男性腫瘤患者生育力保存的研究進(jìn)展

邵帥，王開秀，丁濤，姜經(jīng)航，王婷婷，劉波，江梅*

(湖北省荊門市第二人民醫(yī)院1.生殖醫(yī)學(xué)科；2.泌尿外科，荊門 448000)

近年來(lái)，隨著人們生活方式的改變，環(huán)境污染、食品安全以及手機(jī)輻射等對(duì)人類健康構(gòu)成極大威脅，導(dǎo)致腫瘤發(fā)病率逐年升高，而且腫瘤患者也逐漸年輕化。研究顯示僅在美國(guó)，每年就有7萬(wàn)多名年齡在15歲至39歲之間的青少年和青年患者被診斷癌癥，15歲以下兒童的癌癥發(fā)病率大約為每年1萬(wàn)例[1]。雖然腫瘤患者人數(shù)增多，但由于腫瘤治療技術(shù)的提升，青少年腫瘤患者的生存率日益提高，大約80%患者可以長(zhǎng)期生存[2]。在美國(guó)每450名男性中就有1人是腫瘤幸存者，但是卻面臨著腫瘤治療導(dǎo)致不育的風(fēng)險(xiǎn)[3]。隨著各種治療方案的不斷改進(jìn)以及相關(guān)藥物升級(jí)換代，腫瘤患者的致死率降低，生存期延長(zhǎng)，但相關(guān)治療以及腫瘤本身對(duì)生育力有著極大的影響。因此，患者治療后對(duì)生育的需求正成為關(guān)注的熱點(diǎn)，而腫瘤患者生育力保障的最佳時(shí)期是在開始治療前嘗試保留生育力，同時(shí)不影響患者的治療。美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)和歐洲腫瘤醫(yī)學(xué)會(huì)的指南均強(qiáng)調(diào)了腫瘤患者治療前嘗試保留生育力[4-5]。鑒于男性腫瘤患者尤其是青少年腫瘤患者的生育力問題的重要性以及迫切性，本文就腫瘤對(duì)男性生育力的影響以及男性腫瘤患者生育力保存方法做一綜述。

一、腫瘤及治療對(duì)男性生育力的影響

1.腫瘤對(duì)男性生育力的影響：腫瘤本身會(huì)影響男性生育力，導(dǎo)致男性少弱精子癥，甚至無(wú)精子癥。睪丸腫瘤和一些免疫或血液系統(tǒng)腫瘤(如白血病、淋巴瘤)都被認(rèn)為是導(dǎo)致精液質(zhì)量下降的重要危險(xiǎn)因素。研究發(fā)現(xiàn)霍奇金淋巴瘤、白血病等能損傷男性生育力，導(dǎo)致精液量及精子濃度顯著下降[6]。腫瘤的生長(zhǎng)會(huì)侵襲正常的睪丸組織，影響睪丸生精功能，其機(jī)制可能與下丘腦-垂體-性腺軸(HPG)控制睪丸功能有關(guān)，HPG調(diào)控正常精子生成所需的激素LH和FSH。泌乳素瘤產(chǎn)生的過(guò)多泌乳素、腫瘤多種癥狀或頭頸部惡性腫瘤均會(huì)破壞HPG軸或?qū)е滦怨δ苷系K[7]。腫瘤既能對(duì)睪丸產(chǎn)生直接影響，也可通過(guò)低表達(dá)熱休克蛋白A2(HSPA2)、Na/K-ATP酶睪丸特異性亞型(ATP1A4)、泛素-細(xì)胞色素c還原酶復(fù)合物核心蛋白2(UQCRC2)以及過(guò)表達(dá)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)間接影響睪丸的功能[8]。腫瘤也會(huì)激活全身細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致發(fā)燒，引發(fā)核心體和睪丸溫度的波動(dòng)，進(jìn)而影響精子發(fā)生。而且腫瘤相關(guān)的情緒壓力會(huì)導(dǎo)致各種激素水平的改變，如兒茶酚胺、泌乳激素、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)等，這些變化也可能對(duì)精子發(fā)生和精子功能產(chǎn)生有害影響。再者，腫瘤患者往往會(huì)出現(xiàn)長(zhǎng)期的飲食方式改變及身體消耗增加，這將會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)不良，維生素、礦物質(zhì)和微量元素的缺乏能夠引發(fā)精子發(fā)生障礙[9]。最近的一項(xiàng)研究表明單側(cè)睪丸腫瘤不僅損傷本側(cè)睪丸功能，影響精子形成，甚至影響對(duì)側(cè)睪丸的精子發(fā)生，睪丸腫瘤患者在治療前精子濃度和精子活力均較低[10]。睪丸腫瘤相關(guān)的因子，如β-人絨毛膜促性腺激素(β-hCG)和甲胎蛋白(AFP)可能通過(guò)破壞HPG軸降低促性腺激素的生成而產(chǎn)生全身性影響以及通過(guò)影響睪丸精子發(fā)生而產(chǎn)生局部影響[11]。除此之外，睪丸腫瘤也可以通過(guò)破壞血-睪屏障導(dǎo)致免疫系統(tǒng)直接損傷精原干細(xì)胞以及影響局部免疫，并產(chǎn)生抗精子抗體。抗精子抗體能夠影響精子的活力和獲能，抑制精子的頂體活性，導(dǎo)致頂體反應(yīng)受限影響精子穿透卵細(xì)胞放射冠，進(jìn)而干擾精卵的結(jié)合受精，從而引發(fā)男性免疫性不育[12]。

