溶血對(duì)11 項(xiàng)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾與對(duì)策探究

關(guān)志華 莆田華僑醫(yī)院（福建，莆田，351117）

生化檢驗(yàn)是臨床應(yīng)用較為廣泛的一種檢測(cè)技術(shù)，在疾病檢出、疾病診斷、病情觀察、療效評(píng)估等方面占據(jù)重要影響［1］。 生化檢驗(yàn)涉及到的內(nèi)容相對(duì)較多，較為主要的有肝功能指標(biāo)檢驗(yàn)（如ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、TP 等）、 血脂指標(biāo)檢驗(yàn) （如TC、TG、HDL-C、LDL-C、LPA 等）、 腎功能指標(biāo)檢驗(yàn)（如UA、Cr、GLU 等）、 心肌損傷指標(biāo)檢驗(yàn) （如CK、LDH、A-HBDH 等）、電解質(zhì)指標(biāo)檢驗(yàn)（如K、Na、Cl、CO2等）以及尿淀粉酶、葉酸等其他指標(biāo)檢驗(yàn)。 生化檢驗(yàn)過(guò)程中，標(biāo)本易受多種因素影響發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)釋放）［2］。溶血的發(fā)生將在一定程度上對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾，降低生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性，不利于檢驗(yàn)結(jié)果在臨床診療中作用的發(fā)揮。 為進(jìn)一步掌握溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果存在的影響，本研究以120 份血液標(biāo)本為例，對(duì)溶血前后K、Na、TBIL、DBIL、TP、ALB、HDL-C、TG、CK、AST、LDH檢測(cè)結(jié)果變化進(jìn)行了分析，并針對(duì)存在的干擾提出解決辦法，意在提升生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性、有效性。

1 對(duì)象及方法

1.1 對(duì)象

本研究所選對(duì)象為2019 年7 月-2020 年7 月期間在醫(yī)院行健康體格檢查的健康人空腹靜脈血樣本。 共120 例，包括男性60 例，女性60 例，年齡最大60 歲，最小20 歲，平均年齡在（43.26±3.78）歲。 對(duì)病例進(jìn)行空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈采血，觀察溶血對(duì)11 項(xiàng)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響。 納入標(biāo)準(zhǔn)：研究過(guò)程經(jīng)過(guò)病患家屬同意， 符合醫(yī)院倫理委員會(huì)相關(guān)規(guī)定。排除標(biāo)準(zhǔn)：未空腹；患有慢性疾病者；患有嚴(yán)重血液類(lèi)疾病患者；心腦血管疾病及免疫類(lèi)疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑

本研究中涉及到的主要儀器與試劑有：邁瑞醫(yī)療國(guó)際股份有限公司生產(chǎn)的BS-800 全自動(dòng)生化分析儀（隨機(jī)配備電解質(zhì)模塊）；長(zhǎng)沙鑫奧儀器儀表有限公司提供的血清學(xué)離心機(jī)；邁瑞醫(yī)療國(guó)際股份有限公司提供的生化檢測(cè)試劑盒等。

1.2.2 研究方法

首先，所有受試者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)采集8mL 靜脈血，將每位受試者血液標(biāo)本分別注入1 號(hào)試管與2 號(hào)試管中［3］。 1 號(hào)試管血液標(biāo)本設(shè)為未溶血組，2號(hào)試管血液標(biāo)本設(shè)為溶血組。 1 號(hào)根據(jù)生化檢驗(yàn)標(biāo)本處理要求進(jìn)行規(guī)范化操作，即利用離心機(jī)分離血清， 分離速度設(shè)置為3 500r/min， 分離時(shí)間設(shè)置為10min， 得到血清樣本后， 按照常規(guī)操作在BS-800全自動(dòng)生化分析儀上完成鉀（K）、鈉（Na）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、 肌酸激酶 （CK）、 天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）11 項(xiàng)生化指標(biāo)測(cè)定。 2 號(hào)做溶血處理（竹簽攪碎）后，分離血清并利用BS-800全自動(dòng)生化分析儀完成與1 號(hào)試管樣本相同項(xiàng)目測(cè)定。根據(jù)血紅蛋白濃度分成輕度溶血組（40 例，血紅蛋白濃度≤4g/L）、中度溶血組（40 例，血紅蛋白濃度4～10g/L）、重度溶血組（40 例，血紅蛋白濃度＞10g/L）。 最后進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)與比較［4］。

