• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    拉曼光譜技術(shù)在乳腺癌臨床應(yīng)用方面的研究進(jìn)展

    2020-02-12 05:39:18申李勝男李思敏
    關(guān)鍵詞:曼光譜拉曼細(xì)胞系

    申李勝男,李思敏,李 倩,麻 帥,韓 冰

    (吉林大學(xué)第一醫(yī)院乳腺外科,吉林 長(zhǎng)春 130021)

    2018年,世界衛(wèi)生組織宣布有62.7萬(wàn)女性死于乳腺癌,占女性因惡性腫瘤死亡人數(shù)的15%,全世界約有200萬(wàn)新確診病例[1]。在過(guò)去的幾十年里,全球乳腺癌發(fā)病率持續(xù)增加,其中發(fā)達(dá)地區(qū)的發(fā)病率更高[2-4]。乳腺癌篩查通常采用影像學(xué)(鉬靶和超聲相結(jié)合)和體格檢查的方式,可疑為乳腺癌的患者需進(jìn)行穿刺或切除活檢,其中70%~90%的患者在活檢中確診為良性,患者承受了不必要的創(chuàng)傷、巨大的精神壓力和高額的醫(yī)療費(fèi)用[5-6]。乳腺癌保乳手術(shù)采用不同顏色染料標(biāo)記切除病灶各個(gè)切緣,應(yīng)用石蠟病理判斷切緣是否有病灶殘留,但該方法耗時(shí)長(zhǎng),無(wú)法在當(dāng)次手術(shù)中確定切緣情況,導(dǎo)致保乳手術(shù)的二次手術(shù)率高達(dá) 17%,增加了患者身心痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),因此急需一種無(wú)創(chuàng)、方便和即時(shí)的技術(shù)進(jìn)行判斷。拉曼光譜具有無(wú)需樣品制備、對(duì)樣品無(wú)接觸、不破壞樣品結(jié)構(gòu)、分析簡(jiǎn)便快速和分辨率高等特點(diǎn),因而可應(yīng)用于疾病的預(yù)測(cè)、診斷及療效判斷。近年來(lái),拉曼光譜檢測(cè)技術(shù)不斷完善,且統(tǒng)計(jì)學(xué)方法廣泛應(yīng)用于拉曼光譜結(jié)果的分析,使探索應(yīng)用腫瘤的拉曼光譜特點(diǎn)進(jìn)行診斷成為新的研究熱點(diǎn),目前國(guó)內(nèi)外綜述內(nèi)容主要集中于拉曼光譜技術(shù)在細(xì)胞和組織中的研究結(jié)果及光譜歸屬等方面,但拉曼光譜測(cè)量?jī)x器以及拉曼光譜技術(shù)的改進(jìn)、乳腺癌拉曼光譜臨床應(yīng)用的相關(guān)綜述國(guó)內(nèi)尚無(wú)報(bào)道。本文作者系統(tǒng)回顧了近年來(lái)拉曼光譜測(cè)量?jī)x器以及拉曼光譜技術(shù)的變化,對(duì)拉曼光譜在乳腺癌細(xì)胞系和組織檢測(cè)的研究進(jìn)展及其臨床意義以及拉曼光譜臨床應(yīng)用時(shí)待解決的問(wèn)題和未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行綜述。

    1 乳腺癌臨床研究中拉曼光譜技術(shù)的進(jìn)展

    拉曼光譜檢測(cè)儀器與方法的改進(jìn)促進(jìn)了拉曼光譜技術(shù)在乳腺癌中的研究。最初的檢測(cè)方法是自發(fā)拉曼光譜(Raman spectroscopy),當(dāng)光被物質(zhì)散射時(shí),絕大部分光子會(huì)發(fā)生彈性散射,還有一小部分光子會(huì)與介質(zhì)分子發(fā)生非彈性碰撞,散射光子與分子相互作用產(chǎn)生能量交換,這種現(xiàn)象稱為非彈性散射。拉曼散射效應(yīng)最早由印度物理學(xué)家 RAMAN C.V.發(fā)現(xiàn),激發(fā)光使用可見(jiàn)光或者近紅外光,降低了水的吸收,使得拉曼光譜可應(yīng)用于體液或者液體環(huán)境下細(xì)胞的測(cè)量[7]。

