針灸對免疫分子的調(diào)節(jié)作用研究進展※

范任重 金春玉

(延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院2015級本科生，吉林 延吉 133002)

免疫系統(tǒng)是由免疫組織器官、免疫細胞和免疫分子組成，對機體除保護作用外，當(dāng)免疫功能過強、低下或調(diào)節(jié)異常時，也可引起免疫損傷[1]。針灸的作用性質(zhì)屬功能調(diào)節(jié)，通過激發(fā)自愈力而獲效，穴位作用范圍具有選擇性調(diào)節(jié)和泛調(diào)節(jié)雙重效應(yīng)，這和免疫調(diào)節(jié)作用有很多相似之處[2]。我們通過綜述針灸對免疫活性分子影響的相關(guān)研究，進一步探究免疫失調(diào)或損傷性疾病的針灸治療切入點。

1 針灸對體液B細胞和T細胞的影響

針灸調(diào)節(jié)免疫功能的根本機制是機體的自穩(wěn)態(tài)機制對針灸干預(yù)的整合與利用，而自穩(wěn)態(tài)機制是自組織系統(tǒng)的典型特征，自組織特性是生物進化的結(jié)果。所謂體液免疫，即以效應(yīng)B細胞產(chǎn)生抗體來達到保護目的的免疫機制。免疫球蛋白(Ig)指具有抗體(Ab)活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白，測定Ig是檢測體液免疫功能最常用的方法。免疫球蛋白分為5類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。細胞免疫，狹義僅指T淋巴細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答；廣義包括原始的吞噬作用以及自然殺傷(NK)細胞介導(dǎo)的細胞毒作用。

