(lèi)胚胎發(fā)育的一個(gè)重要階段。囊胚移植可以提高輔助生殖技術(shù)的臨床妊娠率，降低異位妊娠率。目前認(rèn)為囊胚發(fā)育速度是評(píng)估囊胚發(fā)育潛能的重要指標(biāo)。先前研究[8-9]報(bào)道新鮮周期移植第5天囊胚較第6天囊胚具有更高的種植率，這些研究認(rèn)為囊胚發(fā)育速度慢、囊胚染色體異常及子宮內(nèi)膜同步性差導(dǎo)致了種植率降低。為了排除囊胚發(fā)育速度與子宮內(nèi)膜同步性的問(wèn)題，本研究中新鮮囊胚移植均為第5天單囊胚。如果第5天沒(méi)有囊胚形成，取消新鮮囊胚移植，冷凍第6天囊胚后行凍融周期移植。多胎妊娠可增加不良妊娠風(fēng)險(xiǎn)，為了更準(zhǔn)確反映囊胚質(zhì)量對(duì)子代的影響，本研究排除了雙囊胚移植患者和單囊胚移植后單卵雙胎患者。

本研究中新鮮周期移植優(yōu)質(zhì)囊胚組臨床妊娠率(66.23%)高于非優(yōu)質(zhì)囊胚組(49.85%)；凍融周期移植優(yōu)質(zhì)囊胚組及非優(yōu)質(zhì)囊胚組臨床妊娠率分別為56.62%和45.77%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與以往的研究[10-11]結(jié)果是一致的。研究[12-14]發(fā)現(xiàn)染色體整倍體率與囊胚質(zhì)量有關(guān)，低質(zhì)量囊胚的染色體非整倍體率高于優(yōu)質(zhì)囊胚。

新鮮周期移植優(yōu)質(zhì)囊胚組和非優(yōu)質(zhì)囊胚組分別分娩新生兒354和143名。凍融周期移植優(yōu)質(zhì)囊胚組和非優(yōu)質(zhì)囊胚組分別分娩新生兒330和290名。兩組胎齡、早產(chǎn)率、剖宮產(chǎn)率、出生身長(zhǎng)、出生體重、低體重率、Apgar評(píng)分、男嬰比例及出生缺陷率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與以往研究[15]結(jié)果一致。雖然非優(yōu)質(zhì)囊胚的臨床妊娠率較低，但是妊娠后不良產(chǎn)科和圍產(chǎn)期結(jié)局并沒(méi)有增加。

綜上所述，囊胚質(zhì)量與臨床妊娠率密切相關(guān)，優(yōu)質(zhì)囊胚的臨床妊娠率明顯高于非優(yōu)質(zhì)囊胚。但是不同質(zhì)量囊胚的出生結(jié)局及新生兒狀況無(wú)差異。對(duì)于囊胚評(píng)級(jí)為非優(yōu)質(zhì)的囊胚也能得到可觀的臨床妊娠率，其也不應(yīng)該被放棄。