2.腫瘤治療對(duì)男性生育力的影響：手術(shù)、化療和放療是治療腫瘤的主要方式，三者的聯(lián)合應(yīng)用使得腫瘤治療效果極大地改善。但每一種治療都可能會(huì)因HPG軸紊亂或者生精細(xì)胞毒性作用或者手術(shù)損傷等原因造成男性生育能力損害[13]。

睪丸切除術(shù)對(duì)生殖潛能有著直接的影響，單側(cè)睪丸切除可導(dǎo)致85%患者的精子濃度和精子總數(shù)降低，9%患者出現(xiàn)無(wú)精子癥[14]。經(jīng)腹股溝途徑根治性睪丸切除術(shù)是睪丸腫瘤的主要手術(shù)治療方式，術(shù)中容易造成神經(jīng)、血管、器官等損傷，而這些損傷均可導(dǎo)致性功能障礙。Wiechno等[15]最近研究顯示經(jīng)腹股溝途徑根治性單側(cè)睪丸切除術(shù)，術(shù)后短時(shí)間內(nèi)睪酮水平不受影響，但術(shù)后1個(gè)月泌乳素顯著降低，隨后睪酮水平下降、性腺功能減退，導(dǎo)致勃起功能障礙(ED)。睪丸腫瘤中絕大多數(shù)是生殖細(xì)胞腫瘤，臨床Ⅰ期睪丸非精原細(xì)胞瘤約占生殖細(xì)胞腫瘤的60%，而非精原細(xì)胞瘤常見腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因此，術(shù)中建議行腹膜后淋巴結(jié)清掃術(shù)(RPLND)。既往RPLND容易損傷腹下神經(jīng)及盆腔神經(jīng)叢，術(shù)后患者都會(huì)出現(xiàn)逆行射精、ED、不育等并發(fā)癥。為減少和避免并發(fā)癥的發(fā)生，術(shù)中需要盡量避免損傷神經(jīng)，使大部分患者有射精功能，但仍然還有一部分患者會(huì)出現(xiàn)ED和逆行射精等并發(fā)癥[16]。

化療對(duì)男性生育能力的影響很大程度上取決于所用的藥物、劑量、療程和組合?；熕幬镏型榛瘎┥扯拘宰畲?，治療5年后大約25%的男性出現(xiàn)無(wú)精子癥，青春期前患者使用環(huán)磷酰胺的劑量為7.5～9.0 g/m2容易導(dǎo)致婚后不育，青春期后患者使用環(huán)磷酰胺劑量為10.0 g/m2(300 mg/kg)容易導(dǎo)致不育，劑量為19 g/m2時(shí)容易導(dǎo)致無(wú)精子癥[17]。臨床常用的鉑類化療藥也有相當(dāng)大的生殖毒性，研究表明，使用鉑類化療藥5年后，鉑類化療藥低劑量組和高劑量組的無(wú)精子癥發(fā)生率分別為20%和47%[18]。聯(lián)合化療方案作為一些惡性腫瘤的最佳選擇，MOPP (甲氯雷他明，長(zhǎng)春新堿，丙嗪，強(qiáng)的松)對(duì)血液系統(tǒng)惡性腫瘤有良好的效果，但85%的患者出現(xiàn)無(wú)精子癥、性腺功能減退癥并持續(xù)15年之久[19]。