    但是生物樣本(組織、細(xì)胞和體液)的自發(fā)信號(hào)弱,檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),易受熒光干擾。1973年表面增強(qiáng)拉曼散射光譜(surface-enhanced Raman spectroscopy, SERS)首次在吸附于粗糙銀電極的吡啶上觀察到,與傳統(tǒng)的拉曼散射方法相比有幾個(gè)數(shù)量級(jí)的增強(qiáng)。SERS的增強(qiáng)機(jī)制目前認(rèn)為主要有2種:第1種為電磁場(chǎng)增強(qiáng)機(jī)制,激發(fā)光刺激惰性貴金屬(金和銀等)納米顆粒產(chǎn)生等離子激元,等離子激元與拉曼活性分子相互作用,導(dǎo)致分子拉曼光譜信號(hào)增強(qiáng)105~1010倍[8];第2種為化學(xué)增強(qiáng)機(jī)制,樣本表面分子與金屬表面的成鍵等相互作用,從而使分子拉曼光譜信號(hào)增強(qiáng)。雖然測(cè)量物質(zhì)與增強(qiáng)劑不需要接觸就能發(fā)生SERS增強(qiáng),但在1~30 nm范圍內(nèi)SERS增強(qiáng)效應(yīng)較強(qiáng)[9-11],因此在術(shù)中檢測(cè)應(yīng)用時(shí)應(yīng)加入生物相容性較好的納米顆粒,檢測(cè)位點(diǎn)應(yīng)盡量接近納米顆粒。

    共振拉曼光譜(resonance Raman scattering, RRS)入射光頻率與分子電子躍遷頻率一致時(shí)相應(yīng)分子的光譜增強(qiáng)102~106倍,當(dāng)共振分子光譜增強(qiáng)時(shí)未共振光譜信息被湮滅,而無(wú)需加入任何樣本的預(yù)處理。即使在拉曼光譜信號(hào)復(fù)雜的樣品中,RRS只提供部分分子的信息,降低光譜的復(fù)雜性而便于識(shí)別。但RRS易受熒光背景的影響,應(yīng)使用短波長(zhǎng)的激發(fā)光加以避免,而短波長(zhǎng)激發(fā)光容易造成組織損傷,不適合用于活體檢測(cè)。

    移頻激發(fā)差分拉曼光譜(shifted-excitation Raman difference spectroscopy, SERDS)通過(guò)拉曼光譜和熒光光譜對(duì)激發(fā)光波長(zhǎng)的依賴程度不同,有效解決了生物樣本檢測(cè)拉曼光譜時(shí)熒光干擾的困擾[12-13],因此成為避免熒光干擾最常用的手段。在一定的范圍內(nèi),隨著激發(fā)波長(zhǎng)的變化熒光光譜幾乎不會(huì)發(fā)生改變,而激發(fā)波長(zhǎng)對(duì)拉曼光譜中熒光有很大影響。采用2個(gè)相近頻率的激發(fā)光照射樣品,對(duì)得到的2組光譜進(jìn)行差分處理消除熒光的干擾,可得到只包含拉曼光譜信息的數(shù)據(jù)。SERDS檢測(cè)正常乳腺組織、纖維腺瘤和浸潤(rùn)性乳腺癌,判斷是否含有病變組織的敏感度和特異度均達(dá)到100%[14]。相干拉曼散射(coherent Raman scattering, CRS)是一個(gè)典型的采用皮秒脈沖激光器的三維非線性過(guò)程,CRS通過(guò)相干激勵(lì)增強(qiáng)信號(hào),可以大幅縮短數(shù)據(jù)采集時(shí)間。當(dāng)泵振動(dòng)和斯托克斯振動(dòng)頻率與分子的振動(dòng)頻率發(fā)生共振時(shí),將有4種主要的CRS過(guò)程同時(shí)發(fā)生:相干反斯托克斯拉曼散射(coherent anti-stokes Raman scattering spectrum,CARS)、相干斯托克斯拉曼散射(coherent stokes Raman scattering spectrum,CSRS)、受激拉曼增益(stimulated Raman gain,SRG)和受激拉曼損耗(stimulated Raman loss,SRL)。通常在 CARS 過(guò)程中還會(huì)伴有非共振的四波混頻信號(hào),這種非共振背景將導(dǎo)致 CARS 光譜與自發(fā)拉曼光譜相比發(fā)生線型變化,使得 CARS 信號(hào)難以簡(jiǎn)單地被解釋。而對(duì)于指紋區(qū)成像,由于 CARS 信號(hào)很容易被強(qiáng)大的非共振背景淹沒(méi),如何減輕乃至消除非共振背景干擾也是 CARS 成像所面臨的一大挑戰(zhàn)[15]。與CARS比較,受激拉曼散射(stimulated Raman scattering,SRS)成像最大的優(yōu)點(diǎn)在于沒(méi)有非共振的背景,其光譜線型與自發(fā)拉曼光譜完全一致,因而 SRS 信號(hào)的分配和解釋可以直接參考已經(jīng)發(fā)表的拉曼光譜文獻(xiàn)。兩者均可以同時(shí)獲得整個(gè)激發(fā)態(tài)譜,實(shí)現(xiàn)了生物組織的成像,但是需要可調(diào)諧脈沖激光器探測(cè)樣品中的不同分子,因此很難將激光有效地耦合和同步到手持或便攜式術(shù)中設(shè)備中。

