珍稀植物廣東含笑嫁接繁殖技術(shù)

容文婷，李遠(yuǎn)球，潘發(fā)光，曾陽金，黃林生，易綺斐

(1.中國科學(xué)院華南植物園，廣東 廣州 510520； 2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院，廣東 廣州 510225；3.廣東石門臺國家級自然保護(hù)區(qū)管理局，廣東 英德 513039)

廣東含笑(Micheliaguangdongensis)隸屬于木蘭科含笑屬，僅分布于廣東清遠(yuǎn)英德市，是近年來新發(fā)現(xiàn)的廣東特有樹種，生于海拔1250～1400 m的中亞熱帶山地常綠落葉闊葉混交林中及山頂灌叢中[1]。種群規(guī)模非常小，野外種群數(shù)量相當(dāng)稀少，處于十分稀有的瀕危狀態(tài)，受到相關(guān)專家的關(guān)注，極力推薦為極小種群保護(hù)，目前，《中國生物多樣性紅色名錄——高等植物卷》已將廣東含笑列為瀕危物種[2]。廣東含笑的嫩枝、老葉底部及葉柄、花蕾密披紅褐色柔毛，柔毛呈繡色，光澤閃亮，樹形美觀，花開如笑，花香襲人，具有很高的觀賞價值，即可布置庭院，又宜室內(nèi)盆栽，是一類具有巨大潛在應(yīng)用前景的珍貴園林植物[3-5]。

廣東含笑在自然狀態(tài)下繁殖力差是其面臨瀕危的主要原因之一[6]。目前仍處于野生未被廣泛開發(fā)階段，在園林中未進(jìn)行廣泛應(yīng)用[1]。該種的遷地保護(hù)狀況不理想，遷地栽培的植株只有嫁接苗可存活，而對其嫁接繁殖技術(shù)的研究尚少。嫁接是把同一植株或不同植株的某個部位進(jìn)行相互連接，使其能正常生長發(fā)育，重新形成一個完整植株的繁殖方式[7]，可保持植物優(yōu)良遺傳特性，又能提早開花結(jié)實(shí)，達(dá)到縮短選育周期的目的，特別對結(jié)實(shí)率低的樹種更具有現(xiàn)實(shí)意義[8]，嫁接也是挽救珍稀瀕危植物的方法之一[9]。本試驗(yàn)用黃蘭作為砧木對不同海拔地點(diǎn)采集的廣東含笑接穗進(jìn)行嫁接，探索最優(yōu)良的接穗和最適嫁接時間，為廣東含笑嫁接育苗和擴(kuò)大生產(chǎn)，以及為珍稀植物的遷地保護(hù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于廣東省石門臺自然保護(hù)區(qū)(113°01′11″—113°46′22″E、24°17′49″—24°31′02″N)，英德市的北部，面積達(dá)822.60 km2，是廣東省面積最大、植被保存較完好的森林生態(tài)系統(tǒng)自然保護(hù)區(qū)。地處南亞熱帶與中亞熱帶過渡的地帶，具有光照充足、溫暖濕潤、雨量充沛的氣候特點(diǎn)，屬亞熱帶季風(fēng)氣候[6]。

1.2 試驗(yàn)材料

接穗采集于廣東省石門臺自然保護(hù)區(qū)內(nèi)的前進(jìn)、上天堂、金子山、木籠頂和船底頂5個不同的分布點(diǎn)，2016年和2017年接穗采集的分布點(diǎn)的海拔高度見表1。選擇節(jié)間較長、芽飽滿的當(dāng)年生枝條，從葉柄處剪掉葉片，用濕紙巾、濕苔蘚混合保濕，外面用濕毛巾包裹，裝進(jìn)密封袋。為防止途中穗條之間、背部與背包之間壓實(shí)起熱，應(yīng)翻動多次。采集的接穗宜當(dāng)天嫁接，當(dāng)天嫁接不完的宜用濕紙巾、濕苔蘚或濕毛巾包裹后放置冰箱1～3 ℃保鮮，保持穗條的水分，防止干枯，便利嫁接。接穗個數(shù)分為：1個，2個，3～5個3個組別。

