• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    木糖及氧化豬脂對熱反應產(chǎn)物滋味的影響及滋味活性肽組分分離

    2020-01-02 02:59:58王天澤杜文斌謝建春
    中國食品學報 2019年12期
    關(guān)鍵詞:解液木糖鮮味

    王天澤 杜文斌 譚 佳 趙 健 謝建春

    (食品營養(yǎng)與人類健康北京高精尖創(chuàng)新中心 食品質(zhì)量與安全北京實驗室 北京工商大學 北京 100048)

    熱反應肉味香精是以蛋白酶解物為主要原料,基于肉香風味形成原理而制造的食品添加劑,已廣泛用于方便面、火腿腸、膨化食品、速凍水餃等多種食品的增香調(diào)味。蛋白酶解物中含有游離氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)及還原糖等肉香前體物,以酶解物為原料制備的熱反應肉味香精,不僅具有肉的香氣,還具有肉湯的滋味[1-2]。

    迄今,有關(guān)美拉德反應和脂質(zhì)氧化在熱反應肉味香精領(lǐng)域的研究主要集中在對肉香氣形成貢獻上[3-8],如曹長春等[3]研究了“半胱氨酸-木糖”產(chǎn)生的香氣物質(zhì),其檢測到2-甲基-3-呋喃硫醇和2-糠硫醇的含量最高;Hou等[4]研究了復雜美拉德反應體系“半胱氨酸-木糖-甘氨酸”中不同初期美拉德反應中間體對肉香味形成的貢獻大小,Yang等[6]研究了添加氧化及未氧化雞脂對“半胱氨酸-葡萄糖”熱反應產(chǎn)生肉香氣的影響,靳林溪等[7]分析鑒定了“氧化雞脂-半胱氨酸”反應體系產(chǎn)生的香氣物質(zhì)。有關(guān)美拉德反應對熱反應產(chǎn)物滋味影響研究近年也開始被研究者關(guān)注[9-12],如Liu等[9]研究“雞肉肽-木糖”反應,發(fā)現(xiàn)低溫、較長時間的美拉德反應有利于反應產(chǎn)物具有肉湯的鮮味和醇厚感。Lan等[10]研究“大豆肽-木糖”美拉德反應,發(fā)現(xiàn)肽在熱反應中可發(fā)生自身降解反應和美拉德交聯(lián)反應,而發(fā)生美拉德交聯(lián)反應后,小于1 000 u肽組分中苦味氨基酸、苦味肽含量降低,1 000~5 000 u肽的含量增加。但有關(guān)脂質(zhì)氧化反應對熱反應產(chǎn)物滋味影響的研究卻鮮有報道。Azad Shah等[13]曾將青魚片酶解物與脂肪酸的反應產(chǎn)物加入日本清面湯中,發(fā)現(xiàn)該反應產(chǎn)物可顯著提升面湯的飽滿感、醇厚味、連續(xù)性。

    本文以豬肉的酶解物為原料,通過設(shè)計“酶解物”(空白)、“木糖-酶解物”、“氧化豬脂-酶解物”、“木糖-氧化豬脂-酶解物”4個熱反應體系,研究木糖、氧化豬脂添加于酶解物中對熱反應產(chǎn)物滋味的影響,并嘗試對熱反應產(chǎn)物呈味肽組分進行分離鑒定,以探討不同反應體系滋味產(chǎn)生差異的原因。本研究結(jié)果可為熱反應肉味香精制備提供理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    豬后腿肉,北京美廉美超市;氧化豬脂(P.V.=223 meq/kg;A.V.=0.65 mg KOH/kg),按照文獻[14]制備;復合蛋白酶、風味蛋白酶,諾維信公司;三氟乙酸(色譜純)、木糖(分析純),北京百靈威科技有限公司;乙腈(色譜純),飛世爾實驗器材有限公司;正己烷(分析純),國藥集團化學試劑有限公司;葡聚糖凝膠Sephadex G-15,美國GE Healthcare公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器,河南省予華儀器有限公司;PHSJ-3F實驗室pH計,上海儀電有限公司;3-30K高速離心機,美國Sigma公司;ALPHA 2-4 LSC冷凍干燥機,德國Christ公司;MASTERFLEX蠕動泵,科爾帕默儀器有限公司;Pellicon 2 Mini超濾裝置及 1,3,5 ku 再生纖維素超濾膜,美國Millipore公司;MD-55自動液相色譜分離系統(tǒng),上海青浦滬西儀器廠;LC1200型高效液相色譜儀,美國Agilent公司。

