2016-2019年攀枝花市高致病性H5亞型禽流感免疫抗體檢測(cè)與分析

張昕彤，熊 杰，蒲楊柳，蔣成偉，陳富忠，胡生富

（攀枝花市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 攀枝花617000）

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒屬的A 型流感病毒（AIV）所引起的一種禽類烈性傳染病。在AIV 不同的亞型中，只有部分H5 和H7 亞型毒株可引起高致病性禽流感（HPAI），該病會(huì)給家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，并對(duì)公共健康造成持續(xù)性威脅，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織規(guī)定為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。高致病性禽流感是我國(guó)強(qiáng)制免疫的主要病種之一，免疫接種是目前預(yù)防和控制的重要手段。為掌握攀枝花市H5 亞型禽流感免疫效果情況，在2016-2019 年春秋兩季集中免疫結(jié)束后，對(duì)各縣（區(qū)）養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶禽類進(jìn)行隨機(jī)抽樣，共采集血清樣品2 057 份，用血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 血清樣品及來源（見表1）

表1 血清樣品來源

2016-2019 年春秋兩季集中免疫結(jié)束后，隨機(jī)抽取全市各縣（區(qū)）內(nèi)規(guī)模場(chǎng)和散養(yǎng)戶禽類血清樣品共2 057份，其中散養(yǎng)戶1 770 份，規(guī)模場(chǎng)287 份，雞血清1 719 份，水禽血清338 份。采集的血液樣品待血清析出后進(jìn)行離心，取上層血清倒入干凈的離心管中，置于-20℃冰箱中保存?zhèn)錂z。

1.2 試劑

禽流感病毒H5 亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原、禽流感病毒H5亞型陽(yáng)性血清，均購(gòu)自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.3 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

根據(jù)GB/T 18936－2003《高致病性禽流感診斷技術(shù)》的規(guī)定，采用血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)。

結(jié)果判定：HI 效價(jià)≥4log2 為陽(yáng)性，判定為免疫合格；HI效價(jià)＜4log2為陰性，判定為免疫不合格。判定標(biāo)準(zhǔn)：免疫抗體合格數(shù)占抽檢總數(shù)的70%以上為免疫合格。

2 檢測(cè)結(jié)果與分析

2.1 2016-2019年全市H5亞型禽流感免疫抗體總體情況

2016-2019 年全市共檢測(cè)2 057 份樣品，合格1 957份，合格率95.14%，其中2016 年-2019 年H5 亞型禽流感免疫抗體合格率分別為95.79%、96.92%、98.14%、89.44%，均達(dá)到國(guó)家規(guī)定要求，說明強(qiáng)制免疫工作較理想，能夠?qū)仪萜鸬揭欢ǖ谋Ｗo(hù)作用。其中免疫抗體水平在2016-2018年呈上升趨勢(shì)且合格率都在95%以上，但2019年下降到90%以下，下降原因主要是2019 年春秋防鹽邊縣免疫抗體只有70%左右，進(jìn)而拉低了總體合格率?？赡芘c以下因素有關(guān)：一是村級(jí)防疫員操作不熟練、技術(shù)不規(guī)范導(dǎo)致免疫效果不佳；二是鹽邊縣地域較廣，散養(yǎng)戶居住分散，“跑山雞”比例較大，白天散養(yǎng)在山林，村級(jí)防疫員只能晚上上門免疫，個(gè)別農(nóng)戶受風(fēng)俗習(xí)慣影響，不愿意或不配合免疫，造成免疫難度加大，存在漏免的情況；三是個(gè)別村級(jí)防疫員隨身攜帶的疫苗冷藏箱由于保溫效果不良導(dǎo)致疫苗失效。

