血小板假性減低的原因及其校正分析

孫悅

血小板的生成是產(chǎn)生于骨髓中成熟的巨核細胞，由胞質脫落而來，壽命一般為7～14 d(半壽期約3 d)，受血小板生成素的調控。全身大概有1/3的血小板滯留于脾竇以及脾髓細胞間，該聚集被稱為“脾池化”現(xiàn)象，脾池中的血小板與循環(huán)池中的血小板之間能夠自由交換，具有止血以及凝血的功能。血細胞分析中的一個重要指標也是血小板活化的一個重要指標，血小板平均體積升高，血小板的體積增大、活性增強。有研究發(fā)現(xiàn)［1］，血小板平均體積增大與急性冠狀動脈、腦梗的發(fā)生、發(fā)展以及預后情況有著密切的聯(lián)系。當前檢驗血小板技術的金標準需要進行手工計數(shù)，分類也要在鏡下進行，雖然耗費人力但是經(jīng)過許多年的驗證可知準確度毋庸置疑，不管目前檢驗技術如何變化，手工檢驗依然最為準確。隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展，檢測儀器的不斷更新?lián)Q代，該檢測的方法具有自動化程序高、檢測設備的參數(shù)多樣化、檢測速度快以及環(huán)保性高的優(yōu)點受到歡迎［2］。但是在檢測的過程中總會不可避免的發(fā)生血小板假性減低的現(xiàn)象，本文就血小板假性減低的原因及其校正進行分析報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2016年8月～2017年9月收治的68例血小板假性減低患者，其中男34例，女34例；年齡21～68歲，平均年齡(42.2±1.6)歲。根據(jù)血小板對不同檢測發(fā)生的聚集情況分為多種聚集組(8例)和單一聚集組(60例)。對其進行重新抽血檢測血小板，用不同的抗凝劑同時進行檢測，再采集末梢新鮮血液進行涂片鏡檢。

1.2 方法 根據(jù)全國血液學的復檢規(guī)則將血小板假性減低患者的標本對其形態(tài)、分布情況、數(shù)量等進行檢查，并且使用手工顯微鏡計數(shù)的方式統(tǒng)計監(jiān)測值。儀器分析法：采用BC-6800型全自動血液細胞分析儀進行檢測，試劑采用含有枸櫞酸鈉抗凝劑的真空管以及含有EDTA-K2抗凝劑的真空管采集血標本。

具體的方法：告知所有患者采血的注意事項，次日采集每例患者新鮮末梢血液，根據(jù)規(guī)定的時間稍作停留之后立即對其進行檢測；而裝入枸櫞酸鈉抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管內的靜脈血使用及其進行檢測(放置15 min后進行檢測)。

再使用枸櫞酸鈉抗凝真空管以及EDTA-K2抗凝管內的標本制作成血涂片，通過鏡檢的方法觀察血小板的分布以及形態(tài)情況，操作規(guī)程按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。

1.3 觀察指標 分析比較EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測的血小板計數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差()表示，采用t檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

在EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測中，多種聚集組血小板計數(shù)水平分別為(65.02±1.58)×109/L、(63.25±2.64)×109/L、(155.36±4.89)×109/L、(161.36±6.15)×109/L，單一聚集組血小板計數(shù)水平分別為(63.21±1.05)×109/L、(162.15±10.35)×109/L、(161.22±8.22)×109/L、(163.25±7.69)×109/L。

單一聚集組中血小板與EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，且EDTA-K2抗凝劑檢驗血小板計數(shù)均小于枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血以及手工鏡檢檢測，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；枸櫞酸鈉抗凝劑、新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測的血小板計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

多種聚集組中血小板與枸櫞酸鈉以及EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板計數(shù)水平均小于新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；新鮮的末梢血與手工鏡檢檢測血小板計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學意義有(P＞0.05)。

3 討論

血小板能夠參與初期的凝血過程，可以起到凝血以及促進止血的功能，在傷口愈合、止血、血栓形成、炎癥反應以及術中出血等過程中均有著重要的臨床指導意義，而且血小板計數(shù)與許多血液病患者的病情有著密不可分的關系，對于血液病患者而言血小板計數(shù)減少需要輸入血小板進行治療，輸入血小板也會給患者帶來了一定的經(jīng)濟負擔，而且輸入的過程中會誘發(fā)免疫反應以及感染的發(fā)生，因此正確的檢測結果有著至關重要的作用。在本研究中使用全自動功能細胞分析儀器(BC-6800型號)對血小板的計數(shù)以及形態(tài)、分布等進行分析、統(tǒng)計，并且根據(jù)不同的信號將血小板的體積分布繪制出來，使用該儀器檢測的過程中由于血小板與紅細胞計數(shù)的檢測是在同一個通道中進行檢測，故而僅能通過體積的大小進行區(qū)別，血小板的計數(shù)容易受到紅細胞的碎片以及小紅細胞的影響，不僅如此，還有多種因素能夠引起血小板計數(shù)的減低［3］。

