血清淀粉樣蛋白A 的檢測(cè)方法及臨床應(yīng)用進(jìn)展

梁知銳，楊開(kāi)洪，徐耀祥

陽(yáng)江市中醫(yī)醫(yī)院 （廣東陽(yáng)江 529500）

血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）是一種正向急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，是載脂蛋白家族中的一種異質(zhì)類蛋白質(zhì)，相對(duì)分子量約為12 000。作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，SAA 的作用與C 反應(yīng)蛋白相似，是感染性疾病的一種靈敏度指標(biāo)，其臨床意義是輔助診斷感染性疾病的類型，通過(guò)檢測(cè)其含量可以評(píng)估炎癥的發(fā)生及發(fā)病過(guò)程，有助于臨床醫(yī)師觀察治療效果。SAA 在炎癥防御、免疫應(yīng)答和脂質(zhì)代謝等方面發(fā)揮重要作用，可用于許多疾病的輔助診斷、治療效果觀察和預(yù)后評(píng)價(jià)[1]。本研究對(duì)SAA 的基因結(jié)構(gòu)、生物學(xué)功能、檢測(cè)方法及臨床應(yīng)用作簡(jiǎn)要綜述。

1 SAA 基本介紹

1.1 SAA 的結(jié)構(gòu)與合成

人類編碼SAA的基因位于常染色體11p15.1，長(zhǎng)度大概為150 kb，包含 4種不同的編碼基因，分別為SAA1、SAA2、SAA3、SAA4；除SAA3由 3個(gè)外顯子和 2個(gè)內(nèi)含子組成，其他基因都含有4個(gè)外顯子和 3個(gè)內(nèi)含子組成。這些編碼基因編碼的蛋白，構(gòu)成SAA家族，包括不同表達(dá)形式的載脂蛋白、急性期SAA（A-SAA）和結(jié)構(gòu)型SAA（C-SAA）。其中SAA1和SAA2編碼A-SAA；SAA4編碼C-SAA；SAA3是假基因，不參與SAA合成[2]。發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，在糖皮質(zhì)激素調(diào)控下，肝臟中巨噬細(xì)胞和纖維母細(xì)胞釋放的白細(xì)胞介素-1（interleukin-1，IL-1）和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）使IL-6分泌增加，刺激肝細(xì)胞產(chǎn)生A-SAA[3]。

1.2 SAA 的生物學(xué)功能

SAA 具有以下生物學(xué)功能。（1）SAA 可作為中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞和單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞的趨化因子[4]。（2）SAA 能調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子的表達(dá)，包括單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）、TNF-α、IL-6及IL-8等。（3）SAA 屬于載脂蛋白家族，擁有載脂蛋白家族的生物特性，即可參與脂類的代謝并增強(qiáng)脂質(zhì)與巨噬細(xì)胞的親和力[5]。（4）在組織發(fā)生損傷時(shí)，SAA通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)降解酶的表達(dá)，在損傷的組織修復(fù)過(guò)程中起到重要作用[6]。（5）當(dāng)濃度超過(guò)10～60 mg/L 時(shí)，SAA 可刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖、黏附、侵襲和刺激毛細(xì)管樣結(jié)構(gòu)的形成，促進(jìn)體內(nèi)新血管的形成。因此，SAA 被認(rèn)為是血管生成蛋白[7]。

2 SAA 檢測(cè)方法

SAA 的常見(jiàn)檢測(cè)方法包括膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、膠乳增強(qiáng)免疫比濁法。其中膠乳增強(qiáng)免疫比濁法最先進(jìn)，靈敏度更高，線性范圍更廣，操作也相對(duì)簡(jiǎn)便，在臨床中被廣泛采用。研究表明，膠乳增強(qiáng)免疫比濁法的分析靈敏度為3.52 mg/L；批內(nèi)變異系數(shù)＜8%、日間＜10%；抗干擾性較強(qiáng)，血紅蛋白≤4.0 g/L、膽紅素≤400 μmol/L、類風(fēng)濕因子≤1 621 U/L、甘油三酯≤10 mmol/L 對(duì)測(cè)定無(wú)影響[8]。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法利用吸附在直徑幾十到幾百納米的膠乳微粒上的SAA 抗體捕捉測(cè)試樣品中的SAA，從而形成微粒之間的交聯(lián)，改變了溶液的散射度或者透射吸光度（即濁度）。通過(guò)測(cè)量溶液的散射度或者透射吸光度的變化，可以根據(jù)定標(biāo)曲線定量地計(jì)算出測(cè)試樣品中血清淀粉樣蛋白A 的濃度。該測(cè)試方法既可以在通用的大型自動(dòng)生化分析儀上運(yùn)用，也可以在特定蛋白分析儀等小型的即時(shí)檢測(cè)（point-of-care testing，POCT）設(shè)備上采用，有很強(qiáng)的適用性，可以很好地滿足我國(guó)從大型三甲醫(yī)院到社區(qū)基層醫(yī)院的使用需求。