    空間偏移拉曼光譜(spatial offset Raman spectroscopy,SORS)提供了一種對(duì)深部組織樣品進(jìn)行非侵入性研究的方法[16-17],其具有抑制表層成分拉曼光譜和熒光背景干擾的能力。光譜探測(cè)位置與激發(fā)光入射位置不同,當(dāng)激光入射到樣本表面并透射入表層物質(zhì)內(nèi)部時(shí),其中一部分散射光子經(jīng)過(guò)多次散射后達(dá)到組織深層, 并與深層組織成分發(fā)生拉曼散射,攜帶深層組織物質(zhì)信息的拉曼散射光子在探測(cè)位置進(jìn)行分析[18],目前已有研究[19-20]將SORS用于檢測(cè)假酒、評(píng)估骨成分以及分析乳腺癌組織中的微鈣化等方面。將羥磷灰石、單水草酸鈣以及 3.5% 碳酸鹽置入8.7 mm 厚的雞乳腺組織中,采用SORS檢測(cè)正常乳腺組織下的癌癥邊緣,證實(shí)了拉曼光譜檢測(cè)新鮮乳腺組織內(nèi)微鈣化灶的可行性。最近一些科學(xué)家將SORS與SERS的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合用來(lái)檢測(cè)深部樣本的拉曼信號(hào),NICOLSON等[21]采用便攜式拉曼光譜儀檢測(cè)埋于組織中的三維乳腺腫瘤模型,結(jié)果表明其跟蹤乳腺腫瘤的深度達(dá)25 mm,為臨床應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。

    2 拉曼光譜在乳腺癌細(xì)胞系中的應(yīng)用

    乳腺癌很可能轉(zhuǎn)移到骨骼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)臟,導(dǎo)致預(yù)后不良和總體生存率降低[22-23],因此通過(guò)乳腺癌的拉曼光譜特點(diǎn)早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌可降低乳腺癌患者的病死率。研究者[24-25]運(yùn)用拉曼光譜、原子力顯微鏡(AFM)、光學(xué)顯微鏡探索正常乳腺細(xì)胞系(MCF-10A)與乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231, MDA-MB-453)之間的差異與聯(lián)系,采用主成分分析法(principal component analysis,PCA)分析拉曼光譜,得出正常乳腺細(xì)胞系(MFC-10A)和乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231, MDA-MB-453)的拉曼光譜主要波峰為苯基丙氨酸帶、酰胺Ⅰ和Ⅲ帶、CH2變形、CH2擺動(dòng)/扭轉(zhuǎn)和S-S鍵振動(dòng)帶。在2種乳腺癌細(xì)胞系中,酰胺Ⅰ、CH2變形帶的強(qiáng)度類似,但是乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231有較強(qiáng)的CH2變形帶,運(yùn)用這些波峰特征可以有效地區(qū)分3種細(xì)胞系,為拉曼光譜診斷乳腺癌奠定基礎(chǔ)。

    指導(dǎo)惡性腫瘤治療的2個(gè)重要指標(biāo)是“腫瘤反應(yīng)”和“疾病進(jìn)展”。腫瘤反應(yīng)是指在治療早期對(duì)治療效果進(jìn)行評(píng)估,疾病進(jìn)展為癌癥的增長(zhǎng)和擴(kuò)散,代表治療失敗。腫瘤進(jìn)展包括多種機(jī)制,其中基質(zhì)、血管生成、炎癥、免疫系統(tǒng)、激素和外源性生物制劑發(fā)揮著重要作用,所有這些機(jī)制均會(huì)引起組織生化水平的變化[26-28],因此識(shí)別癌組織的生化變化可以評(píng)估腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能、侵襲性和疾病進(jìn)展,有助于制定治療決策。MARRO等[29]發(fā)現(xiàn):乳腺癌細(xì)胞趨向性與氨基酸、線粒體信號(hào)水平降低有關(guān)。MIGNOLET等[30]在MCF-7細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)了4種使胞內(nèi)脂類增加的多酚,并且其與細(xì)胞凋亡有關(guān)。研究[31-32]顯示:乳腺癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與細(xì)胞表面糖脂和糖蛋白的唾液酸化有關(guān)聯(lián)。ABRAMCZYK等[33]發(fā)現(xiàn):隨著細(xì)胞侵襲性增加,細(xì)胞核仁組蛋白乙?;缴?;甲基伸縮振動(dòng)隨著惡性程度增加,拉曼光譜發(fā)生藍(lán)移。放療是乳腺癌治療手段之一,研究者[34-35]采用拉曼光譜研究輻射對(duì)乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231和MCF-7的影響,結(jié)果表明:拉曼光譜可評(píng)估細(xì)胞內(nèi)糖原水平的變化,將其用于惡性腫瘤潛在標(biāo)志物和對(duì)放射治療耐藥機(jī)制的研究。研究者[36-37]采用拉曼光譜研究了乳腺癌耐藥性與HER-2基因過(guò)表達(dá)的關(guān)系,結(jié)果表明:拉帕替尼的耐藥性與HER-2基因過(guò)表達(dá)有關(guān),在HER-2基因過(guò)表達(dá)的細(xì)胞中脂類增加,蛋白減少;接受拉帕替尼治療后,HER-2基因陽(yáng)性的細(xì)胞中脂類仍在增加。在治療過(guò)程中,研究乳腺癌組織的拉曼光譜變化,可以確定治療方法是否有效、是否需要修改,并有助于確定臨床研究中進(jìn)展終點(diǎn)的時(shí)間。