1.3 嫁接方法

采用斷砧切接和髓心形成層對接法[10-13]。主要分為砧木修剪處理、接穗切削、砧木切削、形成層對齊嫁接、捆綁和套袋等6個步驟：先在需嫁接的砧木0.5～1 m的高度進(jìn)行修剪處理；選取芽飽滿的當(dāng)年生接穗枝條(頂芽除外)，在芽的反面切削一刀，深達(dá)髓心，再反切一刀形成楔形；在光滑的砧木嫁接部位豎著切一刀，刀口保持平滑，寬度與接穗相當(dāng)或稍大，深度剛好到木質(zhì)部，保留樹皮一小段后切斷；接穗與砧木形成層對齊嫁接，在嫁接過程中，要注意保護(hù)接穗的頂芽，使其不受傷害；捆綁，用塑料條從下切口以下約0.5 cm處開始進(jìn)行螺旋式綁扎；套薄膜袋保濕，減弱蒸騰作用，減少水分散失。

表1 各接穗來源的海拔高度

*：QG為前進(jìn)，SG為上天堂，JG為金子山，MG為木籠頂，CG為船底頂；編號使用1～42。下同。

1.4 嫁接時間

嫁接時間主要分為3個時間段，詳見表2。

1.5 嫁接后的苗木管理

嫁接15 d后拆薄膜袋觀察，凡接芽芽體新鮮的即已成活，若芽片萎縮即未成活，接芽萌發(fā)后要及時除掉砧木上的萌芽和其上的枝條；發(fā)現(xiàn)未成活的植株進(jìn)行適當(dāng)補(bǔ)接。2015年和2016年的嫁接苗未進(jìn)行砧木側(cè)芽的去除，2017年對嫁接苗進(jìn)行砧木側(cè)芽的去除。

表2 2015—2017年的嫁接時間

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)利用Microsoft Office Excel 2007軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)算，繪制圖表；用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 嫁接方法對嫁接成活率的影響

在砧木條件相同的情況下，分別用2種嫁接方法對廣東含笑進(jìn)行嫁接。由表3看出，2015年進(jìn)行了2種嫁接方法，發(fā)現(xiàn)髓心形成層對接法嫁接的成活率明顯高于斷砧切接嫁接的成活率，說明斷砧切接的嫁接方法不適用于廣東含笑。因此，2016—2017年均采用髓心形成層對接法對苗木進(jìn)行嫁接。

表3 不同嫁接方法對廣東含笑嫁接成活率的影響

*：株數(shù)成活率=成活株數(shù)/嫁接株數(shù)×100%；接穗成活率=成活接穗數(shù)/接穗個數(shù)×100%。

2.2 接穗來源及接穗個數(shù)對嫁接成活率的影響

圖1 各接穗來源嫁接成活率

對2015—2017年不同采集地點(diǎn)的接穗進(jìn)行嫁接成活率統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)不同接穗來源的嫁接成活率存在差異(圖1)。從嫁接株數(shù)成活率來看，源于上天堂的接穗嫁接株數(shù)成活率最高，達(dá)57.35%；其次株數(shù)成活率較高的是源于木籠頂?shù)慕铀耄_(dá)43.36%；源于前進(jìn)和船底頂?shù)慕铀爰藿又陻?shù)成活率差異不大，分別為37.76%和35.60%；而源于金子山的接穗嫁接株數(shù)成活率最低，僅為23.02%。從接穗成活率來看，成活率最高的仍是源于上天堂的接穗，達(dá)55.59%；木籠頂和船底頂?shù)慕铀爰藿映苫盥什町惒淮?，分別為35.95%和35.46%；而來源于前進(jìn)的接穗成活率最低，僅為19.96%。