1.1 臨床研究 針灸調(diào)節(jié)免疫具有三大特征，即雙向良性調(diào)節(jié)、飽和調(diào)節(jié)、多靶點調(diào)節(jié)。郁慧杰等[3]將107例機械通氣的危重癥患者隨機分3組。常規(guī)組36例予營養(yǎng)支持療法治療；針刺組34例予雙側(cè)足三里、上巨虛、合谷、曲池穴針刺治療；電針組37例予雙側(cè)足三里、上巨虛、合谷、曲池穴電針治療。3組均治療7 d。結(jié)果：治療后電針組外周血淋巴細胞計數(shù)、CD4+和CD4+/CD8+及IgG、IgA均升高(P<0.05)。說明電針可糾正患者的高分解代謝狀態(tài)和負(fù)氮平衡，加速受體組織和免疫功能的修復(fù)。楊杰等[4]將12名男子散打運動員分為2組。艾灸組6例每日訓(xùn)練結(jié)束后晚上做常規(guī)放松，并艾灸雙側(cè)腎俞穴30 min，每周5次，持續(xù)8周；對照組6例每日訓(xùn)練結(jié)束后，晚上只做常規(guī)放松。冬訓(xùn)開始前1 d和8周結(jié)束后對受試者進行血液檢測。結(jié)果：試驗后艾灸組血清睪酮、IgG、IgA含量升高(P<0.05)，但對照組無變化。說明艾灸腎俞穴有助于維持運動員機體免疫功能的穩(wěn)定。Li G等[5]將51例開顱手術(shù)患者隨機分為3組。對照組18例予常規(guī)西醫(yī)治療；電針組19例予電針合谷、外關(guān)、承扶、太沖等穴位治療；經(jīng)皮神經(jīng)電刺激(TENS)組14例予經(jīng)皮神經(jīng)電刺激治療。分別于麻醉前(T0)、麻醉誘導(dǎo)后30 min(T1)、2 h(T2)、4 h(T3)采集血樣，測定IgM、IgA、IgG及腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平。結(jié)果：電針組、TENS組各時間點IgM、IgA、IgG水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在T2和T3時間點，對照組IgM、IgA較電針組、TENS組降低(P<0.05)。T0時間點，與對照組比較，電針組、TENS組TNF-α水平上升(P<0.05)。謝怡琳等[6]將180例支氣管哮喘慢性持續(xù)期患者隨機分為2組。針刺組90例予針刺治療，穴取大椎、肺俞、膻中、定喘、間使、支溝、太溪、足三里；西藥組90例予沙美特羅替卡松粉吸入劑吸入治療。2組均20 d為1個療程，療程間休息2 d，4個療程后統(tǒng)計臨床療效。結(jié)果：治療后2組IgG、IgM、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均升高(P<0.05)，且針刺組高于西藥組(P<0.05)；治療后2組IgE、CD8+均降低(P<0.05)，且針刺組低于西藥組(P<0.05)。說明針刺和西藥治療支氣管哮喘慢性持續(xù)期均能較好地改善患者免疫功能，但針刺組的療效較西藥組明顯。李堅將等[7]將64例慢性蕁麻疹患者隨機分為2組。治療組32例予針刺背俞穴加刺絡(luò)拔罐治療；對照組32例予口服西替利嗪治療。2組均10 d為1個療程，療程間休息2～3 d，3個療程后統(tǒng)計臨床療效。結(jié)果：治療后2組干擾素γ(IFN-γ)水平均升高(P<0.05)，且治療組高于對照組(P<0.05)。治療后2組IL-4、IgE水平均降低(P<0.05)，且治療組低于對照組(P<0.05)。王艷萍等[8]將74例地方性氟、砷中毒患者隨機分為2組。對照組37例予碳酸鈣D3治療；觀察組37例予針刺腎俞、脾俞、太溪、足三里、手三里、氣海、關(guān)元穴治療。2組均治療2個月。結(jié)果：治療后2組IgG均升高(P<0.05)，且觀察組高于對照組(P<0.05)。唐英等[9]將230例腦癱患兒隨機分為2組。觀察組115例予關(guān)元、腎俞、足三里穴行溫和灸治療；對照組115例予匹多莫德口服液治療。2組均30 d為1個療程，3個療程后統(tǒng)計臨床療效。結(jié)果：治療30、60、90 d后2組IgG、IgA均較本組治療前升高(P<0.01)，治療90 d后觀察組高于對照組同期(P<0.05)。觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率低于對照組(P<0.05)。肖秋生等[10]將90例膿毒癥患者按照隨機數(shù)字表法分為3組。對照組30例按照拯救膿毒癥治療指南(SSC)的方案治療；胸腺肽α1組30例在對照組治療基礎(chǔ)上加用胸腺肽α1皮下注射治療；針刺治療組30例在對照組治療基礎(chǔ)上加用足三里、陽陵泉、內(nèi)關(guān)、關(guān)元針刺治療。3組均連續(xù)治療6 d。結(jié)果：治療后3組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM均升高(P<0.01)，且胸腺肽α1組及針刺治療組CD3+、CD4+、CD8+、IgG、IgA、IgM均高于對照組(P<0.01)。張紹華等[11]將60例持續(xù)性植物狀態(tài)患者隨機分為2組。對照組30例予持續(xù)性植物狀態(tài)內(nèi)科常規(guī)治療及護理；治療組30例在對照組治療基礎(chǔ)上艾灸中脘、下脘、氣海、關(guān)元穴治療。2組療程均為12周。結(jié)果：治療后治療組CD4+、CD4+/CD8+及IgG、IgA、IgM水平均升高(P<0.01)，且治療組均高于對照組(P<0.01)。趙翀翀等[12]采用糖皮質(zhì)激素(GC)輔以針灸(主穴為足三里、關(guān)元、氣海，根據(jù)臨床分型隨癥狀加減不同穴位)治療重癥肌無力(MG)34例，治療2個月。結(jié)果：治療后血清IgG1、IgG3均降低(P<0.05)。以上說明針灸對免疫球蛋白以及免疫細胞因子均有良性調(diào)節(jié)作用，其作用機制可能是針刺可通過調(diào)控免疫應(yīng)答過程中免疫球蛋白的含量來維持細胞免疫的主要效應(yīng)細胞間的平衡。

