淺談如何提高臨床微生物檢驗(yàn)的診斷水平

王仕均

【中圖分類(lèi)號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2020）01-03--02

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步和更新，臨床微生物檢驗(yàn)也得到了快速的發(fā)展。在我們周?chē)沫h(huán)境中，存在著各種各樣體積小、種類(lèi)繁多的微生物。近些年來(lái)，隨著濫用抗生素現(xiàn)象的增多，多重耐藥菌株和泛耐藥菌株等頻頻出現(xiàn)，再加上各種新的病原微生物，不但對(duì)感染性疾病的臨床診治帶來(lái)了很大的困難，而且也對(duì)臨床微生物的檢驗(yàn)和診斷水平提出了更高的要求。

臨床疾病的診斷和治療在很大程度上都要依靠微生物檢驗(yàn)來(lái)進(jìn)行，因此如何提高臨床微生物檢驗(yàn)的診斷水平，實(shí)現(xiàn)更快、更準(zhǔn)確的微生物檢驗(yàn)具有重要的意義。世界衛(wèi)生組織（WHO）表明：臨床微生物檢驗(yàn)應(yīng)把目標(biāo)集中在快速診斷上，并盡可能的將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為對(duì)臨床診治有用的信息。傳統(tǒng)的臨床微生物檢驗(yàn)法較慢，很難實(shí)現(xiàn)疾病的快速診斷和治療，已不能滿足現(xiàn)有的臨床治療需求。本文主要是根據(jù)臨床實(shí)際來(lái)淺談如何提高臨床微生物檢驗(yàn)水平。

一、現(xiàn)階段常見(jiàn)的臨床微生物檢驗(yàn)技術(shù)

現(xiàn)階段，臨床上常見(jiàn)的微生物檢驗(yàn)技術(shù)主要有以下幾種：

1 免疫學(xué)技術(shù)

免疫學(xué)技術(shù)主要是通過(guò)特異性抗原抗體反應(yīng)來(lái)檢測(cè)病原微生物，目前已做為一種快速檢測(cè)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于臨床微生物檢驗(yàn)中。目前臨床上常用的免疫學(xué)技術(shù)有酶免疫分析、時(shí)間分辨熒光免疫分析、化學(xué)發(fā)光免疫分析、放射免疫分析以及生物發(fā)光免疫分析等，這些分析方法可直接跳過(guò)細(xì)菌或病毒的培養(yǎng)過(guò)程，從而檢測(cè)出標(biāo)本中的微生物抗原，實(shí)現(xiàn)微生物檢驗(yàn)的快速診斷。

2 分子生物學(xué)技術(shù)

分子生物學(xué)技術(shù)是立足于分子，在分子水平進(jìn)行檢測(cè)的一項(xiàng)技術(shù)。目前臨床上常用的分子生物學(xué)技術(shù)有核酸雜交和聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、基于16S rRNA與GyaB的檢測(cè)技術(shù)以及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）等。其中，PCR技術(shù)具有較好的敏感性、特異性，可快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)出病原體。

3 分子生物傳感器

分子生物傳感器是把分子診斷技術(shù)和傳感器技術(shù)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合的一種技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)準(zhǔn)確的特點(diǎn)，目前在感染類(lèi)疾病的診斷方面獲得了較為廣泛的應(yīng)用，主要應(yīng)用于病原體的檢測(cè)，常見(jiàn)的有DNA生物傳感器。

4 細(xì)菌毒素

細(xì)菌毒素是一種從臨床標(biāo)本中直接檢測(cè)出細(xì)菌的毒素的方法，其可靠性較細(xì)菌培養(yǎng)強(qiáng)，常用于抗生素相關(guān)性腸炎的診斷，如金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的多種腸毒素可用此種方法快速檢測(cè)出。

5 細(xì)菌專(zhuān)有酶及其代謝產(chǎn)物

細(xì)菌專(zhuān)有酶及其代謝產(chǎn)物是通過(guò)快速酶觸反應(yīng)來(lái)進(jìn)行微生物檢測(cè)的一種方法，其將生化反應(yīng)同傳統(tǒng)的細(xì)菌分離進(jìn)行有機(jī)的結(jié)合，是未來(lái)微生物檢測(cè)和診斷的主要發(fā)展趨勢(shì)。

6 病原微生物的自動(dòng)化系統(tǒng)

病原微生物的自動(dòng)化系統(tǒng)是一種微量化、自動(dòng)化和系列化的檢測(cè)技術(shù)，是微生物檢測(cè)和鑒定的新區(qū)域，常見(jiàn)的有AMS微生物自動(dòng)分析系統(tǒng)，這種系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)常規(guī)和基本的快速檢測(cè)和診斷。

二、提高臨床微生物檢驗(yàn)的診斷水平的策略

本文主要從以下幾個(gè)方面來(lái)淺談如何提高臨床微生物檢驗(yàn)的診斷水平：

1 做好儀器設(shè)備及環(huán)境的監(jiān)控工作

在對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)之前，應(yīng)做好微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的監(jiān)控工作，如冰箱、