11 項(xiàng)生化檢驗(yàn)過(guò)程中， 用電極法完成血清K、Na 檢測(cè)；用酶動(dòng)力學(xué)法完成AST、CK、LDH 測(cè)定；用釩酸鹽法完成TBIL、DBIL 檢測(cè)；酶法、直接法完成TG、HDL-C 檢測(cè)；用雙縮脲法完成TP 檢測(cè)；用溴甲酚綠法完成ALB 檢測(cè)。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

正干擾， 此時(shí)血液中紅細(xì)胞內(nèi)外濃度的比率AST 為40∶1，GLU 為0.82∶1， 血清中LDH 濃度顯著增加；負(fù)干擾∶GLU 比例為1∶0.82，血清濃度值降低、稀釋效應(yīng)明顯。標(biāo)本溶血主要發(fā)生在采血環(huán)節(jié)，可對(duì)常規(guī)生化檢驗(yàn)造成影響，需要排除正向干擾因素［5］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS20.0 版本軟件、WPS 表格等統(tǒng)計(jì)學(xué)工具處理數(shù)據(jù)，生化指標(biāo)服從正態(tài)分布，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較行t 檢驗(yàn)，其他計(jì)數(shù)資料總數(shù)（n）或百分率（%）表示，用P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

由表1 數(shù)據(jù)分析可知，溶血后生化檢驗(yàn)結(jié)果在一定程度上發(fā)生改變，輕度溶血組中共有6 項(xiàng)生化指標(biāo)（K、LDH、AST、TP、DBIL、CK）檢測(cè)結(jié)果與未溶血組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果存在明顯差異（P＜0.05），K、LDH、AST、TP、CK 升高，DBIL 下降； 中度溶血組中共有7 項(xiàng)生化指標(biāo)（K、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、CK）檢測(cè)結(jié)果與未溶血組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果存在明顯差異 （P＜0.05），K、LDH、AST、TP、CK 升高，TBIL、DBIL 下降； 重度溶血組中共有9 項(xiàng)生化指標(biāo)（K、Na、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、TG、CK）檢測(cè)結(jié)果與未溶血組生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果存在明顯差異 （P＜0.05）；ALB、HDL-C 等指標(biāo)不受溶血影響［6］，即溶血組與未溶血組比較無(wú)明顯變化（P＞0.05），見(jiàn)表1。

3 討論

3.1 溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾

溶血是指紅細(xì)胞受各種因素（如過(guò)冷、過(guò)酸、過(guò)堿、強(qiáng)力震蕩等）使紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)釋放［3］。隨著細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)釋放，血液標(biāo)本成分不可避免發(fā)生改變，從而對(duì)血液生化檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。 血液生化檢查中，涉及到的項(xiàng)目相對(duì)較多。 本研究從眾多生化指標(biāo)中選取臨床應(yīng)用較為廣泛的11 項(xiàng)指標(biāo)（K、Na、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、ALB、CK、TG、HDL-C）進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)溶血對(duì)肝功能指標(biāo)、腎功能指標(biāo)、電解質(zhì)指標(biāo)、心肌損傷指標(biāo)等均存在不同程度影響， 影響最為明顯的當(dāng)屬血鉀與心肌酶類(lèi)指標(biāo)，影響最不明顯的當(dāng)屬血清白蛋白、血清高密度脂蛋白膽固醇［7］。究其原因：①紅細(xì)胞中含有大量的鉀離子、AST、LDH 等物質(zhì)，溶血后這些物質(zhì)被釋放，從而使檢驗(yàn)結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常標(biāo)準(zhǔn)［8］。與此同時(shí)，隨著溶血程度的提高，紅細(xì)胞破裂數(shù)量越多，所釋放的物質(zhì)越多，對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的干擾越大。 故本研究中重度溶血組受影響指標(biāo)項(xiàng)目要多于輕度溶血組，干擾程度也大于輕度溶血組。 ②在生化檢測(cè)過(guò)程中，血紅蛋白能夠參與試劑反應(yīng)。 故生化指標(biāo)測(cè)定方法不同，溶血所產(chǎn)生的影響也不同。 文獻(xiàn)資料表示，TBIL 測(cè)定時(shí)， 溶血對(duì)重氮法測(cè)定結(jié)果的干擾要大于對(duì)釩酸鹽法測(cè)定結(jié)果的干擾， 輕度溶血對(duì)TBIL 無(wú)影響，對(duì)DBIL 存在輕微影響［9］。③血清中原有物質(zhì)會(huì)在一定程度上與紅細(xì)胞破裂后釋放的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，在一定程度上干擾生化檢測(cè)結(jié)果。 ④溶血后，雖然一些成分未發(fā)生改變，但從整體層面來(lái)看，其在血清中的占比減少，故檢測(cè)值要低于正常值［10］。 例如，既有研究通過(guò)分析48 項(xiàng)溶血樣本生化檢驗(yàn)結(jié)果， 確定Cl、GGT 等指標(biāo)在重度溶血情況下，受血漿稀釋影響，檢測(cè)值低于未溶血樣本（本研究未涉及）。 ⑤血紅蛋白吸光度增加是導(dǎo)致溶血后TP、TG 等升高的關(guān)鍵因素。