1.2 基礎(chǔ)研究 足三里穴是中醫(yī)學(xué)理論中的強壯穴，可調(diào)節(jié)多個臟腑系統(tǒng)的功能紊亂。薛小衛(wèi)等[13]將30只SD雄性大鼠隨機分為正?？瞻捉M(6只)、正常足三里組(6只)、模型空白組(7只)、模型足三里組(7只)，共4組(其中4只造模過程中死亡)。模型空白組、模型足三里組采用氯化鋰-匹羅卡品(Li Cl-PILO)造模(癲癇模型)。正常足三里組、模型足三里組針刺足三里穴，連續(xù)針刺10 d。運用Luminex液相芯片技術(shù)檢測各組免疫細胞因子的表達。結(jié)果：與模型空白組比較，模型足三里組海馬組織IgG1、IgG2a的含量在針刺干預(yù)后出現(xiàn)下降，但仍高于正常空白組(P<0.05)；正常足三里組與模型足三里組比較，IgG2a的表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Zhu MF等[14]采用電針足三里施以膿毒癥大鼠模型，結(jié)果表明，電針干預(yù)處理能明顯改善膿毒癥大鼠腸損傷和高通透性，降低大鼠死亡率。電針干預(yù)處理通過提高IgA濃度，CD3+、CD4+和CD4+/CD8+，對腸黏膜免疫屏障有保護作用。Liu M等[15]建立慢性心理壓力(CPS)大鼠模型，對CPS大鼠進行足三里穴電針治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，電針足三里可提高CPS大鼠攝食量、體質(zhì)量、內(nèi)臟超敏反應(yīng)和免疫功能，可提升血清IgG、IgM水平。嚴(yán)興科等[16]將48只雄性SD大鼠隨機分為空白組、模型組、藥物組、電針組，各12只。皮內(nèi)注射同種異體雄性SD大鼠前列腺蛋白提純液，輔以雙重免疫佐劑復(fù)制自身免疫性慢性非細菌性前列腺炎大鼠模型。造模后電針組、藥物組分別給予電針三陰穴、普適泰灌胃治療15 d。結(jié)果：電針組動物腺體濕質(zhì)量及系數(shù)均下降(P<0.05)，病理變化明顯減輕，局部前列腺組織IgG含量降低(P<0.05)。王蕓等[17]對盆腔炎后遺癥大鼠進行研究，正常組和模型組常規(guī)飼養(yǎng)；實驗組和對照組在大鼠關(guān)元穴、次髎穴處分別施太乙藥條溫和灸和普通溫和灸，每次每穴各施灸30 min，每日1次。結(jié)果：1個月后，實驗組大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，說明施以關(guān)元、次髎穴太乙藥條溫和灸可提高盆腔炎后遺癥大鼠陰道分泌物中IgA含量，提高盆腔局部免疫功能。《通玄指要賦》曰“足三里卻五勞之羸瘦”“冷痹腎敗，取足陽明之上”。刺激足三里穴能達到扶正培元、補虛通絡(luò)、升降氣機的作用，其作用機制可能是有助于降低局部細胞因子的表達，從而發(fā)揮治療作用。另外，三陰交是肝、脾、腎經(jīng)交會穴，多用于生殖系方面的疾病，電針三陰穴可能改善血管的通透功能，影響組織的滲出、增生、變質(zhì)過程，改善病變局部組織的病理變化。

2 針灸對細胞因子的影響

細胞因子(CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，參與免疫細胞間各種調(diào)節(jié)，是免疫細胞與其他類型細胞間聯(lián)絡(luò)的核心，可被分為白細胞介素(IL)、干擾素、TNF-α超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。

