Foxa2與老年胃息肉惡性進展的相關(guān)性

陳微微 代敏濤 吳旭 聶軍

(遵義醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院(遵義市第一人民醫(yī)院)消化內(nèi)科，貴州 遵義 563000)

胃息肉常好發(fā)于胃竇部及胃體，是生長在胃黏膜表面并向胃腔凸起的組織，常表現(xiàn)為局部胃黏膜結(jié)節(jié)樣、顆粒樣凸起，表面光滑、界限清楚，直徑常<2 cm，胃息肉的臨床表現(xiàn)缺乏特異性，單純的胃部息肉常無明顯的臨床表現(xiàn)，當機體合并其他消化道疾病，表現(xiàn)為腹部飽脹感、慢性反流、腹部疼痛及消化不良等癥狀，常在胃鏡檢查時發(fā)現(xiàn)。根據(jù)胃息肉的組織病理學特征將其分為增生性息肉、腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底性息肉，胃息肉被認為是癌前病變的征象，特別是直徑>2 cm的胃腺瘤性息肉〔1，2〕。胃癌是臨床嚴重的惡性腫瘤之一，治療預(yù)后較差，嚴重威脅生命安全，我國是胃癌高發(fā)國家，發(fā)病率與死亡率約占世界總發(fā)病與總死亡率的50%，疾病負擔相對較重，是癌癥防治重點〔3〕。研究表明，胃息肉和腫瘤抑制基因與癌基因的突變有關(guān)，基因突變導致腫瘤進展加快，臨床針對直徑>0.5 cm的胃息肉為防止癌變的可能，應(yīng)行胃鏡下切除、活檢，并行幽門螺桿菌(HP)根除治療，對胃息肉惡性進展的早期進行預(yù)防、治療具有重要意義〔4，5〕。叉頭框蛋白(Fox)a2為鼠疫DNA結(jié)合蛋白，其在個體胚胎發(fā)育的多個環(huán)節(jié)發(fā)揮重要作用，相關(guān)研究表明，F(xiàn)oxa2在諸多腫瘤中，如乳腺癌、肝細胞癌中均呈現(xiàn)低表達〔6，7〕。本研究旨在探討Foxa2在老年胃息肉患者機體中的表達，并分析其與老年胃息肉惡性進展的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1納入對象 本研究嚴格遵循本院醫(yī)學倫理委員會相關(guān)標準，選取遵義市第一人民醫(yī)院2015年10月至2018年9月內(nèi)鏡中心胃鏡檢查患者，根據(jù)計算機隨機抽取65例胃部息肉患者，隨機抽取同時期我院胃腸外科胃癌手術(shù)標本35例，根據(jù)鏡檢病灶組織的病理類型進行分組，將炎性或增生性胃息肉患者65例納入觀察1組，將進展期胃癌患者35例納入觀察2組。觀察1組男43例，女22例；年齡60～80歲，平均(70.85±5.32)歲。觀察2組男23例，女性12例；年齡60～80歲，平均(70.76±5.27)歲。選擇該時期內(nèi)體檢健康者45例為對照組，其中男28例，女17例；年齡60～80歲，平均(71.52±6.89)歲。納入標準：①胃鏡檢查明確胃部息肉存在；②臨床資料完整；③入組受試者均簽訂知情同意書。排除標準：①伴心、腦、腎等重要臟器功能受損者；②凝血功能異常者；③伴其他部位惡性腫瘤者。3組一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2Foxa2檢測方法 采用免疫組織化學染色檢測胃息肉組織中Foxa2表達情況，方法選用標準生物素-鏈霉卵白素-過氧化氫酶法進行組織染色，取石蠟4 μm進行切片、脫蠟、水化，采用pH為6.0的0.01 mol/L檸檬酸鹽緩沖液對其進行熱修復(fù)抗原，在室溫下冷卻15～20 min，3 ml/L Triton-X 100處理30 min，30 ml/L過氧化氫-甲醇封閉內(nèi)源性過氧化物酶活性，切片經(jīng)兔抗人Foxa2抗體與小鼠抗人E-鈣黏蛋白(cadherin)抗體在4℃條件下孵育12 h，沖洗之后，加入生物素標記的山羊抗小鼠二抗工作液，再次在室溫下孵育0.5 h；加入鏈霉卵白素工作液，在室溫下孵育0.5 h；加入二氨基聯(lián)苯胺(DBA)顯色，然后使用蘇木精輕度復(fù)染、脫水、封片。

