李永翰
(河南省動物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南 鄭州450008)
畜產(chǎn)品是人民群眾日常生活中的重要食物,畜產(chǎn)品安全關(guān)系人民群眾的身體健康,隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,獸藥的使用越來越廣泛,獸藥殘留問題成為人們關(guān)注的焦點?;诖?,筆者簡述了畜產(chǎn)品中獸藥殘留的危害以及當前畜產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測方法。
獸藥可用于畜禽疾病預(yù)防及治療,是養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展不可缺少的物質(zhì)基礎(chǔ)。獸藥在畜禽體內(nèi)經(jīng)新陳代謝后,藥物原型或代謝產(chǎn)物會在動物體內(nèi)儲存、蓄積,并最終出現(xiàn)在動物產(chǎn)品中。根據(jù)常用獸藥分類,獸藥殘留主要包括抗生素類藥物殘留、抗寄生蟲類藥物殘留和促生長類獸藥殘留等。獸藥殘留不僅會影響人民群眾身體健康,還直接影響我國畜產(chǎn)品貿(mào)易出口。近年來,研究者投入大量精力開發(fā)畜產(chǎn)品中獸藥殘留檢測的新技術(shù)和新設(shè)備,畜產(chǎn)品中獸藥殘留檢測方法的發(fā)展為畜產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了有力保證。
1.1.1 誘導(dǎo)耐藥菌株
隨著獸用抗菌藥物種類越來越多及其應(yīng)用范圍日益擴大,細菌耐藥性的產(chǎn)生已經(jīng)呈現(xiàn)加速趨勢。為預(yù)防動物疾病,長期低劑量使用抗生素藥物,一方面在動物體內(nèi)容易誘導(dǎo)出現(xiàn)耐藥菌株,而后通過食物鏈向人傳播;另一方面人長期食用抗菌藥物殘留超標的畜產(chǎn)品后,會對此抗生素產(chǎn)生耐藥性,進而導(dǎo)致患病后藥物治療效果不良。因此,耐藥性的產(chǎn)生已經(jīng)對獸醫(yī)和醫(yī)學(xué)臨床帶來嚴峻的挑戰(zhàn)。
1.1.2 毒性反應(yīng)
急性毒性:某些獸藥經(jīng)動物吸收后,能在動物體內(nèi)某些特定部位形成高殘留,而動物對這些藥物具有較高的耐受性,因此,動物體內(nèi)蓄積這些藥物后,動物并不表現(xiàn)異常情況,但一但被人誤食,將導(dǎo)致人中毒。如克倫特羅(在組織中>100 ng/g)易引起急性中毒反應(yīng)。
慢性毒性:動物組織中獸藥殘留水平通常很低,造成急性中毒的可能性較小,但若長期食用會導(dǎo)致慢性中毒。如大環(huán)內(nèi)酯類藥物紅霉素、泰樂菌素等在體內(nèi)發(fā)生蓄積,易引起慢性中毒,出現(xiàn)肝損害和聽覺障礙。
特殊毒性:畜產(chǎn)品中的激素類藥物殘留會干擾人體正常的激素平衡,進而產(chǎn)生特殊毒性作用。如長期攝入雄激素會使男性出現(xiàn)睪丸萎縮、胸部擴大、早禿或肝腫瘤,女性出現(xiàn)雄性化、月經(jīng)失調(diào)、肌肉增生、毛發(fā)增多等。
三致效應(yīng):某些獸藥殘留甚至可能會破壞細胞遺傳物質(zhì),使動物細胞發(fā)生基因突變,進而出現(xiàn)致癌、致畸、致突變效應(yīng),長期食用此類獸藥殘留超標的畜產(chǎn)品有致畸、致癌的風(fēng)險。如喹乙醇、硝基呋喃等藥物在動物試驗中顯示三致效應(yīng)。
1.1.3 變態(tài)反應(yīng)
某些獸藥進入人體會刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng),一些過敏體質(zhì)的人在食用含有此類獸藥殘留的畜產(chǎn)品后,會出現(xiàn)更加嚴重的過敏反應(yīng),如青霉素或者四環(huán)素類的藥物,極有可能導(dǎo)致人體出現(xiàn)過敏反應(yīng),嚴重者發(fā)生休克,甚至導(dǎo)致死亡。
1.1.4 腸道菌群失調(diào)
人體腸道內(nèi)有豐富并且穩(wěn)定的菌群,在正常條件下,人體腸道內(nèi)的菌群與人體能相互適應(yīng),如某些菌群能抑制其他菌群的過度繁殖,某些菌群能合成B 族維生素和VK以供人體使用。食物中的抗生素類藥物殘留會干擾原本平衡、穩(wěn)定的菌群環(huán)境,一方面造成一些非致病菌死亡,使菌群的平衡失調(diào),從而導(dǎo)致長期腹瀉或引起維生素缺乏等反應(yīng);另一方面還可能滋生大量耐藥菌和致病菌群,從而引發(fā)人體疾病。
研究表明,大多數(shù)獸藥不能被動物完全吸收利用,其原型或代謝物隨動物糞、尿等排泄物排出,殘留于污水或者土壤中。現(xiàn)有的污水處理技術(shù)對污水中含有的大部分抗生素類藥物沒有明顯的去除效果,導(dǎo)致水環(huán)境中獸藥殘留量超標。隨動物排泄物排出的獸藥還會對土壤環(huán)境造成影響,研究顯示,在用動物排泄物施肥的土壤表層檢測到了土霉素和金霉素的殘留。