    1.3 試驗方法

    1.3.1 酶解液制備 肉去除可見脂肪,于90℃水漂燙3 min,絞成肉糜。將一定量的肉糜、水加入到燒瓶中(肉水比1∶1,w/w),加入0.4%的復合蛋白酶,于55℃水浴下酶解3 h;再加入0.3%的風味蛋白酶,酶解1 h;升溫至85℃,滅酶10 min。

    酶解液15 000 r/min離心10 min,取上清液,凍干,干粉加入正己烷除脂,待用。

    1.3.2 熱反應 取0.5 g除脂凍干粉,加水5 mL成酶解液,置于15 mL耐壓管中。按表1,4個反應體系 “單純酶解液”、“酶解液+氧化豬脂”、“酶解液+木糖”、“酶解液+氧化豬脂+木糖”,120℃反應1 h,感官評價。

    表1 熱反應所用原料Table1 Materials used in the thermal reactions

    1.3.3 吸光度、顏色、pH值的測定 反應液使用pH計測定。反應液先經(jīng)0.45 μm膜過濾后,用超純水稀釋到適當濃度,在波長420 nm下測定吸光度值,結(jié)果=測定值×稀釋倍數(shù)。

    色度測定參照SB/T 10323-1999進行[15]。稱取碘1.000 g、碘化鉀2 g,先將碘化鉀用少量蒸餾水溶解,再加入精確稱取的碘,全部溶解后移入100 mL容量瓶內(nèi),定容后得1%碘液;1%碘液再進一步稀釋后得到系列不同濃度的標準色液。將反應液與系列標準色液比較,其中與標準色液顏色最一致的碘液濃度,記錄為該反應液的色度值。

    1.3.4 超濾分離 熱反應液先經(jīng)0.45 μm膜過濾。使用Millipore Pellicon 2 Mini型超濾裝置和截留分子質(zhì)量(MW)為1,3,5 ku的纖維素超濾膜超濾。氮氣壓力0.02 MPa。先使用5 ku的膜,透過液再依次使用3,1 ku的膜進行分級分離,得到4個組分,分別為 MW>5 ku、MW 3~5 ku、MW 1~3 ku和MW<1 ku。各組分冷凍干燥,稱重,感官評價,備用。

    1.3.5 葡聚糖凝膠色譜分離 對超濾所得MW<1ku組分進行分離。采用自動液相色譜系統(tǒng)進行。Sephadex G-15葡聚糖凝膠柱(玻璃柱,3.0 cm×60 cm),超純水洗脫,流速 1.0 mL/min,上樣 5 mL,上樣液質(zhì)量濃度100 mg/mL。紫外檢測波長220 nm。根據(jù)譜峰收集組分,凍干、稱量、感官評價。

    1.3.6 反相高效液相色譜分離 樣品為葡萄糖凝膠色譜柱分離后的呈味組分。先采用分析型色譜柱 Zorbax 300SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)建立了分析方法:流動相組成A水/三氟乙酸(1∶0.001,V/V),B 乙腈/三氟乙酸(1 ∶0.001,V/V);流速 1 mL/min;梯度洗脫,0~14 min,3→23%B;14~16 min,23→75%B;16~28 min,75→95%B。柱溫30℃;檢測波長為220 nm。然后在相同的色譜條件下,采用 Zorbax 300SB-C18(9.4 mm×250 mm,5 μm)色譜柱制備性分離收集,樣品質(zhì)量濃度10 mg/mL,進樣50 μL,重復進樣,自動餾分收集各組分、凍干、稱量、感官評價。

    1.3.7 感官評價 樣品溫度60℃,樣品質(zhì)量濃度10 mg/mL左右。品嘗醇厚感時,樣品與肉湯按1∶1(V/V)比例混合后進行品嘗。肉湯采用市場上購買的濃湯寶配制。

    評價小組包括5名人員,年齡在21~26周歲之間,其中男性2名,女性3名。描述詞包括鮮味、肉味、醇厚感、持續(xù)性。味的強度通過排序法給出,按強度遞增順序用無味、幾乎無味、弱、一般、較強、強等詞匯,表示樣品間的相對強度大小。

    1.3.8 基質(zhì)輔助激光解析電離質(zhì)譜(MALDI-TOFMS)分析 委托北京大學分析中心進行。5800型MALDI-TOF-MS質(zhì)譜儀 (美國AB Sciex公司)。樣品為反相高效液相色譜分離收集后的組分,溶劑為超純水。使用60%的乙腈水溶液配制飽和的α-氰基-4-羥基肉桂酸(CCA)溶液作為基質(zhì),將基質(zhì)溶液與樣品1∶1混合,取1 μL點在MALDI靶板上,在室溫下自然干燥。