對2016年與2017年采集于不同海拔高度的接穗進(jìn)行嫁接成活率比較，發(fā)現(xiàn)2016年的嫁接成活率受到接穗來源海拔高度的影響，隨著接穗來源海拔高度的上升，不論是嫁接株數(shù)成活率還是接穗成活率均有明顯下降的趨勢。其中源于前進(jìn)的接穗QG34(海拔929 m)成活率最高，株數(shù)成活率和接穗成活率分別達(dá)76.92%和72.22%；而金子山的接穗JG系列(海拔1132～1146 m)的嫁接成活率均處于極低的水平；木籠頂和船底頂?shù)慕铀隡G7-CG9系列的嫁接成活率呈波動性下降趨勢，成活率0.00%～45.71%(圖2)。年平均株數(shù)成活率和接穗成活率為16.87%和14.84%。

2017年的嫁接成活率與接穗來源的海拔高度并沒有十分明顯的線性關(guān)系，隨著接穗來源的海拔高度的上升，嫁接成活率呈波動性變化。其中源于上天堂的接穗SG4(海拔1035 m)的成活率最高，株數(shù)成活率和接穗成活率分別達(dá)92.11%和81.97%；株數(shù)成活率最低的接穗來源是船底頂?shù)腃G1(海拔1543 m)，只有22.22%，接穗成活率最低的接穗來源是前進(jìn)的QG5(海拔978 m)，只有23.08%(圖3)。年平均株數(shù)成活率和接穗成活率為65.08%和56.84%，2017年廣東含笑的嫁接成活率明顯高于2016年。

看到這個媽媽的問題，這些舊事一下子浮現(xiàn)在腦海。在“閱讀”這件事兒上，我們中國是真正的發(fā)展中國家。我小時候，絕大多數(shù)家長對孩子的關(guān)注還停留在吃飽穿暖上；比我小一輪的80后，大人們的關(guān)注或許已經(jīng)轉(zhuǎn)移到了學(xué)習(xí)上，但是我認(rèn)為也是停留在“成績”上。我小時候的中文閱讀，完全沒有閱讀內(nèi)容來匹配我的閱讀興趣，所以才會有爬墻上看報(bào)紙的經(jīng)歷；80后的情況大為改觀，父母手頭寬裕，可以有錢來買一些課外書，不過大多數(shù)父母更愿意掏錢給孩子買題庫吧。

采集點(diǎn)從左到右海拔高度逐漸上升，下同。圖2 2016年不同接穗來源的廣東含笑的嫁接成活率

圖3 2017年不同接穗來源的廣東含笑嫁接成活率

不同接穗個數(shù)對廣東含笑的嫁接成活率亦有影響，由表4可知，1個接穗個數(shù)與2個接穗個數(shù)的株數(shù)成活率差異不顯著，2個接穗個數(shù)與3～5個接穗個數(shù)的株數(shù)成活率差異不顯著，而1個接穗個數(shù)與3～5個接穗個數(shù)的株數(shù)成活率差異顯著，3～5個接穗個數(shù)的株數(shù)成活率顯著高于1個接穗個數(shù)的株數(shù)成活率(P<0.05)；但接穗個數(shù)對接穗成活率的影響不大，3組的接穗成活率差異不顯著。

表4 不同接穗個數(shù)的廣東含笑嫁接成活率 %

*：不同字母為不同接穗個數(shù)成活率的差異顯著(P<0.05)，相同字母為差異不顯著(P>0.05)，下同。

2.3 砧木苗齡、砧木粗度等對嫁接成活率的影響

3 a的嫁接試驗(yàn)中利用的砧木為1～3年生的黃蘭，由表5可看出，嫁接株數(shù)成活率及接穗成活率均為3年生的砧木>1年生的砧木>2年生的砧木。說明以3年生的黃蘭作為砧木最適合廣東含笑的嫁接。而1年生的砧木嫁接成活率高于2年生的原因可能是1年生砧木嫁接的數(shù)量比2年生砧木嫁接數(shù)量少，而且1年生砧木嫁接時采用的接穗多數(shù)來源于上天堂(SG4)，接穗質(zhì)量更優(yōu)更易存活，導(dǎo)致1年生的砧木嫁接的成活率明顯高于2年生的砧木。