    3 拉曼光譜在乳腺組織中的應(yīng)用

    拉曼光譜對(duì)乳腺癌組織的研究經(jīng)歷了從體外到體內(nèi)、從組織切片到新鮮組織的過(guò)程,正常乳腺腺體與病變?nèi)橄俳M織拉曼光譜的差異主要集中在胡蘿卜素、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。乳腺良性與惡性病變拉曼光譜的主要差異為胡蘿卜素和脂肪酸,利用酰胺Ⅰ和CH2彎曲振動(dòng)的比值作為鑒別參數(shù),可以區(qū)分正常乳腺組織和惡性乳腺組織。惡性組織特點(diǎn)為脂類含量下降、核酸和蛋白增加及結(jié)構(gòu)紊亂(分子氫鍵斷裂)。 研究[38-40]顯示:類胡蘿卜素的拉曼光譜是惡性腫瘤表現(xiàn)出的關(guān)鍵特征;癌前病變、導(dǎo)管內(nèi)癌和浸潤(rùn)性癌組織中,DNA 的磷酸骨架伸縮振動(dòng)譜線的特征峰藍(lán)移至1 086 cm-1,說(shuō)明在癌前病變組織中部分DNA 的單雙鏈斷裂。

    正常乳腺組織與良、惡性病變組織的拉曼光譜特征為胡蘿卜素、脂類、核酸和蛋白質(zhì)含量不同,但目前研究主要集中于組織切片,并且均未構(gòu)建合適的模型區(qū)分正常組織、良性病變和惡性病變。HAKE等[41]在2002年采用共聚焦顯微拉曼光譜儀檢測(cè)了乳腺組織的冰凍切片,通過(guò)擬合來(lái)源于細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核仁、脂肪酸、膠原蛋白、羥磷灰石鈣、草酸鈣、脂質(zhì)和水的光譜,構(gòu)造形態(tài)/化學(xué)乳房組織模型;通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的拉曼光譜脂質(zhì)和膠原蛋白擬合系數(shù),區(qū)分乳腺良、惡性病變的靈敏度為94%,特異度為96%。GEBREKIDAN等[14]構(gòu)建的模型診斷乳腺癌的靈敏度為99.15%,非乳腺癌病變的特異度為90.4%,在含有惡性病變的組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)惡性成分的靈敏度為100%。但既往研究中實(shí)驗(yàn)標(biāo)本均進(jìn)行了預(yù)處理,如冰凍、甲醛固定、石蠟包埋和脫蠟等,這些預(yù)處理會(huì)影響組織拉曼光譜信號(hào),因此檢測(cè)未進(jìn)行任何處理的新鮮在體組織的拉曼光譜非常必要。HAKA等[41]檢測(cè)了9例保乳術(shù)患者的手術(shù)切緣,利用之前構(gòu)建的數(shù)據(jù)模型進(jìn)行診斷,檢測(cè)陽(yáng)性切緣的靈敏度為100%,特異度為100%,總準(zhǔn)確率為93.3%。SHIPP等[42]探索多光譜組織病理學(xué)判斷保乳手術(shù)切緣的應(yīng)用,多光譜組織病理學(xué)利用自發(fā)熒光顯微鏡高空間分辨率、速度、敏感性(低特異性)結(jié)合高化學(xué)特異性的拉曼光譜可發(fā)現(xiàn)微小腫瘤,靈敏度達(dá)91%,特異度達(dá)83%。證實(shí)了拉曼光譜在體內(nèi)檢測(cè)可以實(shí)現(xiàn),但是由于絕經(jīng)前后乳腺組織脂肪含量變化和化療對(duì)乳腺組織的影響,仍然需要構(gòu)建更成熟的模型,以乳腺組織拉曼光譜特征為標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建模型,可快速、客觀、準(zhǔn)確地鑒別乳腺癌組織、良性病變組織與正常組織。

    保乳手術(shù)中準(zhǔn)確地判斷陰性切緣并區(qū)分良、惡性組織非常重要。拉曼光譜可以提供組織的化學(xué)性質(zhì)和疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)等信息。在探索性手術(shù)中通過(guò)拉曼光譜判斷病變的性質(zhì),可以降低二次手術(shù)率。拉曼光譜可以提供與傳統(tǒng)病理類似的圖像,結(jié)合拉曼光譜的穿刺活檢技術(shù)可以提供即時(shí)、無(wú)需標(biāo)記且客觀的化學(xué)信息。研究[43-46]顯示:利用建立的擬合系數(shù)模型,可成功地識(shí)別組織的良、惡性,在體內(nèi)測(cè)量的準(zhǔn)確率可達(dá)93.3%,光譜活檢穿刺測(cè)量為實(shí)時(shí)診斷奠定了基礎(chǔ)。

