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    15 ℃下O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌保鮮效果的影響

    2020-01-14 12:51:06黃雪員麗蘋謝瑤郭衍銀郭惠東李賀田學(xué)劉進(jìn)
    中國果菜 2019年12期
    關(guān)鍵詞:保鮮盒氣調(diào)羊肚

    黃雪,員麗蘋,謝瑤,郭衍銀*,郭惠東,李賀,田學(xué),劉進(jìn)

    (1.淄博市蔬菜辦公室,山東淄博 255000;2.山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院,山東淄博 255049;3.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所,山東濟(jì)南 250100;4.山東和生菌業(yè)科技有限公司,山東淄博 255100)

    羊肚菌由直徑3~4 cm的菌蓋和長度5~10 cm的菌柄組成,外部呈尖頂或圓頂型,內(nèi)部中空[1],因菌蓋表面為不規(guī)則多面凹陷皺褶似羊肚而得名[1-2]。羊肚菌含有18種氨基酸,其中8種人體必需氨基酸含量高出一般食用菌的25%~40%,并且C-3-氨基-L-脯氨酸、α-氨基異丁酸、2,4-二氨基異丁酸等幾種稀有氨基酸給羊肚菌帶來獨特奇鮮的風(fēng)味[3]。同時,羊肚菌還富含維生素A、D、E、K和鐵、鉀、磷、鎂、錳、鋅、鈣等礦物質(zhì)元素,以及豐富的具抗氧化和抗菌功能的酚類化合物[4-6],是一種珍貴的藥食兩用真菌。隨著人們生活水平的提高,以及對羊肚菌營養(yǎng)和保健價值的了解,羊肚菌的需求量逐年增多[7]。近年來,羊肚菌馴化栽培技術(shù)逐漸成熟[2]。但羊肚菌含水量高,組織脆嫩,放置在常溫下1 d,子實體即嚴(yán)重失水、軟爛并產(chǎn)生臭味,喪失商品價值[8]。目前,學(xué)者對羊肚菌保鮮貯藏研究較少,尤其是較高溫度下的保鮮方法鮮有報道。因此,探索一種適于物流運輸?shù)谋ur方式,對羊肚菌采后產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義[9]。

    主動自發(fā)氣調(diào)(Active modified atmosphere packaging,AMAP)是利用密封材料包裝、與外界無氣體交換的一種保鮮方式[10]。Ye等[11]研究表明,AMAP可以推遲香菇的呼吸和后熟,減少碳水化合物消耗,延緩香菇衰老。O2/CO2氣調(diào)(僅有O2和CO2兩種氣體)是近年來新提出的一種保鮮方式[12-13],其既可利用CO2抑制果蔬呼吸速率,又能利用高O2緩解CO2產(chǎn)生的傷害[14],體現(xiàn)出獨特的保鮮優(yōu)勢。為此,本研究擬利用AMAP技術(shù)結(jié)合O2/CO2氣調(diào),采用充入不同初始O2/CO2比例氣體進(jìn)行羊肚菌的主動自發(fā)氣調(diào),定期測定羊肚菌生理生化及品質(zhì)指標(biāo),探究其對羊肚菌保鮮效果。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    羊肚菌于2019年4月2日早晨采自山東和生菌業(yè)科技有限公司羊肚菌生產(chǎn)基地,采收后立即運到山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏實驗室冷庫內(nèi),4 ℃預(yù)冷3 h后,選擇大小一致、色澤均勻、無機(jī)械損傷的羊肚菌進(jìn)行試驗。

    甲醇、福林酚、三氯乙酸(TCA),國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供;碳酸鈉、硫代巴比妥酸(TBA),上海伯奧生物科技有限公司提供;磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鄰苯二酚、茚三酮,天津致遠(yuǎn)化學(xué)藥劑有限公司提供;干燥劑,上海添昌實業(yè)有限公司提供。所有藥品均為分析純。乙烯脫除劑,大連昕連鑫保鮮劑有限公司提供;無孔不透氣聚乙烯(PE)、材料封口膜(厚0.05 mm),上海創(chuàng)發(fā)包裝材料有限公司提供;17.5 cm×11.5 cm×7.5 cm(外觀尺寸,內(nèi)部容積為1 L)保鮮盒,路橋晨亨塑料廠提供。