1.3陽性表達判定 磷酸鹽緩沖液(PBS)代表一抗視為陰性對照，利用染色強度與陽性細胞的占比率聯(lián)合判定：染色強度主要采用0～3分4個等級：0分為陰性；1分為弱陽性；2分為中度陽性；3分為強陽性；陽性細胞百分比分級標準：0分為陽性細胞≤5%；1分為6%～25%；2分為26%～50%；3分為51%～75%；4分為>75%。Foxa2陽性表達：染色強度×陽性細胞占比≥2分。

1.4統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件進行單因素方差分析、χ2檢驗、雙變量Spearman相關(guān)性檢驗。

2 結(jié) 果

2.13組Foxa2表達 對照組、觀察1組、觀察2組Foxa2表達分別為(3.58±1.28)、(33.11±8.01)、(96.32±0.91)，3組差異有統(tǒng)計學意義(F=2 931.831，P<0.001)。

2.23組Foxa2陽性率比較 觀察2組Foxa2陽性率〔35例(100%)〕>觀察1組〔30例(46.15%)〕>對照組〔2例(4.44%)〕，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.3老年胃息肉惡性進展與Foxa2的相關(guān)性 Foxa2表達與老年胃息肉患者惡性進展呈正相關(guān)(r=0.538，P<0.001)。

3 討 論

近年來，全球胃癌發(fā)病率呈逐年下降趨勢，但盡管如此，我國胃癌的發(fā)病率仍處于較高水平，因此未來相當一段時間內(nèi)，胃癌仍是我國腫瘤防控的重要公共衛(wèi)生問題之一〔8〕。因胃癌屬于慢性疾病，起病隱匿，疾病進展漫長復(fù)雜，患者偶可伴有消化道類似癥狀外，諸多胃癌患者無明顯癥狀，發(fā)現(xiàn)時已處于疾病晚期，錯過治療的最佳時期〔9，10〕。因此，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對確定患者治療方案及改善預(yù)后具有重要意義。

胃息肉是胃黏膜的良性凸起，主要是由間質(zhì)細胞、上皮細胞及其他膠原成分組成，諸多患者常伴隨非特異性臨床癥狀，如腹脹、腹痛等，常包括胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉等病理類型〔11〕。針對臨床檢查發(fā)現(xiàn)的胃鏡下息肉是否需要切除應(yīng)根據(jù)胃息肉是否發(fā)生癌變決定，了解胃息肉的發(fā)生機制及與癌變的關(guān)系，探尋臨床可用于篩選胃息肉癌變風險的預(yù)測指標，對降低臨床胃息肉癌變的概率具有重要意義〔12，13〕。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)oxa2表達與老年胃息肉患者惡性進展呈正相關(guān)。分析其原因為，臨床常見的用于評估胃癌的發(fā)生風險與預(yù)后的指標主要有血管內(nèi)皮生長因子、胃干細胞與胃癌干細胞等，其主要為非特異性的廣譜分子標志，與細胞的增殖密切相關(guān)，其中血管內(nèi)生長因子主要反映腫瘤中小血管生成情況，據(jù)相關(guān)研究證實，Hedgehog及Wnt信號通路在胃腸道息肉發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用，F(xiàn)oxa2又稱為肝細胞核因子3β，作為一種DNA結(jié)合蛋白，在個體胚胎發(fā)育過程的諸多環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用〔14～16〕。趙金磊等〔17〕研究指出，F(xiàn)oxa2在肝癌、肺腺癌、乳腺癌等諸多惡性腫瘤的組織中表達缺失，可發(fā)揮抑癌基因的功能，其研究結(jié)果顯示，胰腺癌組織中Foxa2蛋白陽性呈現(xiàn)低表達，其陽性表達率較癌旁組織低，可發(fā)揮抑癌基因的功能，與胰腺癌細胞增殖、遷移與侵襲發(fā)生密切相關(guān)。王立斌等〔18〕研究指出，在肝細胞癌組織和細胞中Foxa2呈現(xiàn)低表達，可使HepG2細胞體外增殖與裸鼠體內(nèi)瘤體生長受到顯著抑制。Foxa2亞族蛋白對胃腸道內(nèi)內(nèi)分泌細胞與杯狀細胞的發(fā)育具有重要意義。Foxa2表達與胃息肉惡性進展的關(guān)系：正常胃黏膜中Foxa2僅少量存在腺體細胞中。

本研究仍具有不足之處：納入的樣本數(shù)量較少，且屬于單中心研究，上述因素均會導致本研究結(jié)果具有一定偏倚，因此希望在未來能夠就此展開多樣本、多中心的研究，對本研究結(jié)果加以證實，提高數(shù)據(jù)的真實性。

綜上，F(xiàn)oxa2表達與老年胃息肉惡性進展呈正相關(guān)，臨床可將Foxa2作為老年胃部息肉惡性進展的預(yù)測診斷指標。