    拉曼光譜技術(shù)不但可以應(yīng)用于乳腺癌的診斷,還可以用于研究疾病進(jìn)展及化學(xué)通路,為更好地理解疾病和治療疾病提供生化信息。研究[40,47]顯示:癌組織與正常組織中脂質(zhì)構(gòu)成比存在差異,對(duì)照脂質(zhì)成分的拉曼光譜可以發(fā)現(xiàn)非癌組織的脂質(zhì)多為油酸(油酸及其衍生物是脂肪組織中甘油的組成部分),而癌組織中多為花生四烯酸(AA)(不飽和脂肪酸)。這一變化表明代謝是通過(guò)環(huán)氧合酶(COX)途徑進(jìn)行,不是通過(guò)脂氧合酶(LOX)進(jìn)行,而LOX會(huì)導(dǎo)致二十烷酸類化合物參與炎癥過(guò)程[48]。COX催化生成環(huán)狀化合物,LOX催化生成非環(huán)狀化合物。AA先于二十碳酸及其衍生物合成,其生物活性大于同型亞麻酸(DGLA)和二十碳五烯酸(EPA)。隨著組織惡性程度增加,OH-NH-CH的光譜增強(qiáng),代表重要生物分子(如核酸、蛋白、脂肪)的增加,位于600~1 600 cm-1(與核酸有關(guān))的拉曼波峰也會(huì)發(fā)生改變。這些波峰的改變有助于對(duì)乳腺癌進(jìn)行分級(jí)分期,高級(jí)別導(dǎo)管原位癌的脂肪酸和甘油的拉曼光譜增加而低級(jí)別則減少[48]。

    癌癥的具體病因并不明確,老化、氧化和自由基可能是其原因。BROZEK-PLUSKA等[38]對(duì)44例患者新鮮手術(shù)標(biāo)本(腫瘤組織、健康組織和血管標(biāo)本)進(jìn)行分析,在獲得的321個(gè)光譜中發(fā)現(xiàn)正常乳腺組織中類胡蘿卜素和脂質(zhì)的峰值明顯;但是惡性腫瘤組織熒光干擾較強(qiáng)。在惡性腫瘤中類胡蘿卜素和脂質(zhì)峰值降低表明這些成分在惡性組織中的含量較低,類胡蘿卜素減少可能由于脂褐素氧化,而脂質(zhì)減少也可能為脂質(zhì)過(guò)氧化。

    4 展 望

    利用拉曼光譜分析生物樣本仍然存在很多挑戰(zhàn)與局限性。樣本的拉曼光譜信號(hào)較弱時(shí)可使用SERS等靈敏度較高的技術(shù),但樣品制備起著重要的作用。在分析生物樣品的拉曼光譜時(shí),由于成分復(fù)雜,需要建立可靠的校準(zhǔn)模型確??煽亢投繙y(cè)量。此外在使用探針進(jìn)行體內(nèi)分析時(shí)也存在挑戰(zhàn),在引入拉曼光譜作為診斷依據(jù)之前,需要克服背景熒光、偽影和信號(hào)弱等不足,且需要通過(guò)多元統(tǒng)計(jì)分析方法構(gòu)建診斷模型。

    拉曼光譜可以在分子水平上分析疾病的變化,為疾病診斷和治療效果評(píng)價(jià)提供客觀和可量化的信息。使用拉曼光譜技術(shù)可以更加深入地了解浸潤(rùn)性乳腺癌的浸潤(rùn)過(guò)程,獲得的化學(xué)信息可以定量定性地分析疾病。熒光等干擾給生物樣品拉曼光譜的獲取和解析帶來(lái)了巨大的困難,因此仍然需要開(kāi)發(fā)獲取、處理和分類數(shù)據(jù)的技術(shù),通過(guò)對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理,消除不需要的信號(hào),增強(qiáng)拉曼光譜特征實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的定性和定量分析,從而判斷乳腺組織的病變性質(zhì)。隨著拉曼光譜數(shù)據(jù)庫(kù)、組織分類方法和儀器設(shè)計(jì)的不斷改進(jìn),獲取分辨率和準(zhǔn)確度更高及采集時(shí)間更短的拉曼光譜數(shù)據(jù)將成為可能,從而實(shí)現(xiàn)癌癥早期診斷,避免不必要的活組織檢查,即時(shí)、快速判斷乳腺癌保乳術(shù)的手術(shù)切緣,保證完全切除腫瘤。