表1 溶血前后11 項(xiàng)生化檢測(cè)結(jié)果比較[（±s）]

注：與未溶血組比較，*P＜0.05

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3.2 預(yù)防與控制干擾的主要辦法

生化檢驗(yàn)過(guò)程中導(dǎo)致血液標(biāo)本發(fā)生溶血的因素眾多，如試劑的不合理使用、儀器的不規(guī)范操作、標(biāo)本污染、標(biāo)本采集后的錯(cuò)誤存儲(chǔ)、離心處理不當(dāng)、運(yùn)輸環(huán)境不合理等。 這就需要醫(yī)院以及相關(guān)工作人員能夠高度重視溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響。 善于通過(guò)工作經(jīng)驗(yàn)歸納與總結(jié)掌握血液標(biāo)本溶血成因，并在此基礎(chǔ)上針對(duì)性制定溶血問(wèn)題解決方案，降低標(biāo)本溶血發(fā)生率，提高生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性［11］。

①在制度上：根據(jù)生化檢驗(yàn)要求，圍繞樣本采集、存儲(chǔ)、運(yùn)輸、生化指標(biāo)測(cè)定制定完善操作規(guī)范，使工作人員能夠嚴(yán)格遵循規(guī)范與要求處理標(biāo)本，進(jìn)行生化指標(biāo)測(cè)定。 ②在機(jī)制上：完善教育培訓(xùn)機(jī)制，通過(guò)“如何科學(xué)采血”專(zhuān)家講座、“血液標(biāo)本的正確處理” 技術(shù)交流、“溶血現(xiàn)象對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響”課題研究等活動(dòng)，幫助工作人員樹(shù)立規(guī)范意識(shí)、責(zé)任意識(shí)、安全意識(shí)，提高工作人員專(zhuān)業(yè)技能，豐富工作人員生化檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，以保證生化指標(biāo)測(cè)定方法選擇的科學(xué)與合理［12］。 ③在方法上：嚴(yán)格遵循樣本采集規(guī)范進(jìn)行操作， 減少操作過(guò)程中試劑污染、樣本污染、樣本震蕩等對(duì)檢測(cè)質(zhì)量的影響。 同時(shí)，工作人員可通過(guò)血紅蛋白濃度監(jiān)測(cè)進(jìn)行溶血干擾控制。即輕度溶血時(shí)，通過(guò)適當(dāng)調(diào)節(jié)血紅蛋白濃度，降低溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響；重度溶血時(shí)，通過(guò)重新采集標(biāo)本，降低溶血影響。

總之， 溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果存在較大影響，高度重視溶血問(wèn)題，并應(yīng)用合理方法降低血液標(biāo)本溶血現(xiàn)象發(fā)生，利于生化檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的提升。