放射治療(XRT)可以直接作用于睪丸，也可以作用于腹膜后或骨盆腫瘤，通過(guò)產(chǎn)生大量的輻射損傷睪丸并導(dǎo)致性腺毒性。睪丸生殖細(xì)胞和體細(xì)胞的DNA損傷程度取決于放射野的大小、劑量及放療方案。與化療類似，快速分裂的精母細(xì)胞對(duì)輻射是最敏感的，也是最早受到輻射影響，低至0.1 Gy輻射劑量都會(huì)影響精子發(fā)生；0.35 Gy輻射劑量可造成可逆性短期無(wú)精子癥；2～3 Gy輻射劑量可能造成長(zhǎng)期影響，但有恢復(fù)的潛力；超過(guò)6 Gy輻射劑量可引起精原干細(xì)胞的完全耗竭和永久性不育[20]。

二、男性腫瘤患者生育力保存方法

1.自體精液冷凍保存：精液冷凍保存技術(shù)于20世紀(jì)60年代開始應(yīng)用于輔助生殖技術(shù)中，是目前腫瘤患者生育力保存最成熟的技術(shù)。最新的美國(guó)臨床腫瘤學(xué)協(xié)會(huì)指南也建議腫瘤治療前進(jìn)行精液冷凍保存。射精獲得精液進(jìn)行冷凍保存是一種安全、無(wú)創(chuàng)和首選的男性生育力保存方法，手淫是最佳的取精方式。將取出的精液緩慢加入到冷凍保護(hù)劑中，通過(guò)程序化冷凍或玻璃化冷凍放入到液氮中進(jìn)行冷凍保存，精液冷凍復(fù)蘇后根據(jù)精液情況進(jìn)行人工授精(IUI)、體外受精-胚胎移植(IVF-ET)或者卵胞漿內(nèi)單精子注射技術(shù)(ICSI)等，適用于青春期后的腫瘤患者。從生物學(xué)的角度來(lái)看，精子可以無(wú)限期地儲(chǔ)存或者至少可以保存20年以上。研究顯示精子在液氮中儲(chǔ)存28年后，解凍后仍能保持良好的活力，而且能夠與透明帶正常結(jié)合[21]。兩篇關(guān)于使用冷凍20年以上的人類精子進(jìn)行受精的成功案例已經(jīng)發(fā)表：1例是使用保存21年的精液進(jìn)行體外受精-胚胎移植(IVF-ET)已成功分娩[22]；另外1例使用儲(chǔ)存了28年的精液進(jìn)行人工授精(IUI)也已分娩[23]。一份研究報(bào)道是用冷凍了將近40年的精液進(jìn)行試管受精，移植后順利產(chǎn)下雙胞胎[24]。Huang等[25]通過(guò)分析119 558份冷凍精液標(biāo)本發(fā)現(xiàn)在人類精子庫(kù)中長(zhǎng)期冷凍儲(chǔ)存精液不管通過(guò)IUI還是IVF-ET并不影響臨床妊娠、流產(chǎn)或活產(chǎn)率，但超過(guò)5年的冷凍保存會(huì)影響精子的質(zhì)量。主要是因?yàn)槔鋬鼍簳?huì)降低精子活力，增加DNA碎片率，并增加活性氧的產(chǎn)生，冷凍前加入咖啡因和褪黑激素是一種非常有效和簡(jiǎn)單的提高精子質(zhì)量的方法[26]。對(duì)于一些無(wú)精子癥患者或因腫瘤導(dǎo)致的無(wú)精子癥的患者，可以通過(guò)附睪穿刺精子抽吸術(shù)、睪丸穿刺精子抽吸術(shù)以及睪丸切開顯微取精術(shù)等獲得部分精子，避免耽誤腫瘤治療，取出的微量精子可以通過(guò)微量精子冷凍法，包括空透明帶冷凍、玻璃化微滴冷凍、Cryopiece、Cell Sleeper法等，冷凍后再行ICSI受精。研究顯示非梗阻性無(wú)精子癥患者睪丸穿刺獲取的睪丸精子冷凍復(fù)蘇后行ICSI與新鮮睪丸精子相比，在受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、臨床妊娠率、活產(chǎn)率等均無(wú)差異[27]。