2.1 臨床研究 Brustin R等[18]對18例持續(xù)性疣患者隨機分為2組。治療組9例予針灸(取穴：三陰交、章門、孔最、手三里、足三里、腰陽關(guān)、中脘穴)治療；對照組9例予安慰劑治療。2組均治療3個月后統(tǒng)計臨床療效。結(jié)果：治療組臨床成功率36.6%，對照組臨床成功0。治療后治療組IL-10水平下降(P<0.05)。Karst M等[19]研究表明，針刺雙側(cè)曲池穴可提高呼吸爆發(fā)患者血漿TNF-α、IL-8水平。裴向東等[20]將50例全身麻醉腹腔鏡直腸癌根治術(shù)患者隨機分為2組。觀察組25例于麻醉前15 min電針足三里、三陰交穴干預(yù)至手術(shù)結(jié)束；對照組25例在足三里、三陰交穴行假針刺。結(jié)果：麻醉蘇醒后1 h時間點，觀察組IFN-γ/IL-4比值較對照組升高(P<0.05)，IL-4、IL-6水平降低(P<0.05)。表明電針刺激可以減輕腹腔鏡直腸癌根治術(shù)后患者免疫功能抑制，從而減輕炎性反應(yīng)的發(fā)生。以上研究從免疫學(xué)角度證實了腧穴與假腧穴、針刺與假針刺之間的差異，進一步確定了腧穴與得氣之間的交合作用。作用機制可解釋為刺激穴位可以通過局部感受器將其信息傳入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，激活下丘腦—垂體—腎上腺軸以及交感神經(jīng)系統(tǒng)活性，引起中樞遞質(zhì)釋放，調(diào)節(jié)機體免疫。劉義等[21]將90例抑郁障礙患者隨機分為2組。對照組45例隨機予鹽酸氟西汀分散片、鹽酸帕羅西汀片、氫溴酸西酞普蘭片、鹽酸舍曲林片、馬來酸氟伏沙明片治療；治療組45例在對照組治療基礎(chǔ)上加針刺(主穴百會、印堂、神庭、風(fēng)池、大椎、四神聰，結(jié)合隨癥加減配穴)治療。2組均治療4周。同時選擇健康體檢者45名為健康對照(健康組)。結(jié)果：與健康組比較，治療前治療組、對照組血清5-羥色胺(5-HT)、IL-4及IL-10水平降低(P<0.05)，IL-1β、IL-6水平升高(P<0.01)。與本組治療前比較，對照組治療2、4周末漢密爾頓抑郁量表(HAMD)評分降低(P<0.01)，治療組治療1～4周末HAMD評分降低(P<0.05)；治療后治療組、對照組5-HT、IL-4及IL-10水平升高(P<0.05)，IL-1β、IL-6水平降低(P<0.01)。證明針灸、西藥等聯(lián)合應(yīng)用更具優(yōu)勢。刺激足三里、三陰交等穴可調(diào)節(jié)免疫功能，減輕炎性反應(yīng)。說明針灸對失衡的神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫網(wǎng)絡(luò)發(fā)揮“多層次、多環(huán)節(jié)、多靶點”調(diào)整功能，恢復(fù)機體的自穩(wěn)態(tài)。

2.2 基礎(chǔ)研究 Liu M等[15]研究證實，針刺慢性心理應(yīng)激大鼠足三里，能明顯提高血清IL-2水平，降低血清IL-6水平。張瑋等[22]將32只雄性SD大鼠隨機分為正常組、模型組、血海組及足三里組，每組8只。其中模型組、血海組、足三里組進行為期13 d的遞增負(fù)荷游泳訓(xùn)練，血海組、足三里組每日訓(xùn)練結(jié)束20 min后進行20 min的穴位針刺干預(yù)。結(jié)果：與模型組比較，血海組、足三里組第1次力竭游泳時間延長(P<0.05)。與正常組比較，模型組脾臟指數(shù)及血清IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值均降低(P<0.05)；與模型組比較，血海組、足三里組血清IL-4含量降低(P<0.01)，足三里組IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.01)；足三里組血清IFN-γ含量高于血海組(P<0.05)。表明針刺足三里能夠糾正大強度運動等導(dǎo)致的免疫失衡，促進機體功能恢復(fù)。Chen L等[23]研究表明，電針足三里穴可顯著提高健康SD大鼠血清IFN-γ水平，以及血清和脾細胞提取物中IL-2、IL-17水平，提高脾細胞CD4的表達水平。彭艷等[24]將40只健康SD大鼠隨機分為4組，即空白組、模型組、艾灸穴位組(模型+艾灸穴位)、艾灸非穴組(模型+艾灸穴位對照點)，每組10只。艾灸穴位組和艾灸非穴組于造模前8 d即予艾灸干預(yù)，穴取足三里、中脘、關(guān)元、脾俞、胃俞穴或以上穴旁開對照點，模型組僅捆綁不治療，均每日1次，連續(xù)16 d。采用幽門螺桿菌(Hp)灌胃建立大鼠Hp胃炎模型。結(jié)果：與艾灸非穴組、模型組比較，艾灸穴位組胃組織TNF-α、IL-1β水平升高(P<0.05)。盧詠梅等[25]以8周大強度游泳訓(xùn)練建立運動性免疫抑制大鼠模型。將43只SD大鼠按照隨機數(shù)字表法分為3組，即對照組(A組)、大強度游泳訓(xùn)練組(B組)、大強度游泳訓(xùn)練加電針組(C組)。A組10只為空白對照，正常飼養(yǎng)，不加任何干預(yù)；B組17只對大鼠進行為期8周、每周6次、每次150 min的游泳訓(xùn)練；C組16只的訓(xùn)練方案同B組，但自第2周起每次訓(xùn)練后在百會、關(guān)元、足三里穴實施電針干預(yù)，每日1次，共持續(xù)治療7周。結(jié)果：與A、B組比較，C組血清IFN-γ、IL-2水平升高(P<0.05)。陳艷萍[26]將30只SD大鼠隨機分為模型組、隔藥灸組、電針組，每組10只，并另選10只正常大鼠作為對照組。采用免疫學(xué)方法加局部刺激建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎(UC)模型。隔藥灸組、電針組選取天樞、氣海分別進行隔藥灸、電針治療，連續(xù)治療14 d。結(jié)果：隔藥灸及電針均能顯著改善UC大鼠炎性反應(yīng)，其機制是通過下調(diào)結(jié)腸組織中INF-γ和IL-12水平，上調(diào)IL-4和IL-10水平，從而保持輔助性T細胞1(Th 1)/Th 2細胞間平衡，進而改善免疫功能。