    一級質(zhì)譜分析:激光光源為固態(tài)激光光源,波長349 nm,脈沖加速電壓7 kV,采用正離子反射模式采集數(shù)據(jù)。采集相對分子質(zhì)量范圍:100~1 000 u。二級質(zhì)譜分析:選擇一級譜中目標母離子峰進行二級質(zhì)譜分析(MS/MS),加速電壓2 kV,采用CID碰撞裂解母離子,獲取每個母離子的離子碎片。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 熱反應產(chǎn)物基本特性比較

    4個體系熱反應產(chǎn)物的吸光度、色度值、及pH值,見表2。

    表2 熱反應產(chǎn)物基本特性比較Table2 Basic characteristics determined for the four thermal reaction products

    木糖可與酶解液中的含氨基化合物發(fā)生美拉德反應,而氧化脂肪因含有一定量的醛、酮、氫過氧化物等脂質(zhì)氧化產(chǎn)物[16-18],其也與酶解液中的含氨基化合物發(fā)生反應[19]??傊?,4個反應體系中主要反應均為“羰-胺”反應,反應產(chǎn)物的褐變程度可用420 nm吸光值或反應液的色度表示[20-23],420 nm吸光值與形成的褐變產(chǎn)物(類黑精)的含量有關(guān)[5,24],而色度與肉眼觀察的反應液顏色有關(guān),二者往往具有一致性的變化趨勢。pH與反應過程中游離氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)等化合物中氨基的消耗及反應產(chǎn)物中有機酸的形成有關(guān),一般而言隨著反應進行pH呈下降趨勢[25-27]。

    由表2可知,與酶解液自身熱反應相比,加入氧化脂肪或木糖后,反應產(chǎn)物的420 nm吸光值及色度值均升高,pH均降低,但加入木糖后的變化幅度大,而加入氧化脂肪的變化幅度較小。同時加入木糖和氧化豬脂的變化與單獨加入木糖時差距不大。這些結(jié)果表明,酶解液中加入木糖發(fā)生的褐變反應程度遠大于加入氧化豬脂,氧化豬脂對反應液褐變產(chǎn)生的影響較小。

    2.2 熱反應產(chǎn)物滋味

    4個體系熱反應產(chǎn)物進行滋味評價,結(jié)果見表3。

    表3 熱反應產(chǎn)物的滋味特性Table3 Taste properties of the four thermal reaction products

    由表3可知,與“酶解液”體系相比,加入氧化豬脂后,熱反應產(chǎn)物的“鮮味”提升,“肉味”輕微提升,“醇厚感”較大提升,“持續(xù)性”顯著提升;加入木糖后,熱反應產(chǎn)物的“鮮味”和“肉味”均顯著提升,但“醇厚感”和“持續(xù)性”較小提升。氧化豬脂和木糖都加入時,熱反應產(chǎn)物 “鮮味”、“醇厚感”和“持續(xù)性”顯著提升,“肉味”較大提升。進一步比較可得出,木糖的加入更多地增強熱反應產(chǎn)物的“鮮味”、“肉味”,而氧化豬脂的加入更多地增強“醇厚味”、“持續(xù)性”。

    2.3 超濾分離及組分滋味評價

    “酶解液+氧化豬脂”、“酶解液+木糖”、“酶解液+氧化豬脂+木糖”熱反應產(chǎn)物超濾分離所得>5 ku、3~5 ku、1~3 kua和<1 ku 組分所占百分比及滋味評價結(jié)果見表4。

    表4 超濾分離所得不同分子質(zhì)量范圍組分占百分比(%)和滋味特性Table4 Percentages and taste properties of the ultra filtration fractions in different MW ranges

    由表4可以看出,3個體系均為<1 ku的組分所占百分比最多,其次是>5 ku的組分,3~5 ku和1~3 ku組分所占百分比較少。3個體系均是>5 ku、3~5 ku組分無味;1~3 ku的組分幾乎無味;而主要呈味的為<1 ku的組分。其中“酶解液+氧化豬脂”體系熱反應產(chǎn)物<1 ku的組分的醇厚感、持續(xù)性均強,“酶解液+木糖”體系熱反應產(chǎn)物<1 ku的組分的鮮味強,“酶解液+氧化豬脂+木糖”體系的<1 ku的組分鮮味強、醇厚感較強、持續(xù)性強。這與2.2節(jié)熱反應產(chǎn)物的滋味比較結(jié)果相一致。加入糖后的鮮味增強,很可能與形成交聯(lián)性的美拉德反應產(chǎn)物有關(guān)[12]。