2.4 嫁接時間對嫁接成活率的影響

在2015—2017年期間，以2016年12月下旬(12月29—30日)嫁接的株數(shù)成活率和接穗成活率最高，分別為79.14%和68.84%；其次是2017年1月下旬—2月上旬(1月24日—2月4日)株數(shù)成活率為65.06%，接穗成活率為56.96%；嫁接成活率最低的時間是2016年3月上旬(3月5—10日)，株數(shù)成活率和接穗成活率只有6.50%和5.63%。其余時間的嫁接成活率在15.19%～48.05%之間(表6)。

冬季(2016年12月下旬、2017年1月中旬、2017年1月下旬—2月上旬)嫁接的平均株數(shù)成活率和平均接穗成活率分別為64.08%和53.87%，顯著高于春季嫁接(P<0.05)。這說明不同嫁接時間(季節(jié))對嫁接成活率有顯著影響。冬季(12月下旬、1月)比春季(2、3月)更適合廣東含笑嫁接(表7)。

表5 砧木年齡、粗度及接口高度對廣東含笑嫁接成活率的影響

表6 廣東含笑不同時間段的嫁接數(shù)目及成活率

2.5 除去蘗芽對嫁接成活率的影響

本試驗(yàn)中2017年嫁接后對苗木進(jìn)行砧木側(cè)芽的去除，而2015年和2016年沒有對苗木進(jìn)行砧木側(cè)芽的去除。從整體的嫁接成活率比較中可看出(表6)，2017年(冬季)的嫁接株數(shù)成活率和接穗成活率顯著高于2015年(春季Ⅰ)和2016年(春季Ⅱ)。由此證明，嫁接后對砧木側(cè)芽適當(dāng)?shù)娜コ苊黠@提高嫁接苗的成活率。

表7 廣東含笑2015—2017年的嫁接成活率 %

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

通過3 a的嫁接試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，髓心形成層對接的嫁接方法適用于廣東含笑的嫁接。源于上天堂(海拔1035 m)的接穗SG4的嫁接成活率最高，株數(shù)成活率和接穗成活率分別達(dá)92.11%和81.97%，說明上天堂的接穗優(yōu)于其余地點(diǎn)分布的接穗。不同接穗個數(shù)對嫁接株數(shù)成活率有影響，總體表現(xiàn)為接穗個數(shù)越多株數(shù)成活率越高，3～5個接穗的株數(shù)成活率顯著高于1個接穗的株數(shù)成活率。砧木選用3年生的黃蘭，粗度為2～4 cm，接口高度為1 m的廣東含笑嫁接成活率及接穗成活率最高。廣東含笑的最佳嫁接時間為12月底—翌年1月，株數(shù)成活率、接穗成活率分別達(dá)79.14%、68.84%。嫁接后除去蘗芽能顯著提高嫁接成活率。

3.2 討論

不同接穗來源對廣東含笑嫁接成活率有不同影響。許多研究表明[14-16]，嫁接成活率不僅受到溫度、光照、水分、病原微生物、嫁接方法和技術(shù)等外界因素的影響，還與嫁接的親和性、接穗的生活力及其生物學(xué)特性等內(nèi)在因素有關(guān)。從本試驗(yàn)結(jié)果看，不同來源的接穗嫁接成活率有差異，但其差異與接穗來源的海拔高度不呈明顯的線性關(guān)系。成活率最高的接穗采集于上天堂，而其它海拔高度(高于上天堂的金子山、木籠頂、船底頂或低于其海拔高度的前進(jìn))的接穗嫁接成活率均較低。廣東含笑葉片背面顏色特征存在3種不同類型，葉片背面深紅色且多絨毛、葉片背面紅色較淡且絨毛較少(過渡型)以及葉片背面完全呈綠色且無絨毛。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采集于上天堂的接穗較多為過渡型接穗，以此表明，不同來源的接穗可能因其個體差異而導(dǎo)致接穗成活率不同，過渡型的接穗優(yōu)于其它種類的接穗，因此嫁接成活率更高。

