任珊珊
(國(guó)家圖書(shū)館古籍館,北京 100034)
空氣微生物是指空氣中細(xì)菌、霉菌和放線菌等有生命的活體,主要來(lái)源于自然界的土壤、水體、動(dòng)植物和人類(lèi),多以氣溶膠形式存在于空氣中[1]??諝馕⑸飳?duì)人類(lèi)健康有極大的影響,一般認(rèn)為粒徑分布在10~30 μm范圍內(nèi)的空氣微生物氣溶膠可進(jìn)入鼻腔和上呼吸道;粒徑為6~10 μm的會(huì)進(jìn)入支氣管中,粒徑為1~5 μm的會(huì)進(jìn)入肺部[2]。除了影響人體健康外,空氣微生物對(duì)圖書(shū)的危害更大。它們沉降在書(shū)籍表面,在適宜的環(huán)境(溫度、濕度、光線、pH值)下萌發(fā),以紙張、淀粉漿糊、膠料以及油墨等作為養(yǎng)料,對(duì)紙質(zhì)文物造成不可逆的損毀[3]。近年來(lái),空氣微生物的研究已經(jīng)成為圖書(shū)、文博、檔案行業(yè)的基礎(chǔ)研究?jī)?nèi)容之一。1992年,王春蕾等[4]對(duì)故宮的研究發(fā)現(xiàn),空間不夠封閉的總保管組和宮廷組的多數(shù)庫(kù)房空氣中的霉菌含量都超過(guò)了2 000 CFU/m3。馬燕天等[5]發(fā)現(xiàn)莫高窟封閉洞窟內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于洞窟外檢票口處,而真菌數(shù)量則相差不大,且由于氣候干燥,微生物數(shù)量隨季節(jié)變化的趨勢(shì)并不明顯。三峽博物館文物庫(kù)房的空氣微生物研究顯示,空氣微生物總數(shù)在不同樓層的文物庫(kù)房中無(wú)顯著性差異,采樣點(diǎn)最高檢出值為180 CFU/m3[6]。采用自然沉降法對(duì)中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)圖書(shū)館共4層11個(gè)采樣點(diǎn)進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)及霉菌總數(shù)的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)樓層微生物總數(shù)為385~822 CFU/m3[7]。為了加強(qiáng)庫(kù)房?jī)?nèi)部環(huán)境控制,確保古籍不受有害微生物侵染,并保障工作人員健康,對(duì)古籍館5個(gè)重點(diǎn)書(shū)庫(kù)的空氣微生物進(jìn)行采樣分析。
1.1.1 儀器
FA-1六級(jí)篩孔式空氣微生物采樣器(北京明杰藍(lán)天),IPP400培養(yǎng)箱(德國(guó)美墨爾特),YXQ-LS-100G立式壓力蒸汽滅菌器(上海博訊),SW-CJ-2FD雙人超凈臺(tái)(蘇州凈化),THZ-C型空氣恒溫振蕩器(太倉(cāng)培英),UPT-30L純水機(jī)(北京三達(dá)水)。
1.1.2 培養(yǎng)基
營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:蛋白胨10 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,瓊脂15 g;pH值7.2~7.4;121 ℃下滅菌20 min。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂15 g,水1 000 mL,自然pH值。115 ℃下滅菌30 min。
1.2.1 采樣點(diǎn)的選擇
根據(jù)古籍在書(shū)庫(kù)內(nèi)的分布情況,從白石橋館區(qū)四庫(kù)、白石橋館區(qū)臨時(shí)庫(kù)、古籍館館區(qū)前庫(kù)、古籍館館區(qū)中庫(kù)和古籍館館區(qū)后庫(kù)各選取一個(gè)書(shū)庫(kù)作為采樣區(qū)域。以下分別簡(jiǎn)稱(chēng)為庫(kù)1、庫(kù)2、庫(kù)3、庫(kù)4和庫(kù)5。