    猜你喜歡
    曼光譜拉曼細(xì)胞系
    賊都找不到的地方
    基于單光子探測(cè)技術(shù)的拉曼光譜測(cè)量
    基于相干反斯托克斯拉曼散射的二維溫度場(chǎng)掃描測(cè)量
    STAT3對(duì)人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系增殖與凋亡的影響
    抑制miR-31表達(dá)對(duì)胰腺癌Panc-1細(xì)胞系遷移和侵襲的影響及可能機(jī)制
    E3泛素連接酶對(duì)卵巢癌細(xì)胞系SKOV3/DDP順鉑耐藥性的影響
    七葉皂苷鈉與化療藥聯(lián)合對(duì)HT-29 結(jié)腸癌細(xì)胞系的作用
    BMSCs分化為NCs的拉曼光譜研究
    便攜式薄層色譜-拉曼光譜聯(lián)用儀重大專項(xiàng)獲批
    苯的激光拉曼光譜研究
    物理與工程(2013年1期)2013-03-11 16:03:39
    国产麻豆69| 麻豆乱淫一区二区| 天堂8中文在线网| 精品少妇内射三级| 女性被躁到高潮视频| 蜜桃国产av成人99| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久精品久久精品一区二区三区| 99久久综合免费| 最近手机中文字幕大全| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 亚洲第一av免费看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久狼人影院| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 久久久久久久精品精品| 中文字幕av电影在线播放| 日韩欧美精品免费久久| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 97精品久久久久久久久久精品| 中文字幕亚洲精品专区| 美女午夜性视频免费| 欧美人与善性xxx| 精品一品国产午夜福利视频| videos熟女内射| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲第一区二区三区不卡| 天堂中文最新版在线下载| 国产成人精品在线电影| 国产成人精品福利久久| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| av网站免费在线观看视频| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 日日撸夜夜添| 国产男人的电影天堂91| 国产一区二区 视频在线| 国产免费视频播放在线视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 久久久国产精品麻豆| 岛国毛片在线播放| 欧美精品一区二区大全| 亚洲国产av新网站| 精品一区在线观看国产| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产片内射在线| 欧美精品av麻豆av| 校园人妻丝袜中文字幕| 高清欧美精品videossex| 亚洲一区中文字幕在线| 大片免费播放器 马上看| 制服人妻中文乱码| 中文字幕高清在线视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影小说| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产野战对白在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 日本av免费视频播放| av又黄又爽大尺度在线免费看| 99热网站在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久97久久精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 伦理电影大哥的女人| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 91精品国产国语对白视频| 亚洲专区中文字幕在线 | 久久精品国产综合久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 啦啦啦 在线观看视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 十八禁高潮呻吟视频| 久久国产精品大桥未久av| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 国产亚洲精品第一综合不卡| 人成视频在线观看免费观看| 国产一区二区 视频在线| 美女视频免费永久观看网站| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 日本一区二区免费在线视频| 国产成人a∨麻豆精品| 丝瓜视频免费看黄片| 老司机影院毛片| 亚洲国产av影院在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 精品亚洲成a人片在线观看| 精品国产乱码久久久久久男人| av又黄又爽大尺度在线免费看| 2021少妇久久久久久久久久久| 日韩电影二区| 欧美日韩视频精品一区| 丝袜美足系列| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲美女黄色视频免费看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久精品人人爽人人爽视色| 一级片'在线观看视频| 成年人午夜在线观看视频| 两个人免费观看高清视频| 午夜日本视频在线| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 90打野战视频偷拍视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 一二三四在线观看免费中文在| 两个人免费观看高清视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产免费视频播放在线视频| 国产又爽黄色视频| 欧美精品一区二区免费开放| 91精品国产国语对白视频| 精品亚洲成a人片在线观看| 久久99一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 国产日韩欧美视频二区| 国产成人精品在线电影| 精品久久蜜臀av无| 激情视频va一区二区三区| 赤兔流量卡办理| 欧美精品一区二区免费开放| 一本大道久久a久久精品| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久免费观看电影| 丝袜美足系列| 国产又色又爽无遮挡免| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产男人的电影天堂91| 91aial.com中文字幕在线观看| av卡一久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产色婷婷99| av有码第一页| 久久免费观看电影| xxx大片免费视频| 久久综合国产亚洲精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 尾随美女入室| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品国产三级专区第一集| 国产成人欧美在线观看 | 色吧在线观看| 国产av国产精品国产| 最新在线观看一区二区三区 | 国产精品久久久久久精品古装| 伦理电影大哥的女人| av又黄又爽大尺度在线免费看| 免费黄色在线免费观看| 亚洲av电影在线进入| 中文字幕色久视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 精品国产乱码久久久久久男人| 中文字幕色久视频| 国产成人欧美| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产精品久久久av美女十八| 日本色播在线视频| 九色亚洲精品在线播放| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲综合色网址| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产欧美亚洲国产| av一本久久久久| 