雞傳染性法氏囊病流行特點(diǎn)、診斷與防治

蔡亞瑋，李宇薪

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 071001）

雞傳染性法氏囊病(Infectiousofbursaldisease，IBD)，又稱傳染性法氏囊炎、傳染性腔上囊炎、甘布羅病、禽腎病，是由傳染性法氏囊病病毒(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)引起的禽重大傳染疾病之一，現(xiàn)已遍及全世界養(yǎng)禽業(yè)，通常發(fā)作急、危害大、呈高度接觸性傳染，于1957 年首次發(fā)現(xiàn)于美國(guó)特拉華州甘布羅鎮(zhèn)的肉雞群中[1]。 該病可引起雞法氏囊的出血腫大或嚴(yán)重壞死，法氏囊作為雞的體液免疫器官， 在感染此病后將會(huì)出現(xiàn)不同程度的免疫抑制。 我國(guó)作為禽年飼養(yǎng)總量位居世界第一的大國(guó)，自1979 年首于廣州出現(xiàn)此病[2]，至今仍未全面得到控制，給養(yǎng)禽業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。

1 流行病學(xué)

1.1 病原

IBDV 屬于雙RNA 病毒科，禽雙RNA 病毒屬，主要對(duì)雞的法氏囊有親嗜性，會(huì)破壞宿主體內(nèi)所有的淋巴細(xì)胞，尤其是B 淋巴細(xì)胞，在感染發(fā)病期間，法氏囊中的含毒量最高，其次就是脾臟。 該病毒無囊膜，僅由核酸和衣殼組成，發(fā)育成熟的病毒粒子具備雙層裸露衣殼。 IBDV 多為六角形，呈對(duì)稱二十面體，粒子直徑約為60nm，有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在雞胚成纖維細(xì)胞中復(fù)制繁殖的病毒粒子直徑約為20～30nm[3]。 該病毒抵抗力較強(qiáng)，對(duì)乙醚和氯仿不敏感且強(qiáng)酸環(huán)境下仍具有活性，在pH=12 或70℃條件下處理30min 可滅活，可長(zhǎng)時(shí)間存活于雞舍[4]。目前已知該病毒有2 個(gè)血清型，血清Ⅰ型僅感染雞；血清Ⅱ型對(duì)雞和火雞一般均不致病或致病力很弱[1，2，5]。Lee 和Lukert 曾提出可能存在第Ⅲ個(gè)血清型，目前仍無足夠資料可證實(shí)。按照毒力強(qiáng)弱可將IBDV 分為：強(qiáng)毒株、中毒株和弱毒株三種，近年來有研究發(fā)現(xiàn)，從接種標(biāo)準(zhǔn)疫苗株而引起免疫失敗的雞群中可分離到IBDV 的超強(qiáng)毒株(vvIBDV)或變異株(variant)，分離將的強(qiáng)毒物將引起雞不同于一般炎癥或水腫類型的法氏囊損傷，死亡率高達(dá)70%，目前vvIBDV 在我國(guó)已普遍存在，由vvIBDV 引起的IBD 常與雞大腸桿菌病、新城疫等疾病混合感染[3，6]，在使死亡率持續(xù)升高的同時(shí)也使得IBD 的防治復(fù)雜化。