影響結果的因素：①采血因素：采集末梢血穿刺的部位皮膚過于冷、入針過淺、或者用力擠壓均會促使組織凝血因子混入血液標本中，從而產(chǎn)生肉眼看不見的小凝血塊，血液在毛細血管中反復積壓的時間過長，便會引起形態(tài)等的改變；②吸收的標本量不足也是導致血小板計數(shù)減少的原因，同時也會引起白細胞以及紅細胞的計數(shù)減少；③標本未經(jīng)混勻便進行檢測，會造成檢測結果的偏差出現(xiàn)血小板計數(shù)減低的現(xiàn)象，采集的標本在凝血試管中放置的時間過短，采集末梢血做血細胞分析時如果馬上進行細胞計數(shù)檢測，則會發(fā)生血小板計數(shù)偏低的現(xiàn)象，原因是與EDTA抗凝劑混合使得血小板的形態(tài)發(fā)生變化，其外膜形成的微小管游離端向外側伸展，從而在血小板周圍形成了血小板偽足，會出現(xiàn)其相互纏繞的情況，最后形成血小板可逆聚集體，引起計數(shù)結果的降低；④大血小板影響，血細胞分析儀計數(shù)血小板原理設計計數(shù)閾值時，當血小板＞30 fl，血小板會被誤認為小紅細胞從而不進行計數(shù)，當血小板＜2 fl，儀器會將其作為干擾不進行計數(shù)，也會造成檢驗的偏差；⑤患者長期使用青素、地高辛、硫酸鎂等藥物時也會引起血小板的減少，原因為藥物與血漿蛋白結合形成抗原、刺激機體產(chǎn)生血小板抗體有關，這種現(xiàn)象引起的血小板減少被稱為藥源性血小板減少，通常在停藥之后的15～20 d恢復正常；⑥大量輸入血液也會造成血小板計數(shù)的減少，一般停止輸血后的4～6 d即可恢復正常；⑦抗凝劑的影響，如果要獲得可靠的檢測數(shù)值，抗凝劑是很重要的影響因素之一，抗凝劑過期或者抗凝劑的劑量不足均會引起抗凝效果的不同，從而能夠產(chǎn)生血小板的聚集，引發(fā)血小板計數(shù)的減少，該原因形成的血小板假性較少，通常沒有科室的特異性，一般與器材的購置不合理有關，而且血標本在試管中放置的時間過長也會引起血小板的減少［4］。

經(jīng)檢驗，多種聚集組中血小板與枸櫞酸鈉以及EDTA-K2抗凝劑均發(fā)生聚集現(xiàn)象，EDTA-K2抗凝劑、枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板計數(shù)水平均小于新鮮的末梢血、手工鏡檢檢測，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝劑與枸櫞酸鈉抗凝劑檢測血小板計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；新鮮的末梢血與手工鏡檢檢測血小板計數(shù)水平比較，差異無統(tǒng)計學意義有(P＞0.05)。針對應用抗凝劑發(fā)生聚集現(xiàn)象導致的血小板計數(shù)減低的現(xiàn)象總結、分析其發(fā)生的原因，再根據(jù)具體的情況重新檢測，找出問題的所在進一步進行研究。

針對假性血小板減低的情況進行了如下的糾正措施：在采血的過程中先檢測抗凝試管的合格情況，機器檢測血小板計數(shù)減低時應該慎重對待，需要采集患者新鮮的末梢血再次進行計數(shù)復檢，只有當機器的檢測結果與手工檢測的結果相接近才能給出試驗結果報告，否則會引起醫(yī)生的誤診，加重患者的負擔［5］。

綜上所述，抽血不當或者凝血劑不合格均會造成假性血小板的發(fā)生，應該在采血后充分混勻血標本，按照規(guī)定靜止相應的時間再次混勻之后上機檢驗，如果發(fā)現(xiàn)血小板降低的情況應該慎重對待，在手工鏡檢檢測復測之后給予定論，以提高檢測的準確率，為臨床治療提供可靠的依據(jù)。