2.睪丸組織冷凍保存：青春期前男性患者的睪丸組織尚未能形成成熟精子，以及青春期后無(wú)法提供精液樣本的青少年和年輕人，可以通過(guò)取睪丸組織進(jìn)行冷凍保存。睪丸組織的低溫保存為恢復(fù)生育能力提供了幾種選擇：(1)當(dāng)患者需要生育時(shí)，可解凍保存的睪丸組織，將睪丸組織移植到睪丸或異位區(qū)，在體內(nèi)形成成熟的精子；(2)組織經(jīng)酶消化后獲得自體精原干細(xì)胞(SSCs)，然后再將SSCs移植到睪丸內(nèi)形成精子；(3)體外培養(yǎng)睪丸組織，使精原干細(xì)胞經(jīng)成熟分裂產(chǎn)生精子。但目前，這些方法仍處于實(shí)驗(yàn)階段。

Fayomi 等[28]將青春期前雄性恒河猴睪丸組織冷凍保存后移植到恒河猴背皮或陰囊皮下，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，8～12個(gè)月內(nèi)移植睪丸組織生長(zhǎng)并產(chǎn)生睪酮，并有精子形成，能夠使恒河猴的卵母細(xì)胞受精、胚胎發(fā)育、懷孕，并且產(chǎn)下健康的雌性恒河猴。而在睪丸組織的異種移植中也被證明有精子生成，Ntemou 等[29]將青春期前的狨猴睪丸組織冷凍保存，解凍后異體移植到4周齡免疫缺陷小鼠的睪丸實(shí)質(zhì)或背側(cè)皮膚下，4個(gè)月后50%的睪丸內(nèi)移植和21%的異位移植恢復(fù)睪丸功能，33%的睪丸內(nèi)移植中觀察到完整的精子發(fā)生，78%的睪丸內(nèi)移植表現(xiàn)出減數(shù)分裂后的分化(圓形精子細(xì)胞、拉長(zhǎng)的精子細(xì)胞和精子)，每條生精小管含精原細(xì)胞較多；移植后9個(gè)月，生精小管含有更多的減數(shù)分裂后生殖細(xì)胞，沒有生殖細(xì)胞的小管較少。雖然睪丸組織移植已被證明是有效的恢復(fù)生育能力的技術(shù)，但這種技術(shù)對(duì)于患有全身性或轉(zhuǎn)移性癌癥的患者并不可行，因?yàn)闅堄嗟膼盒约?xì)胞隨時(shí)可能會(huì)傳播。

對(duì)于接受過(guò)惡性腫瘤治療的患者，可以通過(guò)消化組織、清除殘余的惡性細(xì)胞或分離SSCs和移植最后的細(xì)胞懸液來(lái)恢復(fù)生育能力。Sadri-Ardekani等[30]在繁殖培養(yǎng)過(guò)程中通過(guò)幾次傳代獲得了純化的SSCs，但這些結(jié)果還有待證實(shí)。

睪丸組織的體外培養(yǎng)技術(shù)雖然受限，但也取得了長(zhǎng)足的發(fā)展，很多研究都描述了使用青春期前小鼠睪丸組織的冷凍復(fù)蘇后進(jìn)行有機(jī)培養(yǎng)或3D培養(yǎng)分離細(xì)胞在體外完成精子形成的過(guò)程，而de Michele等[31]首次發(fā)現(xiàn)青春期前男孩睪丸組織冷凍保存，復(fù)蘇后在體外進(jìn)行的有機(jī)培養(yǎng)能夠形成單倍體生殖細(xì)胞，并且減數(shù)分裂細(xì)胞和減數(shù)分裂后細(xì)胞在人體冷凍睪丸組織器官培養(yǎng)16 d后的發(fā)育。人類未成熟的睪丸組織在34℃血清替代品條件下，精原細(xì)胞和支持細(xì)胞的存活率最好。補(bǔ)充FSH/LH還可提高支持細(xì)胞的長(zhǎng)期存活率和精原細(xì)胞在短期培養(yǎng)至減數(shù)分裂起始階段的成熟[32]。