隨著人們對食品安全的重視,養(yǎng)殖過程中用藥不規(guī)范,甚至使用違禁藥物,都對我國畜產(chǎn)品安全造成潛在危害,獸藥殘留超標已經(jīng)成為制約我國畜產(chǎn)品出口的重要因素之一。
2.1.1 氣相色譜法(GC)
氣相色譜法原理是將樣品氣化后送入色譜系統(tǒng),樣品中混合物的各組分在流動相(載氣)的帶動下,利用各組分在流動相中具有不同的吸附能力,獲得分離,通過非電量轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)變成與其濃度成正比的電信號,根據(jù)電信號的不同來分析樣品成分。GC 優(yōu)點在于有許多高靈敏、通用性或?qū)R恍詮姷臋z測器可以選用。缺點是大多數(shù)獸藥極性或沸點偏高,限制了GC在獸藥殘留檢測中的應(yīng)用。
2.1.2 高效液相色譜法(HPLC)
20 世紀80 年代后高效液相色譜法(HPLC)的發(fā)展速度超過了GC,相當數(shù)量的獸藥采用或改用HPLC 進行分析。如:氯霉素、磺胺類等藥物。高效液相色譜法的分離原理是溶于流動相中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。幾乎所有的高沸點、熱穩(wěn)定差、強極性、大分子化合物均可用HPLC進行測定。HPLC的分離機制與常規(guī)柱色譜相同,但填料更加精細(5~10 μm),可重復(fù)進樣,分析速度快。
2.1.3 聯(lián)用技術(shù)
獸藥殘留分析中較常用的色譜技術(shù)如GC、HPLC等進行定量分析,但是卻不能提供待測物殘留組分的結(jié)構(gòu)信息或?qū)ξ粗幕衔镞M行結(jié)構(gòu)鑒定,但是質(zhì)譜卻能彌補其不足,兩者有機結(jié)合是生物樣品分析的最有效手段之一。常用的聯(lián)用方法有氣譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、氣譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS/MS)、液譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)、液譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)等。
2.2.1 酶聯(lián)免疫吸附劑測定法
酶聯(lián)免疫吸附劑測定法,簡稱酶聯(lián)免疫法,或者ELISA 法,基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體表面,加入酶標抗體和抗原,使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進行,形成酶標記的免疫復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后,游離的酶標抗體或抗原被沖掉,而形成的酶標記免疫復(fù)合物不能被洗掉,加入底物顯色,顏色的深淺與待測抗原或抗體的量相關(guān),借助酶標測定儀做分析,敏感度可達納克水平。ELISA 法是目前獸藥殘留最常用的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)檢測技術(shù)在使用時較為簡單且制造成本低,目前市場上有很多ELISA試劑盒,該方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于畜產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測,但也有假陽性高、不能定性的缺點,需要配合色譜或色譜-質(zhì)譜聯(lián)用確證。
2.2.2 放射免疫法
放射免疫法是應(yīng)用放射性物質(zhì)作為示蹤物的一種免疫標記技術(shù),是利用一系列用放射性元素標記的抗生素與樣品中的抗生素競爭性結(jié)合有特殊位點的受體,利用液體閃爍儀計數(shù),通過檢測放射性元素標記的抗生素的量,推算出樣品中獸藥殘留量。但放射免疫分析法所用的放射性物質(zhì)量較大,每一批試劑盒藥片都要測量控制點,降低了該方法的準確度。放射免疫法也存在同位素半衰期短、放射性物質(zhì)量較大、耗材昂貴等不足。
2.2.3 試紙條
試紙條的主流為膠體金試紙條,具有快速、高效、簡單等優(yōu)點,5~10 min可獲得結(jié)果,適用于現(xiàn)場檢測。目前,市場上試紙條種類較多,如氯霉素快速檢測試紙、克倫特羅快速檢測試紙、黃曲霉毒紊陜速檢測試紙、青霉素快速檢測試紙、磺胺二甲嘧啶及磺胺二甲氧嘧啶快速檢測試紙等。
獸藥殘留檢測方法各有各的特點,定量確證技術(shù)一般都能得到比較準確的結(jié)果,但是存在分析設(shè)備昂貴,分析時間長,必須在實驗室進行操作,無法實現(xiàn)現(xiàn)場檢測;快速檢測法雖然能實現(xiàn)快速現(xiàn)場檢測的目的,但是方法的可靠性低,只適合初篩。目前,隨著各種技術(shù)的不斷完善和應(yīng)用,以及各種新技術(shù)的應(yīng)運而生,獸藥殘留分析技術(shù)將向高自動化、高靈敏度等方向發(fā)展,并能同時檢測不同種類的多種獸藥,將初篩和確證一次完成。