    2.4 凝膠色譜分離

    對超濾所得的<1 ku的呈味組分進行葡聚糖凝膠色譜柱分離,色譜圖如圖1所示,收集的組分評價結(jié)果見表5。

    由圖1可知,樣品(“酶解液+氧化豬脂”體系)被分離洗脫出6個峰,在180~390 min之間,主要的峰在180 min以后被洗脫出來;樣品(“酶解液+木糖”體系)被分離洗脫出4個峰,在180~360 min之間,主要峰在180 min以后被洗脫出來;樣品(“酶解液+氧化豬脂+木糖”體系)被分離洗脫出5個峰,在100~360 min之間,主要的峰在120 min以后被洗脫出來。

    表5為圖1中葡聚糖凝膠分離所得各組分峰的感官評價結(jié)果。根據(jù)表5可知,“酶解液+氧化豬脂”體系中,分離所得的峰G2醇厚感較強、持續(xù)性強;“酶解液+木糖”體系中,分離所得的峰G1鮮味最強;“酶解液+氧化豬脂+木糖”體系中,分離所得的峰G3鮮味較強,醇厚感最強,持續(xù)性強。

    2.5 反相高效液相色譜分離

    分別對“酶解液+氧化豬脂”、“酶解液+木糖”、“酶解液+氧化豬脂+木糖”體系中的主要呈味峰G2、G1、G3進行反相高效液相色譜分離,所得色譜圖如圖2所示。

    由圖2可以看出,譜峰H1~H6和H8為3個體系反應產(chǎn)物中的共有組分,除了“酶解液+木糖”體系外,“酶解液+氧化豬脂”和 “酶解液+氧化豬脂+木糖”體系均存在峰H7和H9,因此推測峰H7和H9的組分的出現(xiàn)與反應體系組成中加入氧化豬脂有關(guān)。

    圖1 3個體系超濾所得<1ku組分的凝膠分離色譜圖Fig.1 Chromatograms of Sephadex G-15 separation of the<1ku taste-active fractions from the three reaction products

    表5 葡聚糖凝膠G-15分離所得各組分的滋味特性Table5 Taste properties of the fractions collected in the Sephadex G-15 chromatographic separation

    圖2 葡聚糖凝膠G-15分離所得呈味組分的反相高效液相色譜(分析型色譜柱)分離圖Fig.2 RP-HPLC chromatograms in the separation of the taste-active fractions collected from the Sephadex G-15 chromatographic separation

    對H1~H9譜峰組分進行液相色譜制備性分離,所收集流分的滋味品評結(jié)果見表6??芍?,峰H1-H6味道相似,主要呈鮮味、并帶有酸味,但鮮味最強的為H1組分,其它組分的鮮味很弱。H8組分鮮味和醇厚感都有,且醇厚感強、持續(xù)性較強。由于H1~H6和H8為3個體系反應產(chǎn)物中的共有組分,從滋味特征推測H1~H6應為來源于酶解物中的呈味多肽,而H8可能為美拉德肽[12](注:酶解液中含有少量還原糖,因此“酶解液+氧化豬脂”體系會檢測到H8組分)。

    H7和H9這兩個與反應體系中氧化豬脂的加入有關(guān)的組分中,前者幾乎無味、且持續(xù)性弱;而后者突出的味感為醇厚味、并具有持續(xù)性,推測后者很可能為小分子羰基類脂肪氧化成分修飾的肽組分。

    表6 反相高效液相色譜分離所得組分的滋味特性Table6 Taste properties of the fractions collected in the RP-HPLC chromatographic separation

    2.6 呈味組分的結(jié)構(gòu)鑒定

    盡管進行了超濾、葡聚糖凝膠色譜、反相高效液相色譜的多級分離,但由于熱反應產(chǎn)物組分復雜,最后收集制備的樣品,反過來再用反相液相色譜進行分析,發(fā)現(xiàn)仍然不純,但H1、H9號峰樣品相對較純。為此對這兩樣品進行MALDI-TOF一級質(zhì)譜分析,然后再選擇一級質(zhì)譜圖中強度高的峰進行二級質(zhì)譜分析,結(jié)果見圖3。