這些結(jié)果在動(dòng)物模型中取得了很大的進(jìn)展，但還需要進(jìn)一步的驗(yàn)證和轉(zhuǎn)化到人類研究中。此外，還需要進(jìn)一步研究，以優(yōu)化冷凍保存方案和策略，將腫瘤細(xì)胞重新引入冷凍保存的睪丸組織的風(fēng)險(xiǎn)降到最低。

3.干細(xì)胞在男性生育力保存中的應(yīng)用：干細(xì)胞 (stem cells) 是一群具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞，具有自我更新和多向分化能力，能夠分化成多種功能的細(xì)胞。隨著對(duì)干細(xì)胞不斷深入研究，干細(xì)胞也逐漸應(yīng)用男性生育力方面，并且多種干細(xì)胞可以誘導(dǎo)精子發(fā)生，包括精原干細(xì)胞(spermatagonial stem cells，SSCs)、間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stromal Cells，MSCs)、胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells，ESCs)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)。

精原干細(xì)胞(SSCs)是男性生殖的基礎(chǔ)，其自我更新和分化的能力對(duì)男性生育能力至關(guān)重要，SSCs是唯一參與精子發(fā)生的干細(xì)胞。青春期前腫瘤患者在化療前將SSCs從睪丸組織分離出來(lái)冷凍保存，需要的時(shí)候再將SSCs自體移植回患者睪丸內(nèi)重啟精子發(fā)生，使患者重新獲得生育力，也可將SSCs分離出來(lái)進(jìn)行體外培養(yǎng)形成精子。20多年前，Brinster等[33]第一個(gè)成功將SSC自體移植到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生精子并產(chǎn)生后代。SSCs 數(shù)量極少，分離純化的方式較為復(fù)雜，Tian 等[34]通過(guò)免疫細(xì)胞磁珠分離法和流式細(xì)胞術(shù)從模型小鼠睪丸組織中分離純化了SSCs，將純化后的SSCs移植到B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病模型小鼠的曲精小管中，移植的SSCs在小鼠輸精管基底廣泛定植增殖，經(jīng)過(guò)12周的SSC移植，受體睪丸組織中發(fā)現(xiàn)大量的生精細(xì)胞和精子。SSCs在體外可以通過(guò)飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)法、無(wú)飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)法、組織塊培養(yǎng)法、三維細(xì)胞培養(yǎng)法等進(jìn)行培養(yǎng)形成精子，Suyatno等[35]在SSCs培養(yǎng)液中添加血清替代物，體外可以培養(yǎng)2個(gè)月，并用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)皿發(fā)現(xiàn)能抑制睪丸組織內(nèi)其他體細(xì)胞的增殖；最近，Murdock等[36]發(fā)現(xiàn)人睪丸細(xì)胞外基質(zhì)包被培養(yǎng)皿可以有效促進(jìn)人SSCs體外增殖。

間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)代表一類成體干細(xì)胞，主要來(lái)源骨髓、脂肪、臍帶血和組織等，也可以從包括睪丸在內(nèi)的全身血管化組織中分離出侵襲性不同的MSCs[37]。2006年Nayernia等[38]人首次報(bào)道了MSCs在體外可向生殖細(xì)胞譜系分化，他們?cè)谛∈蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞中誘導(dǎo)了減數(shù)分裂前期單倍體生殖細(xì)胞(GC)標(biāo)記物的表達(dá)。人臍帶來(lái)源的MSCs在體外培養(yǎng)條件下可產(chǎn)生支持細(xì)胞(SC)樣細(xì)胞和單倍體生殖細(xì)胞(GC)樣細(xì)胞，可以利用這些細(xì)胞的旁分泌特性來(lái)維持SSCs或促進(jìn)它們?cè)隗w外或體內(nèi)的分化，用于生育力保存和修復(fù)[39]。SSCs移植被認(rèn)為是最有希望保持腫瘤患者生育力的技術(shù)，但移植存活率很低，這可能是由于缺乏微環(huán)境，導(dǎo)致移植的SSCs凋亡。MSCs在提高SSCs移植效率以及促進(jìn)精子形成方面有潛在益處。骨髓MSCs產(chǎn)生旁分泌因子，可能為骨髓MSCs的形成創(chuàng)造有利的環(huán)境并可能通過(guò)協(xié)助共移植的SSCs尋找支持位和啟動(dòng)分化來(lái)幫助內(nèi)源性精子形成。因此，MSCs與SSCs聯(lián)合移植在男性生殖功能恢復(fù)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

