動脈粥樣硬化患者高同型半胱氨酸血癥與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運的關(guān)系

趙 佳，左 林，姜小建，姚創(chuàng)利，朱建偉

（1.西安市中心醫(yī)院檢驗科，西安 710003；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院放射科，西安 710038）

動脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是老年人的常見病、高發(fā)病，是導(dǎo)致心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)。近年來，隨著生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，AS發(fā)病率逐年上升，且呈現(xiàn)年輕化趨勢。高同型半胱氨酸（high homocysteine, HHcy）被認(rèn)為是動脈粥樣硬化性心腦血管疾病的一個獨立危險因素[1]。但是HHcy如何通過參與血脂代謝介導(dǎo)AS形成的具體機(jī)制尚不十分清楚。本研究通過探討AS患者同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）與血脂和卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（lecithin cholesterol acyl transferase, LCAT）的關(guān)系，分析HHcy對膽固醇逆向轉(zhuǎn)運（reverse cholesterol transport, RCT）的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象 本研究選取2018年9月～2019年6月在西安市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科行頸部多普勒超聲診斷有頸動脈粥樣硬化斑塊的185例患者作為研究對象。所有研究對象均排除高血壓、冠心病、嚴(yán)重肝腎功能不全、感染、惡性腫瘤、吸煙、目前或近期服用藥物（包括B族維生素類和降血脂類藥物）。根據(jù)患者是否存在HHcy（即空腹血漿Hcy＞15 μmol/L），將所有研究對象分為HHcy組和對照組。本研究所有患者均知情同意。

1.2 試劑和儀器 Hcy測定試劑盒購自北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司；總膽固醇（total cholesterol, TC）、三酰甘油（Triglyceride, TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol, HDLC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol, LDL-C）、載脂蛋白AⅠ （apolipoprotein AⅠ，ApoAⅠ）和載脂蛋白B（apolipoprotein B, ApoB）測定試劑盒購自北京利德曼生化股份有限公司；LCAT試劑盒購自上海飛軒生物科技有限公司。血清Hcy，TC，TG，HDL-C，LDL-C，ApoAⅠ和ApoB水平測定應(yīng)用HITACHI 7600全自動生化分析儀；血清LCAT濃度測定應(yīng)用匯松MB-580多功能酶標(biāo)分析儀。

1.3 方法 統(tǒng)計HHcy組和對照組的性別、年齡和體重指數(shù)（body mass index, BMI），其中BMI=體重(kg)/身高(m)2。采集HHcy組和對照組的空腹靜脈血4ml于促凝管中，離心分離血清，于-80℃保存?zhèn)溆?。Hcy水平測定采用循環(huán)酶法；TC，TG，HDL-C和LDL-C水平測定采用終點法；ApoAⅠ和ApoB水平測定采用免疫比濁法；LCAT濃度測定采用ELISA法，在450nm波長處測定各孔的A值，計算LCAT濃度。嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，所有數(shù)據(jù)均采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s ）的形式表示。計量資料兩組數(shù)據(jù)間的比較采用獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料兩組數(shù)據(jù)間的比較采用χ2檢驗，兩變量相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HHcy組和對照組一般臨床資料和相關(guān)指標(biāo)的比較 見表1。HHcy組HDL-C，ApoAⅠ水平和LACT濃度顯著低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.318，2.405，2.484，均P＜0.05）；HHcy組Hcy水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.266，P＜0.001）。另外，HHcy組年齡，性別，BMI，TC，TG，LDL-C和ApoB水平與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.006～1.709，均P＞0.05）。

表1 HHcy組和對照組一般臨床資料和相關(guān)指標(biāo)的比較

2.2 Hcy水平與血脂水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，Hcy水平與HDL-C和ApoAⅠ水平均呈負(fù)相關(guān)（r =-0.197，P =0.008；r =-0.212，P =0.006；均P＜0.01）。Hcy水平與TC，TG，LDL-C和ApoB水平均無顯著相關(guān)性（r =0.071，P=0.204；r =0.068，P=0.219；r =0.085，P = 0.161；r =0.108，P =0.112）。