    圖3 HPLC分離收集H1、H9組分的MALDI-TOF一級質(zhì)譜圖及其主要質(zhì)譜峰m/z448.2859、762.4446和806.4725對應的二級質(zhì)譜圖Fig.3 MALDI-TOF mass spectra in analysis of fractions H1 and H9 and their corresponding MS/MS spectra for m/z 448.2859,762.4446 and 806.4725

    由圖3可知,H1號峰樣品一級質(zhì)譜中相對強的質(zhì)譜峰為m/z448.2859,H9號峰樣品一級質(zhì)譜中相對強的質(zhì)譜峰為m/z762.4446,806.4725。對這3個質(zhì)量數(shù)進行二級碰撞,根據(jù)所得二級質(zhì)譜碎片,并結(jié)合肽類化合物的質(zhì)譜裂分規(guī)律[28-29],推測出m/z448.2859可能為五肽丙氨酸-甘氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-丙氨酸,由于組成該肽的氨基酸均為鮮甜味氨基酸,可知這很可能是H1號峰具有較強的鮮味的原因。H9組分中m/z762.4446、m/z806.4725推測為脂質(zhì)修飾的肽,分別為己醛修飾的甘氨酸-谷氨酸-絲氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸,及丙氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-賴氨酸 (2-己烯醛修飾)-甘氨酸-半胱氨酸-天冬酰胺。2-己烯醛與肽的結(jié)合方式很可能為肽鏈中賴氨酸或精氨酸上的殘留氨基,通過邁克爾加成反應與2-己烯醛結(jié)合[30]。前期研究表明[16],2-己烯醛和己醛是氧化脂肪中含有的主要具有較高反應活性的醛,而己醛和2-庚烯醛可與谷胱甘肽反應,生成不揮發(fā)性加合物[31]。另外,H9組分采用600 M核磁共振碳譜初步分析 (未提供數(shù)據(jù)),發(fā)現(xiàn)在δC 20~30處檢測出峰簇,這可能也與H9的組分中含有脂質(zhì)化碳鏈有關(guān)??赡芤驗殡谋恢|(zhì)化修飾后,親脂性變強,從而對肉湯的滋味有增強醇厚感和持續(xù)性的效應,但這還有待于進一步研究。

    3 結(jié)論

    1)以豬肉酶解物為原料的熱反應,熱反應產(chǎn)物中主要呈味組分為<1 ku肽組分。木糖的添加對褐變反應貢獻遠大于氧化豬脂,木糖的添加對于提升反應產(chǎn)物的鮮味、肉味等滋味特性具有主要貢獻,而氧化豬脂的添加對于提升反應產(chǎn)物的醇厚感、持續(xù)性的滋味特性有主要貢獻。

    2)反應產(chǎn)物中<1 ku呈味肽組分,經(jīng)葡聚糖凝膠色譜、反相高效液相色譜分離收集,MALDITOF一級和二級質(zhì)譜分析,鑒定出3個肽分別為丙氨酸-甘氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-丙氨酸、己醛修飾的甘氨酸-谷氨酸-絲氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸、丙氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-賴氨酸(2-己烯醛修飾)-甘氨酸-半胱氨酸-天冬酰胺,其中丙氨酸-甘氨酸-谷氨酸-蘇氨酸-丙氨酸肽可能對鮮味具有主要貢獻,而己醛修飾的甘氨酸-谷氨酸-絲氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸和丙氨酸-蘇氨酸-天冬氨酸-賴氨酸(2-己烯醛修飾)-甘氨酸-半胱氨酸-天冬酰胺兩個脂質(zhì)化修飾肽對增強醇厚感和持續(xù)性有貢獻。