3 對補體系統(tǒng)的影響

補體(C)是存在于人和脊椎動物血清、組織液和細胞膜表面的一組具有酶活性的蛋白質(zhì)，介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎性反應(yīng)。郁慧杰等[3]在危重癥患者的治療中，電針刺激雙側(cè)足三里、上巨虛、合谷、曲池穴，發(fā)現(xiàn)電針組外周血C3濃度較單純針刺、常規(guī)治療明顯升高。孫興亮等[27]研究表明，針灸可升高補體免疫性不孕癥患者C3濃度。陳勁峰等[28]分析高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療83例免疫無應(yīng)答艾滋病患者的中醫(yī)體質(zhì)類型，發(fā)現(xiàn)氣虛質(zhì)患者免疫重建成功率是非氣虛質(zhì)患者的2.77倍，痰濕質(zhì)患者免疫重建成功率僅為非痰濕質(zhì)患者的0.26倍。體質(zhì)可著重從祛濕化痰、健脾益氣等方面切入進行調(diào)養(yǎng)，提高免疫調(diào)節(jié)作用。督脈為諸陽之會，劉驍?shù)萚29]將50例體質(zhì)辨識為陽虛質(zhì)的受試者隨機分為督灸組、藥物組。督灸組25例采用督灸法進行干預(yù),每10 d干預(yù)1次，3次1個療程，共治療2個療程。藥物組25例口服金匱腎氣丸(水蜜丸)，1次4～5 g(20～25粒)，日3次，共服用6周。結(jié)果：督灸組顯著提升人體血清C3、C4水平，明顯提升IgA水平，分析C3、C4、IgA可能是督灸調(diào)節(jié)人體免疫水平的靶點。在本次檢索的文獻中，未發(fā)現(xiàn)針灸調(diào)節(jié)補體系統(tǒng)相關(guān)的動物實驗研究，相關(guān)作用機制需要更多的實驗去驗證。上述提示，糾正體質(zhì)偏頗，提高機體免疫力，防治相關(guān)疾病發(fā)生，是中醫(yī)理論“治未病”之精髓。以針灸作為切入點對偏頗體質(zhì)受試者進行體質(zhì)干預(yù)，可通過調(diào)節(jié)人體血清C3、C4水平實現(xiàn)對人體非特異性免疫系統(tǒng)的激活。

4 結(jié) 語

《免疫類方》中說“免除疫癘”，這是“免疫”一詞的正式提出。中醫(yī)學(xué)很早就認(rèn)識到針灸與免疫密切相關(guān)。隨著針灸治療在世界范圍內(nèi)逐漸被接受，針灸調(diào)節(jié)免疫功能的國內(nèi)外研究已取得較大進展。但對針灸影響免疫效應(yīng)的具體細胞分子機制尚缺乏了解。目前，大部分針灸調(diào)控免疫反應(yīng)的研究主要是對治療效應(yīng)、細胞功能狀態(tài)的觀察。針灸也通過神經(jīng)—內(nèi)分泌—免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)控免疫功能，該系統(tǒng)中的下丘腦—垂體—腎上腺軸是針灸作用的重要靶點，發(fā)揮針灸對機體的特異和非特異性免疫功能的調(diào)節(jié)作用，而且是以整體性、雙向性為其規(guī)律和特點。