    1.2 儀器與設(shè)備

    HL-2136型手持便攜式色差儀,瑞戈(上海)實業(yè)有限公司提供;GL-20G-2型臺式多功能高速冷凍離心機(jī),上海安亭儀器制造廠提供;UV-1750型紫外可見分光光度計,島津國際貿(mào)易有限公司提供;AL-104型精密分析天平,梅特勒-托利多儀器有限公司提供;WYT型折光儀,杭州三永德儀器儀表有限公司提供;MR-07825-00型O2/CO2測定儀,美國FBI Dansensor公司提供;RDL380P型氣調(diào)包裝機(jī),羅迪波爾機(jī)械設(shè)備有限公司提供。

    1.3 試驗設(shè)計

    試驗設(shè)置5個處理,每個處理15盒樣品。將羊肚菌裝入保鮮盒中,每個保鮮盒內(nèi)放入250 g左右的羊肚菌,3包干燥劑(每包約2 g)和2包乙烯脫除劑(每包約4 g)。然后使用氣調(diào)包裝機(jī)進(jìn)行置換,充入氣體比例分別 為100% O2、90% O2+10% CO2、80% O2+20% CO2、70% O2+30% CO2和自然大氣(CK),之后將其置于(15±0.5) ℃冷庫中貯藏,每天進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測定,每個指標(biāo)重復(fù)試驗3次。

    表1 感官評定標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Criteria for sensory evaluation

    1.4 測定指標(biāo)及方法

    1.4.1 羊肚菌感官評定

    由10位經(jīng)過培訓(xùn)的感官評定人員根據(jù)表1對樣品進(jìn)行感官評定,總分40分。

    1.4.2 CO2含量

    用MR-07825-00型O2/CO2分析儀測定保鮮盒內(nèi)頂空氣體。

    1.4.3 失重率

    采用稱量法進(jìn)行測定。

    1.4.4 色度L*

    用色差儀測定羊肚菌菌蓋,每盒取10根樣品,每個樣品選取3個不同部位測定,取平均值。

    1.4.5 可溶性固形物含量

    取羊肚菌5 g,研磨后3層紗布過濾,用手測定。

    1.4.6 蛋白質(zhì)含量

    采用考馬斯亮藍(lán)法[15]測定。

    1.4.7 游離氨基酸含量

    采用Li等[16]方法測定。

    1.4.8 PPO含量

    參照張麗[17]的方法進(jìn)行測定,取羊肚菌1.0 g,5 mL磷酸鹽緩沖液冰浴研磨,10 000 r/min低溫離心15 min后,取50 μL上清液加入反應(yīng)液(1.95 mL的磷酸鹽緩沖液加0.5 mL、0.1 mol/L的鄰苯二酚,25 ℃預(yù)熱,測定波長410 nm處吸光值3 min內(nèi)的變化,每10 s記一次。一個酶活性單位(U)定義為每分鐘引起OD值改變0.001所需的酶量。

    1.4.9 呼吸速率

    采用Castelló 等[18]的方法計算,以單位時間內(nèi)保鮮盒內(nèi)CO2含量的增加為計算依據(jù)。

    1.5 數(shù)據(jù)分析

    所有試驗數(shù)據(jù)利用Orgin8.0進(jìn)行處理,采用SPSS19.0軟件進(jìn)行LSD顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌外觀的影響

    由圖1可知,第0 d時羊肚菌外觀完好,切開后內(nèi)部呈白色,內(nèi)表面光滑無凸起。第2 d時,CK處理的羊肚菌菌柄褐變呈深褐色,子實體軟爛,并伴有腐臭味,自溶嚴(yán)重,失去商品價值,說明羊肚菌保鮮期極短,短時間內(nèi)品質(zhì)會嚴(yán)重下降。第3 d時,70% O2+30% CO2處理的羊肚菌表面出現(xiàn)發(fā)霉現(xiàn)象,菌蓋出現(xiàn)大面積白色,切開后內(nèi)部出現(xiàn)少量白色突起;80% O2+20% CO2開始軟爛,切開后內(nèi)部出現(xiàn)大量白色小突起,和CK品質(zhì)劣變表現(xiàn)一致;90% O2+10% CO2外觀品質(zhì)較好,無軟爛發(fā)霉異味表現(xiàn);100% O2菌蓋菌柄顏色泛白,切開后內(nèi)部白化嚴(yán)重,且組織變脆。

    圖1 貯藏期間羊肚菌外觀及內(nèi)部形貌Fig.1 The outer and inner appearance of Morehella esculenta during storage