1.2 易感動(dòng)物

本病毒的自然宿主為雞和火雞。 病雞和帶毒雞是主要傳染源，健康雞可經(jīng)呼吸道、種蛋和消化道感染，常常是通過直接或間接接觸被污染的飲食、糞便、雞舍用具、墊料、塵土、昆蟲、飼養(yǎng)員的衣服等途徑感染此病，甲蟲和鼠也可間接感染此病[6]。 在研究最早期，人們普遍認(rèn)為雞是唯一自然感染發(fā)病的動(dòng)物，其他禽類不出現(xiàn)此病，直到1987 年，流行病學(xué)研究顯示，鴨、鵝、鷗等可均作為自然感染發(fā)病的動(dòng)物[5，7，8]。 IBDV 可感染各年齡段的雞[9]，臨床上IBD 病變表現(xiàn)最早可見于1 日齡幼雛，最晚可見于15 周齡左右的產(chǎn)蛋雞群中。 以3～6 周齡的仔雞最為易感，大于6 周齡的雞具備一定的抵抗力，小于3 周齡的雛雞感染后，通常不引起明顯的病變表現(xiàn)，僅會(huì)引起嚴(yán)重的免疫抑制。 研究發(fā)現(xiàn)，初感染IBD 的易感雞群多呈急性型發(fā)作， 通常于感染后第3 天開始死亡，于5～7d 達(dá)死亡最高峰，后迅速下降[3，10]。 根據(jù)IBDV 的感染特征以及IBD 的發(fā)病特點(diǎn)可為臨床的醫(yī)療診斷以及禽類養(yǎng)殖方法的選擇提供基礎(chǔ)。

1.3 發(fā)病特點(diǎn)

IBD 發(fā)病通常具有以下特征：發(fā)生突然、發(fā)病率高、病程短、死亡率上升迅速且短時(shí)間后又迅速下降，呈“尖峰式死亡曲線”，且未發(fā)生死亡的病雞康復(fù)較為迅速。 由于IBD 會(huì)引起雞免疫抑制，故感染此病的雞相較于健康雞更易出現(xiàn)并發(fā)癥和繼發(fā)癥，對(duì)新城疫、衣原體、曲霉菌等疾病更易感[5，11-13]。

該病一年四季可發(fā)，北方地區(qū)一般多發(fā)生于每年6～9 月，南方地區(qū)一般多發(fā)生于4～10 月，潮濕悶熱的環(huán)境將更容易滋生大量昆蟲，加速此病的傳播，且易和球蟲病發(fā)生交叉感染，影響法氏囊的免疫效果，為后續(xù)治療帶來難題[3，6]。

2 臨床癥狀

該病潛伏期通常為2～3d，發(fā)病率高達(dá)60%～70%，死亡率通常狀況下為15%～20%，以腹瀉、糞便呈水樣、高度虛弱、死亡為主要臨床癥狀，變異株則常引起雞胚的肝臟壞死和脾腫大。 發(fā)病初期可見部分雞自啄泄殖腔，部分雞出現(xiàn)精神萎靡，羽毛蓬亂，懼寒怕冷，閉目呆立，體溫升高1℃～1.5℃，隨后出現(xiàn)腹瀉，排黃白色粘稠或水樣糞便，肛門四周有糞便粘附，體重明顯下降，嚴(yán)重時(shí)頭可下垂至地面，閉眼呈昏睡狀態(tài)，最終因體重嚴(yán)重下降，機(jī)體脫水，極度衰弱而死亡[3，4，6，9，10]。

3 鑒別診斷

3.1 臨床診斷

主要通過了解雞群的生活狀況、身體狀況、疾病發(fā)生和發(fā)展情況。觀察病雞糞便形態(tài)，被毛狀態(tài)，是否出現(xiàn)自啄肛門。 在高度易感雞群中呈急性爆發(fā)、傳播迅速、高峰死亡且康復(fù)迅速、法氏囊出現(xiàn)“紫葡萄樣”外觀等特點(diǎn)，結(jié)合流行病學(xué)特點(diǎn)可做出初步診斷。

該病在診斷過程中應(yīng)注意與雞新城疫、球蟲病、雞馬立克氏病進(jìn)行區(qū)分。 雞新城疫多表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀且無法氏囊腫大，球蟲病與本病癥狀相似， 但前者會(huì)出現(xiàn)血性下痢并且刮取損害部位的粘膜鏡檢后可以觀察到球蟲。 雞馬立克氏病是一種淋巴組織增生的腫瘤性疾病，以肢（翅）麻痹為主要表現(xiàn)[11，12]。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

本病確診以及判定其亞臨床型病例需做實(shí)驗(yàn)室診斷， 主要包括病毒分離鑒定和血清學(xué)試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)， 下面就常用斷方法展開敘述。