3 SAA 在臨床中的應(yīng)用

3.1 SAA 在感染性疾病中的應(yīng)用

在臨床上，鑒別診斷患者是細(xì)菌性或病毒性感染主要通過(guò)C 反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞的分類聯(lián)合檢測(cè)[9]。作為炎癥及進(jìn)展性疾病輔助診斷最為傳統(tǒng)的指標(biāo)之一，白細(xì)胞計(jì)數(shù)是臨床醫(yī)師初步診斷是否為感染性疾病的指標(biāo)之一，但其特異性不強(qiáng)。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，發(fā)熱患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)陽(yáng)性率僅為34.3%， 65.7%的白細(xì)胞計(jì)數(shù)為陰性，無(wú)法診斷是否存在感染[10]。C 反應(yīng)蛋白作為細(xì)菌性感染的靈敏度指標(biāo)，靈敏性高，半衰期短，在人體發(fā)生炎癥后6～8h明顯升高，其升高幅度與感染程度有關(guān)。當(dāng)患者病情好轉(zhuǎn)時(shí)，C 反應(yīng)蛋白迅速恢復(fù)正常。因此，C 反應(yīng)蛋白可反映炎癥感染情況，但當(dāng)發(fā)生病毒感染時(shí)，病毒在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，細(xì)胞膜受體破壞，細(xì)胞膜的成分發(fā)生改變，暴露磷脂蛋白質(zhì)，無(wú)法觸發(fā)組織產(chǎn)生C 反應(yīng)蛋白[11]。當(dāng)人體感染細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體后，肝臟分泌大量的SAA 進(jìn)入血液，5～6 h 后SAA 水平可升高1 000倍[12]，且SAA 半衰期短（約50 min），因此，SAA 可作為感染性疾病診斷指標(biāo)。SAA 靈敏度高于C 反應(yīng)蛋白，在病毒感染早期迅速升高，而在細(xì)菌感染中，SAA 相比其他正向急性時(shí)相反應(yīng)蛋白最先升高。因此，SAA 診斷感染疾病活動(dòng)期的靈敏性優(yōu)于C 反應(yīng)蛋白，能夠?yàn)榕R床提供更好的參考價(jià)值[13]。在臨床實(shí)際應(yīng)用中，SAA、C 反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類 4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)感染患者病因的診斷準(zhǔn)確性，減少誤診率，正確指導(dǎo)臨床醫(yī)師用藥，同時(shí)可觀察病情的動(dòng)態(tài)變化。

3.2 SAA 在冠心病中的應(yīng)用

冠心病（coronary atherosclerotic heart disease，CHD）是由于冠狀動(dòng)脈發(fā)生硬化導(dǎo)致管腔狹窄，引起心肌壞死，血管內(nèi)皮細(xì)胞接觸損傷細(xì)胞，人體的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，引起局部或者全身的炎癥反應(yīng)。CHD 屬于一種慢性炎癥性疾病，其炎癥反應(yīng)程度與粥樣板塊的硬化密切相關(guān)[14]。SAA 作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，與評(píng)估CHD 嚴(yán)重程度的Gensini 評(píng)分系統(tǒng)成正相關(guān)，SAA 水平與CHD 患者冠狀動(dòng)脈病變程度成正比關(guān)系，因此，SAA 可作為CHD 發(fā)生及預(yù)后情況的預(yù)測(cè)指標(biāo)[15]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中均有 SAA 的沉積和SAA mRNA 的表達(dá)，可促進(jìn)血栓形成引起心梗[16]。此外，Zewinger 等[17]在小鼠身上研究發(fā)現(xiàn)SAA 與 高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C） 存在關(guān)聯(lián)，SAA 可以取代載脂蛋白A1與HDL 結(jié)合，導(dǎo)致HDL 不能有效地進(jìn)行膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)，影響脂質(zhì)的代謝，增加了膽固醇的內(nèi)流和沉積，膽固醇濃度增高導(dǎo)致發(fā)生CHD 等心血管疾病的危險(xiǎn)性增高。因此，SAA 檢測(cè)對(duì)于CHD 發(fā)生、病情發(fā)展及療效觀察具有重要的作用。

3.3 SAA 在腫瘤中的應(yīng)用

SAA 與腫瘤具有一定的關(guān)聯(lián)性，但目前尚不明確腫瘤患者血清中SAA 水平升高是由腫瘤相關(guān)性炎癥引起，還是副腫瘤綜合征的結(jié)果，但是 SAA 水平是多種腫瘤非常敏感的血清標(biāo)志物[18]。SAA 水平與腫瘤的浸潤(rùn)程度、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等具有一定相關(guān)性[19]。在消化系統(tǒng)腫瘤、呼吸道系統(tǒng)腫瘤、泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤等多種腫瘤患者中發(fā)現(xiàn)，SAA 水平均有升高，但升高幅度各不相同， 如胃腺癌患者的SAA 水平是健康人群的3.7倍[20]。SAA 水平與腫瘤大小、是否轉(zhuǎn)移及惡性程度有明顯的相關(guān)性，因此，SAA 水平可以反映腫瘤患者的療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后情況。這說(shuō)明SAA 可以作為一種監(jiān)測(cè)腫瘤疾病進(jìn)程以及輔助診斷腫瘤種類的一種腫瘤標(biāo)志物。

3.4 SAA 在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的應(yīng)用

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是以侵蝕性、對(duì)稱性的多關(guān)節(jié)炎為主要臨床癥狀的慢性自身免疫性疾病。相關(guān)研究表明[21]，RA 患者血清中SAA 水平升高，而使用改善患者病情的藥物后，SAA 水平下降，這說(shuō)明SAA 參與RA 的炎癥反應(yīng)過(guò)程； SAA 水平與RA 的活動(dòng)性密切相關(guān)，可作為估計(jì)RA 疾病嚴(yán)重程度的一個(gè)很好的血清學(xué)指標(biāo)[22]。SAA與C反應(yīng)蛋白和紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）相比，SAA 對(duì)于判斷RA 的活動(dòng)性和預(yù)后情況更敏感。

3.5 其他疾病

SAA 對(duì)于移植排斥反應(yīng)、2型糖尿病、慢性呼吸系統(tǒng)疾病等疾病有一定的輔助診斷作用。

綜上所述，SAA 作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，近年來(lái)在臨床中得到廣泛的應(yīng)用，但SAA 的生物學(xué)功能及相關(guān)疾病的作用機(jī)制尚不完全明確，需要進(jìn)一步深入研究。