2.2 2016-2019年全市散養(yǎng)戶和養(yǎng)殖場(chǎng)H5亞型禽流感免疫抗體情況（詳見表2）

2016-2019 年全市共檢測(cè)散養(yǎng)戶1 770 份，合格1 679份，合格率94.86%，檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)287 份，合格278 份，合格率96.86%，其中養(yǎng)殖場(chǎng)抗體合格率略高于散養(yǎng)戶，其原因可能是因?yàn)轲B(yǎng)殖場(chǎng)的管理技術(shù)、生物安全水平和防疫水平均高于散養(yǎng)戶。散養(yǎng)戶2016-2018 年合格率逐年上升，可能與攀枝花市開展培訓(xùn)宣傳及農(nóng)戶防控意識(shí)提高有關(guān)。養(yǎng)殖場(chǎng)2019 年合格率有所下降，主要因?yàn)閭€(gè)別養(yǎng)殖場(chǎng)管理人員思想松懈、更換疫苗和調(diào)整免疫程序等因素有關(guān)。

表2 2016-2019年全市H5亞型禽流感免疫抗體結(jié)果

2.3 2016-2019年全市雞和水禽H5亞型禽流感免疫抗體情況（詳見表3）

表3 2016-2019年全市雞和水禽H5亞型禽流感免疫抗體情況

2016-2019 年全市共檢測(cè)雞血清1 719 份，合格1 643份，合格率95.58%，檢測(cè)水禽血清338 份，合格319 份，合格率94.38%，可以看出，雞的總體抗體水平略高于水禽。其中2016、2017 年雞的免疫抗體合格率均高于水禽，而2018、2019 年水禽的免疫抗體合格率則高于雞并達(dá)到100%，且水禽的抗體水平呈逐步上升趨勢(shì)，說明近兩年來水禽的免疫抗體水平有較大提高，起到了較好的保護(hù)作用，雞的抗體合格率除2019年外，總體較平穩(wěn)且抗體水平較高。

3 討論與小結(jié)

一直以來，國(guó)內(nèi)外對(duì)禽流感的防控均高度重視，2004 年1 月23 日，我國(guó)發(fā)生第一起高致病性禽流感（H5N1），從2004 年起，全國(guó)開始實(shí)施強(qiáng)制免疫政策。隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，病毒也在不斷發(fā)生變異，其中使用疫苗免疫方法防止禽流感的暴發(fā)是現(xiàn)目前最有效的防控手段，我國(guó)對(duì)禽流感的免疫要求是高致病性禽流感群體免疫密度應(yīng)常年保持在90%以上，其中應(yīng)免畜禽免疫密度應(yīng)達(dá)到100%，免疫抗體合格率應(yīng)常年保持在70%以上，采取春秋兩季集中免疫與定期補(bǔ)免相結(jié)合的方式進(jìn)行。

從檢測(cè)結(jié)果看，2016-2019 年這4 年間，H5 亞型禽流感免疫抗體均達(dá)標(biāo)準(zhǔn)，說明我市高致病性H5亞型禽流感的免疫情況總體上較好。由于H5 亞型禽流感病毒目前仍是威脅我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)的重要亞型，所以養(yǎng)殖者對(duì)其重視程度較高，但仍有個(gè)別縣（區(qū)）散養(yǎng)戶和養(yǎng)殖場(chǎng)血清樣品的抗體水平有高有低，這可能與免疫過程中操作不規(guī)范有關(guān)，存在漏免或注射疫苗時(shí)漏到體外，導(dǎo)致免疫失敗，使群體免疫密度降低和免疫抗體不均衡。因此，要加強(qiáng)對(duì)防疫人員免疫技術(shù)和免疫操作技能培訓(xùn)，提高免疫質(zhì)量。

綜合看來，攀枝花市免疫效果較好，對(duì)預(yù)防高致病性禽流感能夠起到一定的抗體保護(hù)作用，但免疫效果的持續(xù)監(jiān)測(cè)仍是當(dāng)前高致病性禽流感免疫防控工作中的重點(diǎn)，所以在家禽養(yǎng)殖中長(zhǎng)期對(duì)禽流感進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)是十分必要的，這對(duì)疫苗的選擇、免疫效果的考察、免疫計(jì)劃的執(zhí)行是十分有用的。禽流感防控是一項(xiàng)長(zhǎng)期持久的工作，要加強(qiáng)強(qiáng)制免疫，認(rèn)真做好免疫抗體的監(jiān)測(cè)，通過培訓(xùn)宣傳，提高防控意識(shí)，做到防患于未然，保證養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展。