淺談蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理方法原理

姚 勇

（湖北省植物保護(hù)總站 湖北武漢 430070）

農(nóng)藥在現(xiàn)階段依然是防治病蟲(chóng)草鼠害發(fā)生的重要手段，據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018年我國(guó)種植業(yè)農(nóng)藥使用量商品量達(dá)83.19萬(wàn)t，2019年預(yù)計(jì)商品量84.46萬(wàn)t[1]。近些年，食品安全與農(nóng)藥殘留逐漸成為人們?nèi)找骊P(guān)注的對(duì)象，蔬菜是人們最基本的生活消費(fèi)品之一，其質(zhì)量安全關(guān)系公眾的身體健康和生命安全。對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留“零容忍”態(tài)度，也是促使農(nóng)藥分析技術(shù)不斷革新的壓力與動(dòng)力。作者多年從事蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)，本文詳細(xì)講述目前農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用標(biāo)準(zhǔn)中前處理方法原理，以供大家參考。

1 現(xiàn)行有效的蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留分析標(biāo)準(zhǔn)

目前農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)測(cè)定蔬菜樣品中的農(nóng)藥殘留一般采用的標(biāo)準(zhǔn)有《NY/T 761-2008蔬菜中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》、《GB/T 20769-2008水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》以及《GB 23200.8-2016水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法》（以下分別簡(jiǎn)稱761標(biāo)準(zhǔn)、20769標(biāo)準(zhǔn)和23200.8標(biāo)準(zhǔn)）[2-4]。761標(biāo)準(zhǔn)是檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)最常用的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，而且在一般的蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)檢測(cè)能力驗(yàn)證和大比武中，給予的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)一般參考761標(biāo)準(zhǔn)中的分析前處理方法。隨著檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)儀器設(shè)備的改進(jìn)，越來(lái)越多的檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)采用20769標(biāo)準(zhǔn)和23200.8標(biāo)準(zhǔn)兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)相結(jié)合，利用液相色譜-質(zhì)譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法，對(duì)蔬菜樣品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，極大地提高了工作效率和檢測(cè)水平，保障檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。

2 761標(biāo)準(zhǔn)、20769標(biāo)準(zhǔn)和23200.8標(biāo)準(zhǔn)三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)中的前處理方法

2.1 樣品提取

三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的提取方法大致相同，都是加入乙腈溶劑進(jìn)行勻漿提取目標(biāo)待測(cè)物，而后加入氯化鈉來(lái)進(jìn)行除水，氯化鈉溶于水形成鹽溶液與有機(jī)相分離，靜置或離心，取上清液分析用。

2.2 樣品凈化

761標(biāo)準(zhǔn)中三大類農(nóng)藥殘留的凈化方法不同，有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留是直接將提取溶液進(jìn)行濃縮，轉(zhuǎn)換溶劑，定容測(cè)定；有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)酯類農(nóng)藥殘留是利用弗羅里矽柱（Florisil）進(jìn)行固相萃取而凈化，弗羅里矽柱填料是硅酸鎂（MgO·SiO2），與樣品中極性化合物有較強(qiáng)的作用力，溶液中有相對(duì)極性的待測(cè)組分被保留，經(jīng)適當(dāng)極性溶劑淋洗下來(lái)，而色素等極性較強(qiáng)化合物在萃取小柱上被保留，從而達(dá)到凈化作用；氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留是經(jīng)過(guò)氨基柱進(jìn)行固相萃取而凈化，氨基柱的填料是硅膠基質(zhì)的極性鍵合相，具有堿性特點(diǎn)，對(duì)酸性或堿性分析物具有選擇性，氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留具有弱酸性，可通過(guò)Lewis酸堿等作用被保留在小柱上，經(jīng)過(guò)適當(dāng)溶劑淋洗下來(lái)，從而達(dá)到凈化作用。

20769標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量，將450種分為7組，均是經(jīng)Sep-Pak Vac氨基柱固相萃取凈化，氨基柱的作用原理已在上段中描述。