    猜你喜歡
    解液木糖鮮味
    復凝聚法制備河蟹酶解液微膠囊乳液的工藝優(yōu)化
    一個空瓶
    鮮味的秘密
    Exercise cardiac power and the risk of heart failure in men:A population-based follow-up study
    春日水中鮮
    美食(2022年4期)2022-04-16 00:25:37
    有心的小蘑菇
    布谷鳥讀信
    水產(chǎn)品酶解液中重金屬脫除技術(shù)研究進展
    化工管理(2021年7期)2021-05-13 00:45:14
    低聚木糖在家禽中的應用
    廣東飼料(2016年8期)2016-02-27 11:10:01
    鮮味藏不住
    美食堂(2013年9期)2013-04-29 15:57:16
    亚洲国产精品国产精品| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 日韩一区二区三区影片| 久久影院123| av片东京热男人的天堂| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产免费现黄频在线看| 久久毛片免费看一区二区三区| 午夜福利视频在线观看免费| 国产视频一区二区在线看| 免费在线观看日本一区| 99久久精品国产亚洲精品| 熟女av电影| 悠悠久久av| 在现免费观看毛片| 日日夜夜操网爽| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 成人国语在线视频| 国产精品国产三级专区第一集| 另类亚洲欧美激情| 热99国产精品久久久久久7| 免费看十八禁软件| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产97色在线日韩免费| 婷婷色综合大香蕉| 午夜老司机福利片| 精品熟女少妇八av免费久了| 麻豆av在线久日| 男女免费视频国产| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| a级片在线免费高清观看视频| 熟女av电影| a级片在线免费高清观看视频| 国产在线视频一区二区| 国产三级黄色录像| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 在线天堂中文资源库| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 男女午夜视频在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 韩国精品一区二区三区| 99久久人妻综合| 18禁观看日本| 久久久久国产精品人妻一区二区| 伦理电影免费视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产一区二区激情短视频 | 欧美成人精品欧美一级黄| 啦啦啦啦在线视频资源| 日本欧美国产在线视频| 亚洲成人手机| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 精品熟女少妇八av免费久了| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲欧洲日产国产| 国产视频一区二区在线看| 成年动漫av网址| 精品免费久久久久久久清纯 | 一区福利在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 色综合欧美亚洲国产小说| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 亚洲三区欧美一区| 亚洲久久久国产精品| 只有这里有精品99| 一区二区三区四区激情视频| 丝袜在线中文字幕| 久久久国产精品麻豆| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久99热这里只频精品6学生| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 成年动漫av网址| 欧美在线一区亚洲| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久人人爽人人片av| 成人午夜精彩视频在线观看| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲欧洲日产国产| 999精品在线视频| 人妻一区二区av| 嫁个100分男人电影在线观看 | 久久国产精品大桥未久av| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 黄片小视频在线播放| 婷婷色麻豆天堂久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品久久久久成人av| 久久久国产欧美日韩av| 天天操日日干夜夜撸| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产免费又黄又爽又色| 日韩大码丰满熟妇| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产一级毛片在线| 黑丝袜美女国产一区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 91精品伊人久久大香线蕉| 91字幕亚洲| 久久久国产精品麻豆| 黄色片一级片一级黄色片| 丁香六月欧美| 在线观看一区二区三区激情| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 国产在线视频一区二区| 两人在一起打扑克的视频| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲第一av免费看| 欧美日韩成人在线一区二区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产三级黄色录像| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产不卡av网站在线观看| 久久九九热精品免费| 天堂8中文在线网| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲av男天堂| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲色图综合在线观看| av在线老鸭窝| 丝袜人妻中文字幕| 99国产精品99久久久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久精品国产亚洲av高清一级| 高清av免费在线| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲国产精品999| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| av在线播放精品| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 看十八女毛片水多多多| 777米奇影视久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久天堂一区二区三区四区| 在线观看免费午夜福利视频| 一级毛片我不卡| 久久狼人影院| 精品国产乱码久久久久久小说| netflix在线观看网站| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 黄色毛片三级朝国网站| 国产成人系列免费观看| 一区二区三区精品91| 久久青草综合色| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 午夜两性在线视频| 国产精品av久久久久免费| 婷婷丁香在线五月| 999精品在线视频| 国产男女超爽视频在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜福利在线免费观看网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产视频一区二区在线看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 99久久精品国产亚洲精品| 老司机亚洲免费影院| av视频免费观看在线观看| 久久九九热精品免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲熟女精品中文字幕| av不卡在线播放| 久久久欧美国产精品| 69精品国产乱码久久久| 亚洲精品国产av成人精品| 另类亚洲欧美激情| 亚洲av男天堂| 