    2.2 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌感官評分的影響

    如圖2(見下頁)所示,羊肚菌感官評分隨貯藏時間的延長而下降,貯藏2 d內(nèi),CK顯著低于其他處理(P<0.05),其他處理間差異不顯著(P>0.05)。第3 d時,90%O2+10% CO2、70% O2+30% CO2、100% O2和80% O2+20%CO2的綜合評分分別為26、20、18和18分,且90% O2+10% CO2評分顯著高于其他處理(P<0.05)。

    圖2 主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌感官評分的影響Fig.2 Effects of O2/CO2AMAP on sensory score of Morehella sextelata

    2.3 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌菌蓋色度L*的影響

    色度L*表示樣品的亮暗程度,各處理菌蓋L*值呈不同變化趨勢(圖3)。由圖可知,70% O2+30% CO2、90%O2+10% CO2和100% O2處理呈上升趨勢,分別從0 d的20.63增加到3 d的22.85、21.75和24.83,但90% O2+10% CO2上升幅度最小。80% O2+20% CO2處理的菌蓋L*值前2 d變化不大,分別為21.05和21.08,第3 d則迅速下降至18.6,這與菌蓋嚴(yán)重褐變有關(guān)。

    圖3 主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌色度L*的影響Fig.3 Effects of O2/CO2AMAP on L*of Morehella sextelata

    2.4 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)保鮮盒內(nèi)CO2含量和羊肚菌呼吸速率變化

    由于保鮮盒內(nèi)只充入O2、CO2兩種氣體,所以只測定了CO2含量,剩余氣體即為O2含量。如圖4A所示,雖然初始CO2濃度不同,但貯藏期間所有處理CO2濃度均呈上升趨勢。100% O2增加速度最快,第3 d時達(dá)到80%以上,顯著高于90% O2+10% CO2處理(P<0.05),表明過高的初始O2促進(jìn)了羊肚菌的呼吸作用。90% O2+10% CO2處理的CO2含量一直處于較低水平,有效抑制了羊肚菌的呼吸代謝。整個貯藏期間,70% O2+30% CO2和80%O2+20% CO2處理CO2含量一直高于其他處理,這與充入較高的初始CO2有關(guān)。

    圖4 貯藏期間保鮮盒內(nèi)CO2含量變化(A)及主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌呼吸速率(B)影響Fig.4 CO2content (A) in container and the respiratory rate(B) of Morehella sextelata under O2/CO2AMAP

    圖4B顯示了各處理的呼吸速率變化趨勢不同。CK處理第1 d出現(xiàn)高峰后迅速下降,這與保鮮盒內(nèi)O2迅速消耗有關(guān)。70% O2+30% CO2、80% O2+20% CO2和100%O2處理表現(xiàn)出明顯的呼吸躍變,呼吸高峰均出現(xiàn)在第2 d,峰值分別為101.30、100.91、122.48 mg-1·kg-1·h-1,之后迅速下降,但100% O2處理的呼吸速率顯著高于其他兩個處理(P<0.05)。90% O2+10% CO2處理前2 d呼吸速率基本平穩(wěn)且顯著低于其他氣調(diào)處理(P<0.05),之后開始上升,表明該處理可有效抑制羊肚菌的呼吸作用。

    2.5 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌失重率和可溶性固形物含量的影響

    羊肚菌失重率變化如圖5A所示,由圖可知,隨著貯藏時間的延長,所有處理失重率均呈增加趨勢,前2 d內(nèi),100% O2失重率高于其他處理,這與過高的呼吸代謝有關(guān)。第3 d時,80% O2+20% CO2處理失重率為2.88%±0.09%,顯著高于其他處理(P<0.05),這與該處理條件能促進(jìn)子實體厚度變薄、軟爛及水分析出有關(guān)。整個貯藏期間,90% O2+10% CO2處理的失重率表現(xiàn)較低。

    整個貯藏期間,羊肚菌可溶性固形物含量均呈下降趨勢(圖5B),這是由于糖是呼吸代謝的底物,糖的分解導(dǎo)致了可溶性固形物含量的下降。其中以CK處理下降最快,2 d內(nèi)下降了47.43%。與CK相比,氣調(diào)處理顯著延緩了羊肚菌可溶性固形物含量的下降(P<0.05),且在第3 d時90% O2+10% CO2表現(xiàn)最高。

    圖5 主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌失重率(A)和可溶性固形物含量(B)的影響Fig.5 Effects of O2/CO2AMAP on weight loss rate (A) and soluble solids content (B) of Morehella sextelata