23200.8 標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量，將500種分為5組，均是先經(jīng)過(guò)Envi-18柱，再經(jīng)過(guò)串聯(lián)的Envi-Carb和Sep-Pak氨丙基柱進(jìn)行固相萃取凈化。Envi-18柱的填料是C18，是十八烷基封尾，具有疏水性，能較好地保留基質(zhì)溶液中烴類等雜質(zhì)，Envi-Carb柱的填料是活性炭，主要用于去除基質(zhì)溶液中的色素等雜質(zhì)，Sep-Pak氨丙基柱的填料是硅膠基質(zhì)鍵合氨丙基，具有堿性特點(diǎn)，可以通過(guò)極性作用、Lewis酸堿作用等有效保留脂肪酸、酚類等雜質(zhì)，通過(guò)這三重凈化得到淋洗液，進(jìn)而濃縮上樣。

值得注意的是，在761標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定有機(jī)磷類和有機(jī)氯類及擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥殘留，在濃縮步驟將乙腈溶劑分別轉(zhuǎn)換為丙酮和正己烷，用氣相色譜儀測(cè)定；在23200.8標(biāo)準(zhǔn)中測(cè)定500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量，在濃縮步驟中將淋洗液轉(zhuǎn)換為正己烷溶劑，用氣相色譜-質(zhì)譜儀測(cè)定農(nóng)藥殘留。進(jìn)樣溶劑的選擇固然與儀器檢測(cè)器類型有關(guān)系，與色譜柱使用要求也有很大的關(guān)系。在這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)中，氣相色譜儀或者氣相色譜-質(zhì)譜儀所用的色譜柱是DB-1701石英毛細(xì)管柱（或相當(dāng)者），該色譜柱的固定液是（14%-氰丙基-苯基）-甲基聚硅氧烷，中等極性，乙腈是極性溶劑，一旦進(jìn)入色譜柱，會(huì)造成固定液流失嚴(yán)重，減少色譜柱使用壽命。而且一些極性較強(qiáng)的目標(biāo)物，乙腈作為溶劑則可能會(huì)造成峰形拖尾嚴(yán)重。

3 新興的農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留分析前處理方法—QuEchERS法

QuEChERS 法（Quick、Easy、Cheap、Rugged、Safe），是近年來(lái)國(guó)際上最新發(fā)展起來(lái)的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)的快速樣品前處理方法，由美國(guó)農(nóng)業(yè)部Anastassiades教授等于2003年開(kāi)發(fā)。該方法的主要步驟是用含1%醋酸的乙腈對(duì)樣品進(jìn)行浸提，再加入無(wú)水硫酸鎂與醋酸鈉振蕩促使其分層，隨后將浸提液轉(zhuǎn)移至含有PSA吸附劑、硫酸鎂的離心管中進(jìn)行分散固相萃取，PS A（N-丙基乙二胺）有兩個(gè)氨基，有比氨基柱更強(qiáng)的作用，是農(nóng)藥殘留分析前處理中分散固相萃取的常用凈化劑，能夠有效去除樣品基質(zhì)中的有機(jī)酸、色素和糖類等雜質(zhì)，運(yùn)用Teflon涂層離心管進(jìn)行離心，取離心液至自動(dòng)進(jìn)樣瓶用于GC/MS或LC/MS進(jìn)行測(cè)定。QuEchERS法是農(nóng)藥多殘留分析中的一種簡(jiǎn)便、快速、安全、價(jià)格低廉的分析方法，因其使用溶劑量少、前處理操作簡(jiǎn)單、效率高受到廣大農(nóng)檢機(jī)構(gòu)檢測(cè)人員歡迎，但其前處理方法在農(nóng)藥多殘留同時(shí)分析測(cè)定中不能兼顧所有待測(cè)目標(biāo)物的回收率，而且沒(méi)有被引用到現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中，因此使用有限。

總之，在蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作中，全體農(nóng)業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)人員都應(yīng)保持嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度，嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在各自的資質(zhì)認(rèn)定范圍內(nèi)開(kāi)展農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作，為社會(huì)食品安全、人民生命健康保駕護(hù)航。本文簡(jiǎn)單介紹蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作中最常用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的前處理方法原理，便于人們更好地理解檢測(cè)工作原理，更好地保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。