姚清華 顏孫安 葉建洪 黃敏敏 陳美珍 林虬
摘要:【目的】研究聯(lián)苯菊酯等農(nóng)藥對銀耳(Tremellafuciformis Berk)子實體生長的影響,建議農(nóng)藥最大殘留限量( MRI),填補銀耳栽培無登記農(nóng)藥可用的空白?!痉椒ā恳糟y耳主栽品種之- Tr2l為研究對象,在原基形成后不同階段,以噴霧方式施用8組10種農(nóng)藥,分析子實體中農(nóng)藥及其代謝物殘留水平,評估長期膳食銀耳和全膳食暴露的健康風(fēng)險,通過計算提出對普通消費者農(nóng)藥最大殘留限量保護水平的建議。【結(jié)果】咪鮮胺乳油,2 000~4 000mg.L1的噠螨靈、啶蟲脒微乳劑,4 000 mg.L-1的異丙威乳油在部分噴施模式下會抑制銀耳生長。在建議模式下,噴施農(nóng)藥可以提高銀耳產(chǎn)量且農(nóng)藥殘留導(dǎo)致的長期膳食暴露和全膳食暴露的慢性健康風(fēng)險處于可接受水平。結(jié)合農(nóng)藥對銀耳生長的影響和風(fēng)險評估結(jié)果,建議銀耳中聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒、阿維菌素、咪鮮胺、吡蟲啉、異丙威、噠螨靈的農(nóng)藥殘留限量值( MRI)分別設(shè)為1.00、0.70、0.10、0.02、5.00、0.10、0.01 mg.kg-1。建議值對消費者的保護水平為3.07—306.92?!窘Y(jié)論】銀耳栽培過程可以適當(dāng)使用農(nóng)藥進行病蟲害防控,當(dāng)農(nóng)藥殘留低于建議的MRL時,不會對消費者健康水平造成不良影響。
關(guān)鍵詞:子實體;Tr21;農(nóng)藥;全膳食暴露;最大殘留限量
中圖分類號:S567.34
文獻標(biāo)志碼:A
文章編號:1008-0384( 2020) 10-1111-08
0 引言
【研究意義】銀耳(Tremellafuciformis Berk)是主產(chǎn)于我國的特色食藥兼用真菌,富含多糖、礦物質(zhì)元素等,具有抗氧化和提高人體免疫力等多種保健功效,備受消費者青睞[1-2]。銀耳的產(chǎn)量和品質(zhì)主要受栽培過程中菇蚊、螨蟲、鏈孢霉、綠色木霉等霉菌及病蟲害影響[3-4]。合理使用農(nóng)藥既不影響消費者健康,又能確保農(nóng)作物產(chǎn)量[5]。但與蓮霧等小宗作物類似,銀耳栽培缺乏登記農(nóng)藥和農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)以供參考[6-7]。其中,農(nóng)藥殘留限量值( MRL)是法律允許的施用農(nóng)藥后農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最高殘留水平,是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測重要的參考依據(jù)[3]。因此,在病蟲害防控時,菇農(nóng)常因無法科學(xué)地使用農(nóng)藥而導(dǎo)致銀耳農(nóng)藥殘留。不僅嚴重影響銀耳產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,且對消費者的健康存有潛在威脅[5,8]?!厩叭搜芯窟M展】近年來,關(guān)于銀耳農(nóng)藥使用及質(zhì)量安全的研究主要包括:農(nóng)藥殘留檢測方法[卅、農(nóng)藥及代謝物消解規(guī)律[10-11]、膳食暴露風(fēng)險評估[12-13]、烘干工藝[2,14]等。然而尚未見有關(guān)銀耳農(nóng)藥殘留全膳食暴露風(fēng)險評估和最大殘留限量值建議的研究報道?!颈狙芯壳腥它c】為了避免銀耳產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留引起的消費者膳食暴露健康風(fēng)險,應(yīng)科學(xué)開展銀耳中農(nóng)藥殘留水平監(jiān)測和潛在膳食暴露風(fēng)險評估?!緮M解決的關(guān)鍵問題】銀耳Tr21是我國銀耳主栽品種之一,具有朵形美、耳片白、產(chǎn)量高、品質(zhì)好等優(yōu)點[3]。本文以其為試驗對象,根據(jù)銀耳栽培實際選擇8組10種常用農(nóng)藥,研究其對銀耳子實體生長的影響,分析農(nóng)藥和其代謝物殘留規(guī)律并開展長期膳食和全膳食暴露風(fēng)險評估,建議銀耳中農(nóng)藥合理使用模式和農(nóng)藥MRL值,為完善銀耳良好農(nóng)業(yè)規(guī)范( GAP)栽培和消除消費者銀耳膳食疑慮提供參考依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