    2.6 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌可溶性蛋白質(zhì)和游離氨基酸含量的影響

    如圖6A所示,所有處理的羊肚菌在可溶性蛋白質(zhì)含量第1 d內(nèi)無明顯變化,之后迅速上升。在氣調(diào)處理中,以90% O2+10% CO2處理的可溶性蛋白質(zhì)含量上升最快,在1~3 d上升了64.54%;100% O2處理上升的最慢,1~3 d上升了53.08%??扇苄缘鞍踪|(zhì)含量的升高可能與貯藏期間蛋白質(zhì)及代謝酶的活化有關(guān)[19]。

    圖6 主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌可溶性蛋白質(zhì)(A)和游離氨基酸(B)含量的影響Fig.6 Effects of O2/CO2AMAP on protein (A) and amino acid content (B) of Morehella sextelata

    貯藏期間羊肚菌游離氨基酸呈先升后降趨勢(圖6B),上升與蛋白質(zhì)代謝轉(zhuǎn)化為氨基酸有關(guān),而下降則與氨基酸的代謝消耗有關(guān)[20]。但就平均含量而言,90% O2+10% CO2含量最高,為(276.49±4.92) mg/100 g;其次為80% O2+20% CO2處理,平均含量為(260.89±8.86) mg/100 g;較低的為70% O2+30% CO2和CK處理,平均含量分別為(245.85±7.65) mg/100 g和(239.08±12.31) mg/100 g。

    2.7 O2/CO2主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌PPO活性的影響

    PPO是引發(fā)酶促褐變的關(guān)鍵酶,其將酚類物質(zhì)氧化成醌類,醌類物質(zhì)相互聚集為黑色素造成褐變[21]。如圖7所示,貯藏期間各處理羊肚菌PPO活性均呈上升趨勢,但增加幅度有所不同。其中,以90% O2+10% CO2增幅最小,3 d內(nèi)增加了9.85%;CK增幅最大,2 d內(nèi)增加了42.83%。

    圖7 主動自發(fā)氣調(diào)對羊肚菌和PPO活性的影響Fig.7 Effects of O2/CO2AMAP on polyphenol oxidase of Morehella sextelata

    3 討論

    本試驗選擇保鮮溫度為15 ℃,主要依據(jù)是羊肚菌在華北地區(qū)一般3月中旬采收,其平均溫度在10 ℃左右[22],同時兼顧往南方運輸?shù)目赡苄?,故選用溫度較高的15 ℃。如果在10 ℃下采用該氣調(diào)技術(shù),羊肚菌的保鮮期會適當(dāng)延長。15 ℃下90% O2+10% CO2的AMAP處理可保鮮羊肚菌3 d,該結(jié)果對短期物流(3 d內(nèi))保鮮具有一定的實用價值,至于長期物流保鮮的技術(shù)要求,尚需進(jìn)一步研究。

    Charles等[23]研究表明,相較于被動自發(fā)氣調(diào),AMAP建立氣體平衡的時間縮短50%,且有效延緩菊苣褐變。就本試驗結(jié)果而言,15 ℃下羊肚菌保鮮期3 d左右,因此,保鮮盒內(nèi)氣體迅速達(dá)到平衡起到重要作用,CK處理僅能保鮮1 d的結(jié)果也證實了這一點。

    在密閉保鮮盒內(nèi),充入的初始?xì)怏w成分和比例與植物呼吸消耗O2生成CO2過程密切相關(guān)[24]。本試驗中,100%O2處理由于過高的初始O2比例,貯藏前期刺激了羊肚菌的呼吸作用,較高的呼吸作用加快了營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,從而加速了羊肚菌衰老。70% O2+30% CO2和80% O2+20% CO2處理由于初始CO2比例較高,加上呼吸造成的CO2積累,使CO2含量過高,剩余O2也不足以緩解高CO2帶來的傷害,同樣不利于羊肚菌的保鮮。90% O2+10%CO2處理既可通過高CO2抑制了羊肚菌呼吸速率,適當(dāng)水平的O2含量又緩解了CO2傷害,故能較好的對羊肚菌進(jìn)行保鮮。

    相較于CK處理的羊肚菌1 d保鮮期,90% O2+10%CO2的主動自發(fā)氣調(diào)處理可有效抑制羊肚菌失重率上升,維持可溶性蛋白質(zhì)和氨基酸含量,保持較好羊肚菌色澤和感官品質(zhì),可在(15±0.5)℃下延長羊肚菌保鮮期至3 d。過高或過低的O2/CO2初始比例,均不利于羊肚菌的保鮮。

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