亚洲精品国产区一区二| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 一级,二级,三级黄色视频| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 午夜福利视频在线观看免费| 黄片无遮挡物在线观看| 9热在线视频观看99| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲美女黄色视频免费看| xxxhd国产人妻xxx| 欧美黑人精品巨大| 国产麻豆69| a 毛片基地| 国产在线视频一区二区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日本av免费视频播放| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 街头女战士在线观看网站| 丝袜美足系列| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 美女主播在线视频| 免费黄色在线免费观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产精品女同一区二区软件| 国产日韩欧美在线精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 天美传媒精品一区二区| 国产日韩欧美在线精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲精品日本国产第一区| 高清视频免费观看一区二区| 久久久国产一区二区| 久久久久久人人人人人| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久午夜综合久久蜜桃| 新久久久久国产一级毛片| 国产黄色免费在线视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲人成电影观看| 国产精品熟女久久久久浪| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久久久视频综合| 日韩一区二区三区影片| 国产成人精品久久二区二区91 | 日韩精品免费视频一区二区三区| 日本vs欧美在线观看视频| 久热爱精品视频在线9| 亚洲成色77777| 男女高潮啪啪啪动态图| 丁香六月天网| 美女主播在线视频| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲精品在线美女| 伊人亚洲综合成人网| 国产男人的电影天堂91| 亚洲国产精品国产精品| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久久久网色| 国产淫语在线视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 曰老女人黄片| 制服丝袜香蕉在线| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产一区二区三区综合在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 男人舔女人的私密视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 老司机影院成人| 不卡视频在线观看欧美| 国产男女内射视频| av在线老鸭窝| 亚洲国产av影院在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 黄片小视频在线播放| 色吧在线观看| 丝袜在线中文字幕| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲国产欧美网| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产亚洲欧美精品永久| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产精品偷伦视频观看了| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产高清国产精品国产三级| 日韩一区二区视频免费看| bbb黄色大片| 国产乱来视频区| av.在线天堂| 国产精品一区二区在线不卡| 91成人精品电影| 亚洲精品,欧美精品| 日本欧美国产在线视频| 精品国产露脸久久av麻豆| av在线播放精品| 久久毛片免费看一区二区三区| 成人国产av品久久久| 丝袜美腿诱惑在线| 国产1区2区3区精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成人国产av品久久久| 国产 一区精品| 老司机亚洲免费影院| videosex国产| 免费观看性生交大片5| 久久久欧美国产精品| 桃花免费在线播放| 韩国精品一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 少妇 在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 成人漫画全彩无遮挡| 搡老岳熟女国产| 视频区图区小说| 日韩一区二区三区影片| 十八禁人妻一区二区| 在线 av 中文字幕| 欧美xxⅹ黑人| 高清欧美精品videossex| 国产成人精品福利久久| 免费观看性生交大片5| 国产一卡二卡三卡精品 | 一区二区三区激情视频| 伦理电影大哥的女人| 色吧在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产成人欧美在线观看 | 激情五月婷婷亚洲| 嫩草影视91久久| 最近最新中文字幕大全免费视频 | www.精华液| 亚洲精品日本国产第一区| a级片在线免费高清观看视频| 操出白浆在线播放| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久女婷五月综合色啪小说| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 老司机影院毛片| 一级片'在线观看视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 久久精品国产亚洲av涩爱| 日本wwww免费看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 在线观看免费高清a一片| 十八禁高潮呻吟视频| 一级,二级,三级黄色视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 男女午夜视频在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 久久久久久久精品精品| 少妇精品久久久久久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产成人精品久久久久久| 9191精品国产免费久久| 国产男女超爽视频在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 黄色一级大片看看| 一二三四中文在线观看免费高清| 看免费成人av毛片| 久久青草综合色| kizo精华| 精品第一国产精品| 热99久久久久精品小说推荐| 午夜久久久在线观看| 成人免费观看视频高清| 久久这里只有精品19| 纯流量卡能插随身wifi吗| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧美日韩av久久| av网站免费在线观看视频| 老司机影院成人| 高清黄色对白视频在线免费看| 日韩免费高清中文字幕av| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 午夜日韩欧美国产| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲综合精品二区| 国产熟女欧美一区二区| 不卡av一区二区三区| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久鲁丝午夜福利片| xxxhd国产人妻xxx| 国产伦理片在线播放av一区| 国产片内射在线| 两个人免费观看高清视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 日本91视频免费播放| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 精品视频人人做人人爽| √禁漫天堂资源中文www| 