2.3 Hcy水平與LCAT濃度的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，HCY水平與LCAT濃度呈負(fù)相關(guān)（r =- 0.221，P = 0.005）。

3 討論

AS是一種與脂質(zhì)代謝障礙有關(guān)的全身性疾病，可累及全身動脈血管。AS可由多種機(jī)制介導(dǎo)，致使血液中的脂質(zhì)沉積于血管壁，形成粥樣斑塊，造成血管腔狹窄，甚至完全閉塞，導(dǎo)致組織器官供血障礙；有些不穩(wěn)定斑塊容易發(fā)生破裂、脫落，形成栓子，隨血流阻塞遠(yuǎn)端血管，導(dǎo)致栓塞發(fā)生。

高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）可通過RCT途徑將外周組織中的膽固醇運送回肝臟重新代謝，因此HDL具有抗AS的作用，低HDL血癥被認(rèn)為是AS的重要危險因素[2]。RCT過程十分復(fù)雜，由許多脂蛋白和酶參與，HDL是RCT過程中的關(guān)鍵介質(zhì)，而其它脂蛋白主要參與脂質(zhì)的傳遞。RCT過程主要包括膽固醇流出、酯化、轉(zhuǎn)移和攝取等，具體機(jī)制如下[3]：HDL由肝臟和小腸分泌后，在血液中LCAT的催化下，已結(jié)合ApoAⅠ的新生HDL表面卵磷脂上的酰基轉(zhuǎn)移到游離膽固醇上，生成膽固醇酯（cholesterol ester, CE），生成的CE不斷進(jìn)入HDL顆粒內(nèi)部，形成成熟的大球形HDL。HDL中的CE在膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白（cholesterol ester transfer protein, CETP）的作用下，轉(zhuǎn)移給其它脂蛋白。HDL中剩余的CE被肝臟攝取，經(jīng)肝臟代謝后由膽汁排出體外。在RCT過程中，LCAT是重要的關(guān)鍵酶；ApoA I是HDL的主要載脂蛋白，對維持HDL結(jié)構(gòu)和功能起到重要作用，也是LCAT的激活劑[4-5]。

Hcy是一種含硫的非蛋白氨基酸，也是蛋氨酸代謝過程中的重要中間產(chǎn)物。許多研究表明，HHcy可通過多種機(jī)制如介導(dǎo)脂質(zhì)代謝紊亂、氧化應(yīng)激和免疫炎癥等促進(jìn)AS的形成和發(fā)展[6-8]。本課題組前期研究結(jié)果顯示，HHcy可能通過影響脂質(zhì)代謝和介導(dǎo)氧化應(yīng)激促進(jìn)冠心病的發(fā)展[9]。本研究進(jìn)一步探討HHcy影響脂質(zhì)代謝的機(jī)制，HHcy是否可能通過抑制RCT導(dǎo)致AS的進(jìn)展。本研究結(jié)果顯示，HHcy組HDL-C，ApoAⅠ水平和LACT濃度顯著低于對照組，AS患者Hcy水平與HDL-C，ApoAⅠ水平和LCAT濃度均呈負(fù)相關(guān)。提示HHcy可能通過降低ApoAⅠ，HDL和LCAT水平，影響它們在RCT中的作用，導(dǎo)致AS的形成和發(fā)展。有文獻(xiàn)報道，ApoAⅠ或LCAT突變失活會抑制HDL的生物合成和成熟[10]。ApoAⅠ水平減少會降低LCAT活性，影響HDL成熟[11]。HHcy影響HDL抗AS功能的機(jī)制可能有[12]：①降低ApoAⅠ水平；②降低LCAT活性；③抑制HDL成熟；④HDL合成相關(guān)基因的表觀遺傳改變。由此可見，HHcy可以通過多種途徑降低HDL功能，抑制RCT過程，促進(jìn)AS進(jìn)展。但是HHcy如何影響Apo AⅠ，LCAT和HDL功能的具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。