有關(guān)茶樹嫁接接穗數(shù)量對茶樹開花的研究發(fā)現(xiàn)2～4個接穗可以使嫁接苗開花數(shù)量達(dá)到最高[17]，與此類同，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)接穗個數(shù)亦是影響廣東含笑嫁接成活率的因素之一，一般來說每株嫁接3～5個的接穗個數(shù)為宜，這一結(jié)果與黃明東等[18]廣寧紅山茶嫁接繁殖技術(shù)的研究相似。在實(shí)際嫁接繁殖生產(chǎn)中應(yīng)綜合具體情況給予考慮，選擇最優(yōu)的接穗來源以及接穗個數(shù)。

本研究發(fā)現(xiàn)1～2年生和地徑1～2 cm的砧木嫁接成活率低于3年生和地徑2～4 cm的砧木嫁接成活率，即年齡大的砧木嫁接成活率最高。與此相似，此前有研究表明，砧木品種相同時，年齡越大的砧木對嫁接苗的生長越有利[19]。但本試驗(yàn)設(shè)計(jì)上存在一定漏洞，不同年齡的砧木的嫁接數(shù)量差異較大，所用的接穗來源亦不同，所以導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)1年生的砧木嫁接成活率高于2年生砧木的情況，同時嫁接成活率也與砧木的質(zhì)量有關(guān)，當(dāng)砧木處在生長旺盛期可能更有利于嫁接成活。

嫁接時間(季節(jié))是決定嫁接成活率的重要因素。大量研究表明，不同的植物最佳嫁接時間不同，如樟子松嫩枝嫁接的最佳時間是6月上中旬[11]，適合野扁桃的嫁接時間為春季和初秋(3月和8月中旬)[20]，黃連木的最適嫁接育苗時間在4月上旬[21]，櫻花的最佳嫁接時間于秋季(10月上旬—11月底)[22]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)嫁接時間是影響廣東含笑成活率最關(guān)鍵的因素之一，廣東含笑的最佳嫁接時間為12月底—翌年1月，這可能與廣東含笑原始的生態(tài)習(xí)性相關(guān)，廣東含笑原產(chǎn)于較高海拔的冷涼高山環(huán)境。姜春寧等[23]的研究表明廣東含笑嫁接苗具有一定的抗寒能力，12月底—翌年1月正是當(dāng)?shù)氐蜏丶竟?jié)，嫁接體形成層的活動和愈傷組織的形成會受到溫度的影響[24]，廣東含笑需要萌發(fā)側(cè)芽，此過程相對其它樹種較長，冬接后，正好有一個冬季休眠期，待2—3月份時，正好是廣東含笑開始復(fù)蘇萌動的時期，溫暖潮濕的氣候條件有利于嫁接成活，因此，廣東含笑可以采用冬、春嫁接，以冬季嫁接最好，從節(jié)令上說是在冬至前后30 d。

許多研究發(fā)現(xiàn)[25-27]，苗木管理也是影響嫁接成活率的重要因素。本研究中2015年和2016年沒有對嫁接后的苗木進(jìn)行砧木側(cè)芽的去除，砧木側(cè)芽的生長抑制了嫁接芽的生長，從而導(dǎo)致嫁接成活率較低，2017年因去除了砧木側(cè)芽，成活率有了顯著性的提高，這一點(diǎn)與山杏嫁接繁殖技術(shù)研究結(jié)果一致[28]。

綜上所述，影響珍稀植物廣東含笑嫁接成活率的因素是多方面的，除本試驗(yàn)探討的因素外，還有嫁接溫度、濕度以及嫁接人員的技術(shù)等方面的因素都會對嫁接成活率造成一定影響，有待后續(xù)深入研究。