胚胎干細(xì)胞(ESCs)經(jīng)誘導(dǎo)可分化為三胚層的所有類型細(xì)胞，包括精子細(xì)胞，甚至形成活動(dòng)的精子。人ESC體外誘導(dǎo)向精子分化的過(guò)程，再現(xiàn)了體內(nèi)精子的發(fā)生，同理，若體外ESCs向精子分化發(fā)生異常，可提示體內(nèi)精子發(fā)生障礙。Makoolati 等[40]將ESCs體外來(lái)源的SSCs移植到無(wú)精子癥動(dòng)物模型中，移植8周后觀察到輸精管基部和受體睪丸內(nèi)的注射細(xì)胞、移植睪丸的精原細(xì)胞數(shù)和睪丸質(zhì)量均高于對(duì)照組。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8(FGF8)的下調(diào)可以促進(jìn)ESCs向SSCs的分化，且FGF8的表達(dá)水平與MAPK/ERK信號(hào)呈正相關(guān)，F(xiàn)GF8可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞分化和自我更新之間的動(dòng)態(tài)平衡來(lái)調(diào)控生殖細(xì)胞的命運(yùn)[41]。Nayernia等[42]利用小鼠ESCs 來(lái)源的SSCs進(jìn)行減數(shù)分裂，在體外產(chǎn)生單倍體的雄配子，通過(guò)卵胞漿內(nèi)單精子注射技術(shù)使小鼠卵母細(xì)胞受精，由此產(chǎn)生的雙細(xì)胞胚胎被轉(zhuǎn)移到輸卵管中，出生的7只子代中有6只發(fā)育到成年期，表明通過(guò)這種方法從胚胎干細(xì)胞中獲得的雄性配子能夠誘導(dǎo)正常的受精和發(fā)育。

誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs)：在精子和SSCs缺乏情況下，人類iPSCs技術(shù)可以通過(guò)利用皮膚活檢來(lái)源的成纖維細(xì)胞或其他非侵入性來(lái)源的細(xì)胞，如尿液來(lái)源的細(xì)胞或頭發(fā)角質(zhì)細(xì)胞等生成配子[43]。iPSCs可以從病人的體細(xì)胞中衍生出原始生殖樣細(xì)胞(PGCs)用于睪丸移植，誘導(dǎo)體內(nèi)生殖細(xì)胞發(fā)育；除此之外，在克氏綜合征和非梗阻性無(wú)精子患者中已經(jīng)衍生出iPSCs[44-45]。到目前為止，人類iPSC可分化為PGCs，且過(guò)表達(dá)DAZ 家族蛋白時(shí)，PGCs 可進(jìn)入減數(shù)分裂階段，并最終形成表達(dá)精子頂體酶的單倍體精子細(xì)胞[46]。在體外從小鼠ESC和iPSC中已經(jīng)獲得PGCs，移植到小鼠卵巢和睪丸后可以活產(chǎn)[47]。iPSC的出現(xiàn)使得生殖領(lǐng)域取得了極大的進(jìn)展，也為男性生育力保存提供了極大的潛力。

總結(jié)

隨著腫瘤治療技術(shù)不斷提高，腫瘤患者生存率不斷提高，患者對(duì)于生育的需求越來(lái)越強(qiáng)烈，但腫瘤本身及其治療都會(huì)直接或間接損傷睪丸，影響男性生育力導(dǎo)致不育。對(duì)于不同年齡段的腫瘤患者可以采取不同的生育保存方法，對(duì)于青春期后有生育需求的腫瘤患者，可以通過(guò)自體精液冷凍進(jìn)行生育力保存；而對(duì)于青少年或者兒童腫瘤患者可以通過(guò)睪丸組織冷凍或者精原干細(xì)胞冷凍進(jìn)行保存；而對(duì)于無(wú)精子癥患者則可以通過(guò)干細(xì)胞技術(shù)獲取生育力，雖然干細(xì)胞技術(shù)的研究目前處于起步階段，還有很多潛在的風(fēng)險(xiǎn)，安全性和有效性有待研究，但毫無(wú)疑問干細(xì)胞在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中具有非常重要價(jià)值，并且具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。