国产亚洲av高清不卡| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产一区二区在线观看av| 国产片特级美女逼逼视频| 尾随美女入室| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 一级黄色大片毛片| 国产男女超爽视频在线观看| 国产片内射在线| 中文字幕亚洲精品专区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 一边亲一边摸免费视频| 在线观看www视频免费| 色网站视频免费| 伦理电影免费视频| 在线观看一区二区三区激情| 麻豆国产av国片精品| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲,欧美,日韩| 最黄视频免费看| 欧美性长视频在线观看| 亚洲中文av在线| 一边亲一边摸免费视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲五月色婷婷综合| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产精品三级大全| 少妇精品久久久久久久| 国产成人av教育| 97人妻天天添夜夜摸| 女性生殖器流出的白浆| 夫妻午夜视频| 精品亚洲成国产av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 在线看a的网站| 国产av国产精品国产| 日韩视频在线欧美| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 免费少妇av软件| 一区在线观看完整版| 欧美性长视频在线观看| 国产av精品麻豆| 欧美大码av| 涩涩av久久男人的天堂| 国产成人av教育| 国产视频一区二区在线看| 亚洲九九香蕉| 高清不卡的av网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日韩av免费高清视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 1024视频免费在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看 | 在线观看免费午夜福利视频| 99热全是精品| 免费观看av网站的网址| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产欧美亚洲国产| 久久ye,这里只有精品| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 精品国产一区二区久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 精品久久久精品久久久| 午夜福利免费观看在线| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 69精品国产乱码久久久| 妹子高潮喷水视频| 中国美女看黄片| 精品久久久精品久久久| 午夜福利在线免费观看网站| 黄片播放在线免费| 久久久精品免费免费高清| 亚洲伊人久久精品综合| 中文字幕亚洲精品专区| 日本色播在线视频| 亚洲成人免费电影在线观看 | 婷婷成人精品国产| 丝袜人妻中文字幕| 97精品久久久久久久久久精品| 久久人妻福利社区极品人妻图片 | 国产亚洲精品久久久久5区| 国产精品人妻久久久影院| 男人爽女人下面视频在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲精品成人av观看孕妇| 成年动漫av网址| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 91九色精品人成在线观看| 日本91视频免费播放| 男女下面插进去视频免费观看| 伊人亚洲综合成人网| 人人妻人人澡人人看| 午夜激情av网站| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 丰满少妇做爰视频| 男女午夜视频在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产色视频综合| 老司机亚洲免费影院| 成在线人永久免费视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产午夜精品一二区理论片| 啦啦啦在线观看免费高清www| 欧美+亚洲+日韩+国产| 午夜av观看不卡| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久99一区二区三区| 精品久久久精品久久久| 大陆偷拍与自拍| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 欧美日韩亚洲高清精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 女性被躁到高潮视频| 免费高清在线观看日韩| 在线观看免费高清a一片| 亚洲av美国av| 国产精品一区二区免费欧美 | 嫁个100分男人电影在线观看 | 又大又黄又爽视频免费| 久久久久久久大尺度免费视频| 青草久久国产| 亚洲熟女毛片儿| 男的添女的下面高潮视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 天天添夜夜摸| 精品少妇内射三级| 女性生殖器流出的白浆| 大片免费播放器 马上看| www.999成人在线观看| 伦理电影免费视频| 宅男免费午夜| 久久影院123| av欧美777| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日本五十路高清| 日韩伦理黄色片| 老司机靠b影院| 国产精品成人在线| 亚洲精品在线美女| 日本av免费视频播放| 午夜两性在线视频| 成年人黄色毛片网站| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 国产在线一区二区三区精| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 国产午夜精品一二区理论片| 精品一区在线观看国产| 欧美激情 高清一区二区三区| 多毛熟女@视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| av又黄又爽大尺度在线免费看| 午夜福利视频在线观看免费| 最新在线观看一区二区三区 | 欧美日韩一级在线毛片| 久久久久久人人人人人| 亚洲欧洲国产日韩| 成人国产一区最新在线观看 | 国产免费又黄又爽又色| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 国产成人一区二区在线| 免费在线观看日本一区| 视频区欧美日本亚洲| 国精品久久久久久国模美| 捣出白浆h1v1| 日日爽夜夜爽网站| 天天添夜夜摸| 日本欧美国产在线视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品成人av观看孕妇| 又大又爽又粗| 在线观看www视频免费| 中文欧美无线码| 9热在线视频观看99| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲五月色婷婷综合| 国产成人影院久久av| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美精品一区二区免费开放| 中文字幕制服av| 美女主播在线视频| 老熟女久久久| 国产97色在线日韩免费| 日韩视频在线欧美| 男女高潮啪啪啪动态图| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 脱女人内裤的视频| 亚洲av电影在线进入| 亚洲国产最新在线播放| 免费观看av网站的网址| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产伦人伦偷精品视频| www日本在线高清视频| 交换朋友夫妻互换小说| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲av国产av综合av卡| 老司机靠b影院| 免费在线观看黄色视频的| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 狂野欧美激情性xxxx| 男人添女人高潮全过程视频| 亚洲欧洲日产国产| 国产伦理片在线播放av一区| 啦啦啦在线免费观看视频4| 久久精品人人爽人人爽视色| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲熟女毛片儿| 欧美日韩视频精品一区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 一级毛片电影观看| 亚洲,欧美精品.| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲久久久国产精品| 丁香六月欧美| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 超碰成人久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲国产av新网站| 精品一区二区三卡| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 国产一区二区激情短视频 | tube8黄色片| 91麻豆av在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产1区2区3区精品| 波野结衣二区三区在线| 老司机影院成人| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 婷婷色av中文字幕| 人人妻人人澡人人看| 日本91视频免费播放| 日韩av免费高清视频| 宅男免费午夜| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲欧美精品自产自拍| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品国产三级专区第一集| 免费看av在线观看网站| 性少妇av在线| 日韩电影二区| 色视频在线一区二区三区| 成人亚洲精品一区在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 精品福利永久在线观看| 国产精品一二三区在线看| 操出白浆在线播放| 搡老岳熟女国产| 日韩中文字幕视频在线看片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产欧美日韩精品亚洲av| 9191精品国产免费久久| 一级片免费观看大全| 超碰97精品在线观看| 日本wwww免费看| 丝袜喷水一区| 激情五月婷婷亚洲| av有码第一页| 五月天丁香电影| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲天堂av无毛| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产精品成人在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产成人啪精品午夜网站| 高清视频免费观看一区二区| 91九色精品人成在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 超碰97精品在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 成人午夜精彩视频在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 国产高清不卡午夜福利| 美女国产高潮福利片在线看| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲图色成人| 久久久国产一区二区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 99热国产这里只有精品6| 搡老岳熟女国产| 精品第一国产精品| 午夜福利在线免费观看网站| 国产精品免费视频内射| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产精品久久久av美女十八| 制服人妻中文乱码| 黑丝袜美女国产一区| 水蜜桃什么品种好| 日本一区二区免费在线视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美国产精品一级二级三级| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美日韩av久久| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精品久久久av美女十八| 国产成人av激情在线播放| www.av在线官网国产| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 欧美精品一区二区大全| 美女视频免费永久观看网站| 777米奇影视久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 青草久久国产| av在线老鸭窝| 天堂8中文在线网| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲国产精品999| 91九色精品人成在线观看| 国产黄色免费在线视频| 嫩草影视91久久| 国产精品 欧美亚洲| 久久鲁丝午夜福利片| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 国产精品一区二区在线观看99| a 毛片基地| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久亚洲精品不卡| 中文字幕高清在线视频| 亚洲精品自拍成人| 97在线人人人人妻| 伦理电影免费视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 国产91精品成人一区二区三区 | 91老司机精品| www.av在线官网国产| 亚洲av片天天在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| av在线播放精品| 国产精品一二三区在线看| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久久久久久大尺度免费视频| 日本vs欧美在线观看视频| 日本欧美视频一区| 欧美精品av麻豆av| 国产一区二区激情短视频 | 大片免费播放器 马上看| 国产av精品麻豆| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久久久久久国产电影| 亚洲伊人久久精品综合| 国产精品久久久av美女十八| 制服人妻中文乱码| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一本大道久久a久久精品| 1024视频免费在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 国产成人免费观看mmmm| 少妇精品久久久久久久| 国产精品一区二区在线不卡| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲欧美清纯卡通| 美女大奶头黄色视频| 国产亚洲一区二区精品| 男人操女人黄网站| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 麻豆国产av国片精品| 好男人电影高清在线观看| 99热网站在线观看| av天堂在线播放| 国产97色在线日韩免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲,欧美,日韩| 99久久综合免费| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 欧美日韩精品网址| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲专区中文字幕在线| 一边亲一边摸免费视频| 国产男女超爽视频在线观看| 热re99久久精品国产66热6| 国产精品人妻久久久影院| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产视频一区二区在线看| 精品久久蜜臀av无| 性高湖久久久久久久久免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 国产男人的电影天堂91| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产视频一区二区在线看| 久久久久国产一级毛片高清牌| 五月开心婷婷网| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 免费看不卡的av| 人妻人人澡人人爽人人| 国产一区二区三区av在线| 青春草视频在线免费观看| 亚洲国产欧美网| 欧美日韩视频精品一区| 午夜福利一区二区在线看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 麻豆国产av国片精品| 国产精品国产av在线观看| 日本欧美国产在线视频| 日本wwww免费看| www.999成人在线观看| 久热爱精品视频在线9| 可以免费在线观看a视频的电影网站|