3.2.1 病毒的分離鑒定

對(duì)于IBDV 的分離培養(yǎng)，雞胚接種是最好手段。 在實(shí)際操作中，病毒的初次分離，應(yīng)選用無母源抗體的雞胚進(jìn)行病毒分離，一般選擇5～7 日齡雞胚作卵黃囊接種，選擇9～11 日齡雞胚作絨毛尿囊膜或尿囊腔接種。 大量實(shí)驗(yàn)顯示，絨毛尿囊膜接種方法敏感性最高[1]，該方法亦適合分離培養(yǎng)IBDV 變異株，效果較好且不會(huì)致死雞胚。 此外，IBDV 也可在細(xì)胞中培養(yǎng)繁殖，通常使用雞胚成纖維細(xì)胞增殖該病毒， 也可使用雞胚法氏囊細(xì)胞、 腎細(xì)胞培養(yǎng)。

3.2.2 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGP)

瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)(Agardiffusiontest，AGP)主要是利用可溶性抗原與相應(yīng)的抗體在含有電解質(zhì)凝膠并具備一定溫度的瓊脂或者瓊脂糖中的一種沉淀試驗(yàn)。 該方法操作簡(jiǎn)單快速， 無需復(fù)雜儀器，結(jié)果肉眼可見，廣泛用于IBDV 的檢測(cè)。首先將瓊脂平板制備完成，后進(jìn)行打孔加樣，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)陽性血清與抗原之間出現(xiàn)明顯的沉淀線，且被檢血清與抗原之間也形成沉淀線時(shí)，判定結(jié)果為陽性，反之為陰性。 1988 年McNulty 團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)利用AGP 還可區(qū)分IBDV 的標(biāo)準(zhǔn)毒株和變異株。 但由于該方法敏感性較低，故不適用 于 感 染 早 期 的 鑒 別[14，15]。

3.2.3 病毒中和試驗(yàn)(VN)

病毒中和試驗(yàn)(Virusneutralizationtest，VN)是利用病毒特異性抗體與相應(yīng)病毒結(jié)合后使病毒喪失感染能力的一種檢測(cè)技術(shù)，又稱“病毒中和”，常用于實(shí)驗(yàn)室病毒鑒定和流行病學(xué)調(diào)查。我國(guó)于1983 年由劉福安初次建立IBDV 中和試驗(yàn)方法，96h 可判定結(jié)果，相較于AGP 具有更好的敏感性和特異性[16]。

在實(shí)驗(yàn)室中廣泛使用的還有單克隆抗體探針技術(shù)、 套式PVR 技術(shù)(RT-PCR-RTLP)等，但在生產(chǎn)實(shí)踐中仍主要以傳統(tǒng)診斷技術(shù)如IBDV 分離鑒定、AGP 等為主[14，17]。

4 預(yù)防治療

4.1 預(yù)防措施

本病的預(yù)防目前主要采取以下措施：嚴(yán)格做好消毒工作，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高種雞母源抗體水平，對(duì)雛雞做好科學(xué)的免疫接種。

在防控該病時(shí)，首先應(yīng)嚴(yán)格封鎖發(fā)病雞舍并進(jìn)行嚴(yán)格消毒，消毒液以甲醛溶液、含碘制劑和次氯酸鈉效果最好。 著重注意育雛室的消毒， 應(yīng)將完成免疫接種的雛雞置于完全徹底消毒的育雛室中飼養(yǎng)[18]。 雞舍的溫度和濕度也應(yīng)保持在適宜穩(wěn)定狀態(tài)，及時(shí)對(duì)病雞群進(jìn)行有效治療，避免雞群出現(xiàn)繼發(fā)感染，改善飼養(yǎng)管理并消除可引起應(yīng)激的外部條件。 對(duì)于未發(fā)病的雞舍，可適當(dāng)在飲食中添加抗病毒藥物，有效降低健康雞患病的可能。