銀耳菌株Tr21,由古田縣建宏農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司提供。供試農(nóng)藥信息詳見表1。正己烷、乙腈等農(nóng)藥檢測分析用有機試劑,色譜純,購自美國賽默飛世爾科技有限公司;其他試劑為分析純,購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司;固相萃取填料,購自Agilent公司和Welch Material公司;農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品購自農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護科研監(jiān)測所;氣相色譜柱:SH-Rxi-5SilMS(30.0 mX 0.250 mm×0.25 μm),購自日本島津公司;液相色譜柱:Phenomenex Luna C8( 150 mmX2.0 mm×3.0 μm),購自美國菲羅門公司。
1.2 儀器與設(shè)備
氣相色譜儀( GC-2010 plus) -三重四極桿質(zhì)譜( TSQ8040),島津公司;高效液相色譜儀(Agilent1200) -三重四極桿質(zhì)譜(Agilent 6460),安捷倫科技有限公司;吹氮濃縮儀(Reati-ThermⅢHRATING/STIRRING MODMLE),PIERCE公司;超聲儀(KD-500DE),昆山市超聲儀器有限公司;渦旋混合器,德國IKA公司;離心機(Anke TDL-5-A),上海安亭科學(xué)儀器廠。
1.3 試驗方法
1.3.1 農(nóng)藥噴施試驗 銀耳栽培試驗在古田縣建宏農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司實施,工廠化模式栽培,環(huán)境參數(shù)可控。試驗共有4種農(nóng)藥噴施模式:原基形成時,20 d后采摘(M1);原基形成10 d,10 d后采摘( M2);原基形成時噴藥1次,間隔Sd后第2次噴藥,15 d后采摘(M3);原基形成后10 d時噴藥1次,間隔5d后第2次噴藥,Sd后采摘(M4)。農(nóng)藥噴施濃度為1 000、2 000、4 000 mg.L-1,噴施量為1 800 mL。試驗共12個處理。每個處理含3個重復(fù),每個重復(fù)10個菌棒,共360個菌棒。以噴施同樣體積的純凈水作為空白對照。
1.3.2銀耳生長指標(biāo) 噴施試驗后,隨機選取5個菌棒,采用游標(biāo)卡尺隨機測定銀耳子實體直徑( n=5)。數(shù)據(jù)以“Mean±SD”表示。
1.3.3農(nóng)藥殘留測定 每組隨機選取銀耳5朵,勻漿,待測。農(nóng)藥及其代謝物提取、分析參照GB23200.113[15]和文獻[9]。方法線性良好(R2>0.995)、低中高3個添加水平回收率70%~110%、定量限為0.01 mg-kg-l,滿足試驗的要求。
1.3.4長期膳食暴露風(fēng)險評估 按公式(l)計算普通人群長期攝食銀耳的農(nóng)藥慢性暴露風(fēng)險(%ADI)。
式中:C為銀耳中農(nóng)藥殘留水平( mg-kg-l),F(xiàn)為每日膳食量( 30g) [16,17],bw為平均體重(53.23 kg)[18]。ADl為每日容許攝人量(Acceptable daily intake,mg.kg-1bw day-1)[15]。 %ADI越小風(fēng)險越小,當(dāng)%ADI< 100%時,健康風(fēng)險可接受;當(dāng)%ADI≥100%時,表示健康風(fēng)險不可接受。
1.3.5 全膳食暴露風(fēng)險評估 本研究采用農(nóng)藥殘留試驗值(C)或最大殘留限量(Maximum residual limit.MRL),按公式(2)~(5),分別估算國家每日攝入量( National estimated daily intake,NEDI)、理論每日最大攝人量(Theory maximum daily intake,TMDI)、慢性風(fēng)險商( Chronic Risk Quotient,RQc)、消費者保護水平( Protection levels against the chronic dietaryrisk for consumers,CPLc)。其中RQc< 100%時,農(nóng)藥殘留對一般人群的膳食健康風(fēng)險可接受;CPLc值越高,保護水平越高,大于1表明建議的MRL值達到可接受的保護水平。
式(2): NEDI=∑[Ci(MRLi)×Fi]
式(3):TMDI=∑(MRLi×Fi)
式( 4): RQc=NEDI/( ADI×bw)×100%
式( 5): CPLc=( ADI×bw) /TMDI
式中:Ci為銀耳農(nóng)藥殘留水平,其他類食物用MRL1代替。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
通過SPSS22.0比較試驗組與對照組間的差異性(差異水平a=0.05)。