1.2.2 采樣、培養(yǎng)方法
每個(gè)采樣區(qū)域根據(jù)面積在對(duì)角線上選擇3個(gè)采樣點(diǎn)。采樣高度為1.2~1.5 m。每3月進(jìn)行一次平皿沉降式采樣,研究書(shū)庫(kù)微生物濃度的空間分布和季節(jié)性變化;進(jìn)行一次撞擊式采樣,研究書(shū)庫(kù)空氣中細(xì)菌的粒徑分布[8]。采樣結(jié)束后將培養(yǎng)皿正向靜置數(shù)分鐘,之后放入生物培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。真菌培養(yǎng)條件為28±1 ℃,培養(yǎng)7 d;細(xì)菌培養(yǎng)條件為37±1 ℃,培養(yǎng)24 h。
1.2.3 菌落計(jì)數(shù)
培養(yǎng)完畢后計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿上菌落數(shù)量,并根據(jù)不同的采樣方法選擇不同公式計(jì)算菌落總數(shù)(見(jiàn)公式1、公式2)。
平皿沉降法菌落計(jì)數(shù):
式中,X為每立方米空氣中的微生物數(shù)量,CFU/m3;N為平板暴露5 min,采樣培養(yǎng)后,3個(gè)平皿上菌落數(shù)的平均值;r為平皿底半徑,cm。
撞擊式采樣法:
式中,X為每立方米空氣中的微生物數(shù)量,CFU/m3;F為采樣速度,L/min;T為采樣時(shí)間,min。
分別在5個(gè)書(shū)庫(kù)設(shè)置采樣點(diǎn),采樣培養(yǎng)結(jié)束后計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù),并計(jì)算出各書(shū)庫(kù)空氣中的細(xì)菌和真菌濃度,結(jié)果見(jiàn)表1。經(jīng)計(jì)算可得出,5個(gè)書(shū)庫(kù)中空氣微生物總濃度范圍為550~982 CFU/m3,平均值為739±179 CFU/m3,均低于2 500 CFU/m3,符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定[9];各書(shū)庫(kù)真菌濃度明顯高于細(xì)菌。在選取的5個(gè)書(shū)庫(kù)中,庫(kù)1、庫(kù)4和庫(kù)5的空氣微生物濃度較低,而庫(kù)2和庫(kù)3空氣微生物濃度則遠(yuǎn)高于另外3個(gè)書(shū)庫(kù)。這是因?yàn)閹?kù)2和庫(kù)3平時(shí)并非用來(lái)保存善本古籍,僅在采樣階段作為臨時(shí)周轉(zhuǎn)庫(kù),環(huán)境控制能力較弱。
每3月進(jìn)行一次沉降式采樣,每年采樣4次,代表冬、春、夏、秋4個(gè)季度書(shū)庫(kù)空氣微生物濃度隨時(shí)間變化的情況。書(shū)庫(kù)環(huán)境和相對(duì)濕度直接影響著空氣微生物的生長(zhǎng)和存活。書(shū)庫(kù)溫濕度同時(shí)受到恒溫恒濕空調(diào)和外界環(huán)境影響,在一定范圍內(nèi)波動(dòng)。溫度以夏季最高,冬季最低,采樣期間溫度范圍為16~26 ℃;相對(duì)濕度以春秋兩季最低,夏季最高,冬季次高,采樣期間相對(duì)濕度范圍為26%~62%,符合外界溫濕度波動(dòng)規(guī)律。
表1 國(guó)家圖書(shū)館不同書(shū)庫(kù)空氣中細(xì)菌和真菌的濃度