孵育箱等的溫度和濕度應(yīng)調(diào)節(jié)好，以微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)為準(zhǔn)。此外，還應(yīng)做好微生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的監(jiān)控工作，如定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室儀器及設(shè)備進(jìn)行檢查、維護(hù)、保修和校正等，如有儀器或設(shè)備出現(xiàn)異常，則應(yīng)及時(shí)采取相應(yīng)的措施予以處理。

2 嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行檢驗(yàn)

一般說(shuō)來(lái)，微生物實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程并不是固定的，而是根據(jù)實(shí)際情況，

并綜合微生物檢驗(yàn)工作的安全規(guī)范、具體的實(shí)驗(yàn)操作流程、實(shí)驗(yàn)試劑以及相關(guān)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和方法等方面來(lái)制定，即微生物實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范既要具備科學(xué)性，也要有足夠的合理性，既要規(guī)范化，也要標(biāo)準(zhǔn)化。此外，檢驗(yàn)人員在進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)操作規(guī)范進(jìn)行檢驗(yàn)。

3 提高對(duì)抗血清、試劑和培養(yǎng)基質(zhì)量的重視

抗血清、試劑以及培養(yǎng)基等的質(zhì)量對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有著重要的影響，因此采購(gòu)

人員在選購(gòu)抗血清、試劑和培養(yǎng)基時(shí)，不應(yīng)一味的追求低價(jià)格，而應(yīng)提高對(duì)其質(zhì)量的重視，盡量選購(gòu)規(guī)格好、質(zhì)量過(guò)關(guān)的產(chǎn)品。在使用產(chǎn)品前，應(yīng)做好產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)工作，如產(chǎn)品的外觀、批號(hào)、有效期等，確定合格后方可使用或儲(chǔ)存。此外，實(shí)驗(yàn)室工作人員可自行配制培養(yǎng)基，自行配制出來(lái)的培養(yǎng)基不僅新鮮、表面濕度狀況好，而且比較適合細(xì)菌的生長(zhǎng)。但需注意的是，配制原材料質(zhì)量應(yīng)好，配置是要做好配制環(huán)境的質(zhì)量控制工作。

4 嚴(yán)格標(biāo)本采集及其前期處理工作

標(biāo)本采集是一項(xiàng)較為復(fù)雜的工作，包括患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集方法、部位及時(shí)機(jī)、標(biāo)本的保存、標(biāo)本運(yùn)送時(shí)間等。前期標(biāo)本的采集是標(biāo)本采集的重點(diǎn)，其對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果嚴(yán)格標(biāo)本采集及其前期處理工作有著重要的影響，如采集尿液標(biāo)本時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作原則去采取患者的中段尿，這種標(biāo)本采集方式和患者自己采集的標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著較大的差別。此外，在進(jìn)行標(biāo)本前期處理工作時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵循相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，尤其是有菌部位的標(biāo)本如患者的痰液、分泌物等，從而提高致病菌檢出結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5 做好室內(nèi)質(zhì)量控制工作

室內(nèi)質(zhì)量控制工作對(duì)微生物檢驗(yàn)的診斷水平有著重要的影響，主要包括以

下幾個(gè)方面：①正確選擇、保存參考菌株：參考菌株一般選用美國(guó)典型菌種保存中心的菌株，根據(jù)菌株的特點(diǎn)可采用低溫保存、普通血平皿中保存（溫度為4℃）、超低溫保存等保存方法;②做好培養(yǎng)基的質(zhì)量控制工作：在使用培養(yǎng)基之前，應(yīng)先進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)和生長(zhǎng)試驗(yàn)，確保其質(zhì)量合格方可使用;③做好藥敏紙片的治療控制：藥敏紙片需進(jìn)行低溫保存，最好保持零下二十?dāng)z氏度以下;使用前應(yīng)做好質(zhì)控工作，確保合格方可使用。

6 加強(qiáng)檢驗(yàn)人員的專(zhuān)業(yè)素質(zhì)

微生物檢驗(yàn)涉及到病原微生物的生化反應(yīng)、病理學(xué)以及形態(tài)學(xué)等多方面的

知識(shí)，因此微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員不但要有豐富的工作經(jīng)驗(yàn)和敏銳的思維能力，并且還要有扎實(shí)的知識(shí)儲(chǔ)備。檢驗(yàn)人員應(yīng)加強(qiáng)自身專(zhuān)業(yè)素質(zhì)的培養(yǎng)，積極主動(dòng)學(xué)習(xí)新知識(shí)，掌握新技術(shù)，從而更好、更準(zhǔn)確的完成檢驗(yàn)工作。

微生物是各種疾病的常見(jiàn)致病因素之一，微生物檢驗(yàn)可有效協(xié)助診斷和治療

疾病，因此提高微生物檢驗(yàn)的診斷水平是很有必要的?，F(xiàn)階段，微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)從做好儀器設(shè)備及環(huán)境的監(jiān)控工作、嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行檢驗(yàn)、提高對(duì)抗血清、試劑和培養(yǎng)基質(zhì)量的重視、嚴(yán)格標(biāo)本采集及其前期處理工作、做好室內(nèi)質(zhì)量控制工作以及提高檢驗(yàn)人員的專(zhuān)業(yè)素質(zhì)等方面去提高微生物檢驗(yàn)的診斷水平，從而有效提供檢驗(yàn)質(zhì)量，為患者提供更加有效的疾病治療方法。