免疫接種是預(yù)防此病最重要的措施，尤其是種雞群的免疫，在疫苗接種后可通過其母源抗體傳遞給子代。 通常使用弱毒疫苗和滅活疫苗兩大類，對(duì)14～16 日齡雛雞進(jìn)行弱毒疫苗飲水，對(duì)24～26 日齡雛雞進(jìn)行中等毒力疫苗飲水，在開產(chǎn)前將進(jìn)行弱毒疫苗的肌肉注射。 實(shí)驗(yàn)人員發(fā)現(xiàn)，若對(duì)在18～20 周齡和40～42 周齡的種雞進(jìn)行2 次IBD 油佐劑滅活疫苗的接種， 雛雞可獲得較高水平的母源抗體，對(duì)雛雞起到較好的保護(hù)作用，可防止雛雞的早期感染和免疫抑制[18]。 應(yīng)注意的是，高水平母源抗體將干擾雛雞的主動(dòng)免疫，因此在平時(shí)預(yù)防時(shí)，應(yīng)對(duì)雛雞選擇合適的接種疫苗和首免日齡。 除傳統(tǒng)的減毒活疫苗和滅活疫苗，現(xiàn)市面上出現(xiàn)多種新型疫苗，為不斷演變的IBDV 病毒的防控提供支撐，包括含多個(gè)IBDV 表位、具有良好免疫原性的亞單位疫苗，在雞體內(nèi)引起強(qiáng)烈體液免疫應(yīng)答的免疫復(fù)合物疫苗[19]，可避免活疫苗接種后可能出現(xiàn)免疫抑制的活病毒載體疫苗[20]以及解決IBDV 滅活疫苗生產(chǎn)成本高和產(chǎn)量不穩(wěn)定問題的病毒樣顆粒疫苗等[21]。

4.2 藥物治療

近年來關(guān)于IBD 西藥治療的研究較多，常規(guī)西醫(yī)療法主要在感染初期對(duì)病雞肌肉注射高免血清注射液或使用高免卵黃抗體制劑， 其治療效果取決于高免卵黃液的質(zhì)量即抗體水平高低以及發(fā)病所處的階段[22]，若雞群處于嚴(yán)重感染期，則需注射2～3次高免卵黃抗體才能徹底康復(fù)。 在病雞日常飲水中加入“口服補(bǔ)液鹽”并在飼料中添加抗菌、抗球蟲藥物可防止繼發(fā)感染。 此外應(yīng)著重注意患病雞群的飼養(yǎng)管理、做好雞舍消毒、盡量避免雞群出現(xiàn)應(yīng)激、保證充足飲水，促使病雞盡快康復(fù)。

為尋求更為簡(jiǎn)單實(shí)用的西藥治療方法， 鄭繼昌團(tuán)隊(duì)依據(jù)IBD 致死原因以及藥理學(xué)分析設(shè)計(jì)出由堿式碳酸錫、 磺胺甲惡哇、甲氧節(jié)淀三種藥按3∶1∶0.2 的比例配成的處方藥(簡(jiǎn)稱“秘磺合劑”)，可治療自然發(fā)病雞和超強(qiáng)毒株人工感染發(fā)病雞，根據(jù)發(fā)病情況選擇不同用法用量： 重病雞口服每只0.3g/次，1 天1 次，連服3～5d；輕病雞混飼料口服每只0.6g/d，連續(xù)用藥3～5d，可發(fā)揮良好的中和胃酸、防脫水、止瀉以及抗細(xì)菌繼發(fā)感染的作用[23]。

在中藥治療上，國(guó)內(nèi)有人用黃連解毒湯治療IBD 發(fā)現(xiàn)有著較好療效。 臨床實(shí)驗(yàn)顯示黃連解毒湯制劑治療IBD 成功率為90.2%，降低死亡率61.6%[22]。馮善祥發(fā)現(xiàn)紫錐菊復(fù)合物可以減弱IBDV 強(qiáng)毒株對(duì)雛雞免疫器官的損害[24]。在此病易感的季節(jié)，適當(dāng)結(jié)合黃芩、雙花、茯苓、黨參、白藥子、甘草等藥材，將對(duì)此病有良好的抑制治療效果。