采樣培養(yǎng)結(jié)束后計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù),并計(jì)算出各季節(jié)空氣中的細(xì)菌和真菌濃度,結(jié)果見(jiàn)圖1??梢钥闯鰰?shū)庫(kù)中空氣微生物總體濃度以及真菌的濃度都是夏季>春季>秋季>冬季;真菌濃度春季與夏季相當(dāng),冬季與秋季相當(dāng)。
圖1 國(guó)家圖書(shū)館古籍書(shū)庫(kù)空氣微生物濃度季節(jié)性變化
對(duì)書(shū)庫(kù)空氣中的細(xì)菌進(jìn)行了撞擊式采樣。培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)庫(kù)2的細(xì)菌濃度最高,庫(kù)1最低,這一結(jié)果與采用沉降法時(shí)基本一致。從圖2中可以看出空氣中的細(xì)菌在不同粒徑下的濃度分布有極大差別。整體來(lái)看,書(shū)庫(kù)空氣中細(xì)菌的主要粒徑分布在第1級(jí)和第5級(jí)兩個(gè)級(jí)別,即>7.0 μm和1.1~2.1 μm,,分別占總數(shù)的27.22%和21.11%,分布最少的是第3級(jí)和第6級(jí),分別為10.00%和7.22%。按不同空間來(lái)看,細(xì)菌的粒徑分布則稍有差別,庫(kù)1~5粒徑分布的峰值分別出現(xiàn)在第1級(jí)、第5級(jí)、第1級(jí)、第2級(jí)和第1級(jí)。
對(duì)古籍書(shū)庫(kù)進(jìn)行沉降式空氣微生物采樣,得到古籍館書(shū)庫(kù)中空氣微生物濃度范圍為550~982 CFU/m3,其中細(xì)菌濃度范圍為196~393 CFU/m3,真菌濃度范圍為314~589 CFU/m3,真菌濃度明顯高于細(xì)菌。書(shū)庫(kù)空氣中的微生物濃度符合GB/T 30227-2013《圖書(shū)館古籍書(shū)庫(kù)基本要求》[15]中空氣中菌落總數(shù)≤2 500 CFU/m3的規(guī)定。
圖2 國(guó)家圖書(shū)館古籍書(shū)庫(kù)空氣中細(xì)菌粒徑分布
5個(gè)書(shū)庫(kù)的空氣微生物濃度為庫(kù)5<庫(kù)1<庫(kù)4<庫(kù)3<庫(kù)2,這個(gè)結(jié)果與書(shū)庫(kù)的實(shí)際環(huán)境控制程度息息相關(guān)。庫(kù)2和庫(kù)3作為臨時(shí)周轉(zhuǎn)書(shū)庫(kù),缺乏溫濕度控制系統(tǒng),環(huán)境條件控制能力較弱,空氣微生物濃度最高。另外3個(gè)書(shū)庫(kù)均設(shè)有恒溫恒濕空調(diào)系統(tǒng),故庫(kù)1、庫(kù)4和庫(kù)5的空氣微生物濃度很低,波動(dòng)不大。
書(shū)庫(kù)中空氣微生物總體濃度以及真菌和細(xì)菌的濃度都是在冬季相對(duì)較低,春季逐漸升高,于夏季達(dá)到峰值,最后在涼爽而干燥的秋季后達(dá)到最低值。這是由于書(shū)庫(kù)溫濕度在恒溫恒濕空調(diào)系統(tǒng)的控制下,隨著外界環(huán)境溫濕度的變化,有一定范圍的波動(dòng)。其中溫度波動(dòng)相對(duì)較小,而相對(duì)濕度卻受外部環(huán)境影響較大。夏季采樣前后北京面臨多日強(qiáng)降雨,相對(duì)濕度很高導(dǎo)致空氣微生物濃度最高。
于夏季針對(duì)書(shū)庫(kù)空氣中的細(xì)菌進(jìn)行了碰撞式采樣,整體來(lái)看,書(shū)庫(kù)空氣中細(xì)菌的主要粒徑分布在>7.0 μm和1.1~2.1 μm。從人體健康角度分析,粒徑在1.1~2.1 μm的微生物會(huì)隨著人體呼吸進(jìn)入三級(jí)支氣管,但整體濃度較低,不會(huì)造成健康危害。而不同粒徑對(duì)古籍善本的影響還需進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。