2 結(jié)果與分析
2.1 農(nóng)藥對銀耳生長的影響
農(nóng)藥對銀耳Tr21生長的影響見圖1。噴施模式為M1,噴施濃度為1 000~4 000 mg.L-1時,吡蟲啉粉劑,噠螨靈、啶蟲脒微乳劑,丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑處理組和1 000、2 000 mg.L-1異丙威乳油處理組的銀耳子實體直徑顯著高于CK(P<0.05);噴施模式為M2,噴施濃度為1 000~4 000 mg.L-1時,吡蟲啉粉劑,丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑處理組和2 000 mg.L-1聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒微乳劑,4 000 mg.L-1阿維菌素乳油,阿維菌素乳油,1 000 mg.L-1異丙威乳油處理組銀耳子實體直徑顯著高于CK( P<0.05),而高于2 000 mg.L-1噠螨靈、啶蟲脒微乳劑的處理會導(dǎo)致銀耳子實體生長停滯、潰爛;噴施模式為M3,噴施濃度為1 000~4 000 mg.L-1的聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒微乳劑和4 000 mg.L-1阿維菌素乳油,1 000、2 000mg.L-1丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑處理組銀耳子實體直徑顯著高于CK( P< 0.05),而施用咪鮮胺乳油或高于2 000 mg.L-1的噠螨靈、啶蟲脒微乳劑,4 000mg.L-1的丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑會導(dǎo)致銀耳子實體生長停滯,造成絕收;噴施模式為M4,噴施濃度為1 000~4 000 mg.L-1的丁硫克百威,毒死蜱顆粒劑,1 000~2 000 mg.L-1的聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒微乳劑或阿維菌素乳油,1 000 mg.L-1的吡蟲啉粉劑或噠螨靈、啶蟲脒微乳劑,2 000~4 000 mg.L-1的異丙威乳油會顯著促進銀耳子實體生長(P<0.05),而施用咪鮮胺乳油或高于2 000 mg.L-1的噠螨靈、啶蟲脒微乳劑會導(dǎo)致銀耳子實體生長停滯,造成絕收。
2.2 銀耳中農(nóng)藥殘留
10種農(nóng)藥及其代謝物在銀耳中的最終殘留水平如表2示。受采摘間隔期影響,銀耳中農(nóng)藥殘留量在4種噴施模式下,基本呈現(xiàn)M1、M3、M2、M4遞增趨勢,其中吡蟲啉、異丙威在M4模式的殘留水平遠高于其他3種模式。在采摘間隔期較短的M4、M2、M3組,噴施農(nóng)藥的濃度是影響銀耳中農(nóng)藥殘留水平的關(guān)鍵因素。乙酰甲胺磷乳油處理組,農(nóng)藥及其代謝物(甲胺磷)的殘留水平均低于檢測方法定量限(0.01 mg.kg-1)。丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑處理組,農(nóng)藥及其代謝物(克百威)的殘留水平也較低。其中丁硫克百威殘留水平低于檢測方法定量限( 0.01 mg.kg-1),克百威殘留水平為ND~0.03 mg.kg-1,毒死蜱殘留水平為ND~0.28 mg.kg-1。但鑒于國內(nèi)已禁止在蔬菜等作物上使用乙酰甲胺磷、丁硫克百威、毒死蜱且其或代謝物具有中高毒性,故也不建議其在銀耳栽培中使用。阿維菌素在M2、M3、M4噴施模式下,4 000 mg.L-1的噴施濃度會導(dǎo)致銀耳中殘留水平分別達到1.14、1.80、3.56 mg.kg-1。按我國農(nóng)藥毒性分級標(biāo)準(zhǔn),阿維菌素屬于高毒農(nóng)藥,在使用過程應(yīng)注意控制施用量。連續(xù)2次噴施咪鮮胺會造成銀耳中咪鮮胺殘留水平明顯上升(M2)。2.3長期膳食暴露風(fēng)險評估
對除乙酰甲胺磷乳油,丁硫克百威、毒死蜱顆粒劑2組農(nóng)藥外的6組農(nóng)藥開展普通人群長期膳食暴露評估,結(jié)果見表3。銀耳中聯(lián)苯菊酯、啶蟲脒、吡蟲啉、噠螨靈殘留最高水平的慢性膳食攝入風(fēng)險(%ADI)分別為18%、0.56%、14%、7%,遠小于100%,表明這4種農(nóng)藥的風(fēng)險水平可接受。異丙威、阿維菌素殘留最高水平的慢性膳食攝人風(fēng)險(%ADI)分別為375%、200%,遠超過100%,表明在部分施用模式下,這2種農(nóng)藥的風(fēng)險水平不可接受。因銀耳一種食物咪鮮胺殘留的膳食風(fēng)險已分別達到22 %、38%、41%。故在M2模式下的咪鮮胺殘留慢性膳食攝入風(fēng)險(%ADI)也應(yīng)予以注意。