男女无遮挡免费网站观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 精品人妻在线不人妻| 欧美中文综合在线视频| 赤兔流量卡办理| 一级毛片电影观看| 国产成人一区二区在线| 黄色怎么调成土黄色| 十八禁网站网址无遮挡| 久久国产亚洲av麻豆专区| 美女高潮到喷水免费观看| 久久97久久精品| 女性生殖器流出的白浆| 久久精品国产综合久久久| 国产高清不卡午夜福利| 老司机亚洲免费影院| 大话2 男鬼变身卡| 久久久久国产精品人妻一区二区| 只有这里有精品99| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 婷婷色综合大香蕉| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久狼人影院| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 一级毛片电影观看| 国产毛片在线视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲第一青青草原| 久久久久久久久免费视频了| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 九色亚洲精品在线播放| 国产精品一国产av| 亚洲美女搞黄在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| videos熟女内射| 一级毛片 在线播放| 午夜影院在线不卡| 国产高清国产精品国产三级| 不卡视频在线观看欧美| 黄色毛片三级朝国网站| 国产精品av久久久久免费| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久久精品免费免费高清| 少妇被粗大猛烈的视频| 十八禁高潮呻吟视频| 日韩大片免费观看网站| 日韩视频在线欧美| 伦理电影免费视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产 一区精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久久久视频综合| 欧美变态另类bdsm刘玥| 天美传媒精品一区二区| 亚洲人成77777在线视频| 一级毛片我不卡| 免费观看人在逋| www日本在线高清视频| 交换朋友夫妻互换小说| 一级a爱视频在线免费观看| 国产精品无大码| 男人舔女人的私密视频| 各种免费的搞黄视频| 久久婷婷青草| 精品一区二区三区av网在线观看 | 久久热在线av| 亚洲国产日韩一区二区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲熟女毛片儿| 午夜av观看不卡| 韩国精品一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| av一本久久久久| 亚洲久久久国产精品| 大片免费播放器 马上看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产日韩欧美视频二区| 日本一区二区免费在线视频| 精品一区二区三卡| 伦理电影免费视频| 国产免费现黄频在线看| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲精品自拍成人| 999久久久国产精品视频| 最新在线观看一区二区三区 | videosex国产| 国产精品嫩草影院av在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产成人91sexporn| 日日啪夜夜爽| 多毛熟女@视频| 99re6热这里在线精品视频| 丝袜美足系列| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲精品中文字幕在线视频| 精品一区二区免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 青青草视频在线视频观看| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 波多野结衣一区麻豆| 97在线人人人人妻| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 亚洲av国产av综合av卡| 国产精品久久久久久精品古装| 日韩制服骚丝袜av| 美女中出高潮动态图| 成人漫画全彩无遮挡| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 青草久久国产| 乱人伦中国视频| 日韩av免费高清视频| 熟女av电影| 热re99久久国产66热| 制服丝袜香蕉在线| 99热全是精品| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 18禁动态无遮挡网站| 亚洲成国产人片在线观看| 国产一卡二卡三卡精品 | 亚洲,欧美,日韩| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 男女之事视频高清在线观看 | 新久久久久国产一级毛片| 国产精品 欧美亚洲| 国产欧美亚洲国产| 曰老女人黄片| 婷婷色综合大香蕉| 精品视频人人做人人爽| 久久 成人 亚洲| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产成人欧美| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美日韩成人在线一区二区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产视频首页在线观看| 午夜福利在线免费观看网站| 99热全是精品| 国产又色又爽无遮挡免| 毛片一级片免费看久久久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 妹子高潮喷水视频| 国产男人的电影天堂91| 不卡视频在线观看欧美| av女优亚洲男人天堂| 婷婷色综合大香蕉| 成年动漫av网址| 久久久久久久久免费视频了| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲三区欧美一区| 狂野欧美激情性xxxx| 久久毛片免费看一区二区三区| 9191精品国产免费久久| 又大又爽又粗| 新久久久久国产一级毛片| 成人影院久久| 天天添夜夜摸| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 十八禁人妻一区二区| 伊人久久国产一区二区| 黑人欧美特级aaaaaa片| av.在线天堂| 免费看av在线观看网站| 亚洲精品乱久久久久久| 在线天堂中文资源库| 国产片特级美女逼逼视频| 99精品久久久久人妻精品| 美女中出高潮动态图| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久免费观看电影| 亚洲国产精品国产精品| 国产精品女同一区二区软件| 久久99一区二区三区| 18禁动态无遮挡网站| 欧美国产精品一级二级三级| 国产精品.久久久| 欧美日韩av久久| 人人妻人人澡人人看| 亚洲人成网站在线观看播放| 咕卡用的链子| 国产精品成人在线| 一个人免费看片子| 啦啦啦在线免费观看视频4| 在线看a的网站| 黄色 视频免费看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 成年人免费黄色播放视频| 一二三四在线观看免费中文在| 精品久久久久久电影网| 久久亚洲国产成人精品v| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 两性夫妻黄色片| 欧美精品高潮呻吟av久久| 中文字幕av电影在线播放| 久久久亚洲精品成人影院| 精品人妻一区二区三区麻豆| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品福利永久在线观看| 新久久久久国产一级毛片| 人人澡人人妻人| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产深夜福利视频在线观看| 久久影院123| 51午夜福利影视在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 90打野战视频偷拍视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲伊人久久精品综合| 国产成人一区二区在线| 国产 精品1| 性少妇av在线| 亚洲国产日韩一区二区| 国产精品免费视频内射| 最新在线观看一区二区三区 |