泰地羅新注射液在治療豬呼吸系統(tǒng)疾病上的研究進展

田 偉 譚炳海 曾繁寶 馮言言 吳連勇

（齊魯動物保健品有限公司， 山東濟南 250100）

泰地羅新為動物專用的新型大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，其大環(huán)內(nèi)酯環(huán)上有3 個氨基取代基，使得分子具有三元特性[1]。2011 年，英特威公司開發(fā)的以泰地羅新為活性成分的注射液（商品名“Zuprevo”）經(jīng)歐盟批準(zhǔn)用于治療和控制對泰地羅新敏感的胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、支氣管敗血波氏桿菌和副豬嗜血桿菌引起的豬呼吸系統(tǒng)疾病[1]，2019 年4 月，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)齊魯動物保健品有限公司等單位申報的泰地羅新注射液為國家二類新獸藥，新獸藥注冊證書號為（2019）新獸藥證字19 號[2]。本文結(jié)合泰地羅新注射液在國內(nèi)外治療豬呼吸系統(tǒng)疾病的應(yīng)用，闡述了泰地羅新注射液在豬上使用的抗菌譜、藥物代謝動力學(xué)、臨床應(yīng)用、殘留研究等內(nèi)容，為該藥物的臨床合理使用提供參考。

1 抗菌譜

泰地羅新對胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌等病原菌具有很好的抑制和殺滅作用，臨床上可用于治療和控制由胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌引起的豬呼吸系統(tǒng)疾病[3]。

泰地羅新的作用機制同其他大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，能夠與敏感菌的核蛋白體50S 亞基結(jié)合，通過對轉(zhuǎn)肽作用和/或mRNA 位移的阻斷，抑制肽鏈的合成和延長，影響細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，起到抑菌和殺菌的作用[4]。

2 藥物代謝動力學(xué)

泰地羅新在豬體內(nèi)能夠被快速吸收，以4 mg/kg·bw 肌內(nèi)注射給藥后，達峰時間（Tmax）為0.167 h，峰濃度（Cmax） 為1.116 μg/mL，絕對生物利用度為82.58%。體內(nèi)分布廣泛，表觀分布容積（Vd） 為60.998 L/kg，肺和支氣管液中泰地羅新的濃度較高。消除半衰期（t1/2）較長，約為121.90 h。藥物約17%通過尿液排出，約57%通過糞便排出[2]。

據(jù)EMA 報道[5]，以2 mg/kg·bw、4 mg/kg·bw、6 mg/kg·bw 對豬單劑量肌內(nèi)注射泰地羅新注射液后，泰地羅新可被機體快速吸收，Tmax和Cmax平均值分別為0.38 h 和900 ng/mL。泰地羅新半衰期較長，t1/2＞4 d，平均駐留時間MRT（0-LOQ）＞3.5 d，以4 mg/kg·bw給藥后，泰地羅新能夠在呼吸道感染部位集聚。治療后5 d 支氣管液中的藥物濃度高于14 000 ng/g，治療后24 h 肺勻漿中的濃度高于4 000 ng/g，遠高于血漿中的藥物濃度。在治療后至少14 d，支氣管液中的泰地羅新濃度高于6 000 ng/g，肺勻漿中的藥物濃度高于1 000 ng/g。

EMA 報道[1]大鼠和犬口服泰地羅新后能夠快速吸收。血漿消除半衰期為6～17 h，不同性別的血漿藥物濃度無明顯差異。相比大鼠，犬口服泰地羅新的生物利用度較高。單劑量給藥和一日一次重復(fù)給藥并沒有潛在的累積作用。大鼠和犬重復(fù)口服給藥后，在結(jié)腸處檢測到最高濃度的放射性物質(zhì)，其次為肝臟、腎臟、脂肪和肌肉。泰地羅新在不同動物，如牛、豬、犬和大鼠的肝臟、腎臟和尿中進行代謝。盡管不同種系動物存在各種代謝形式，但是泰地羅新在靶動物和實驗動物體內(nèi)的主要代謝表型是相似的。

孫美珍等[6]研究了泰地羅新注射液在健康豬體內(nèi)的藥代動力學(xué)特點。研究選用8 頭健康的杜洛克×長白×約克夏雜交豬，公母各半，8 周齡左右，平均體重為（16.3±0.66）kg。以4 mg/kg·bw 單劑量肌內(nèi)注射泰地羅新注射液，前腔靜脈采血，用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測血漿中泰地羅新的濃度，使用非房室模型處理血漿藥物濃度-時間數(shù)據(jù)，計算有關(guān)藥動學(xué)參數(shù)。研究結(jié)果顯示，健康豬肌內(nèi)注射泰地羅新注射液后的主要藥動學(xué)參數(shù)如下：MRT 為（44.19±16.81） h，Cmax為（0.997±0.63）μg/mL，Tmax為（0.48±0.35）h，t1/2為（92.61±13.69）h，AUC 為（7.05±1.79）μg·h/mL，Vd/F 為（80.67±24.56） L/kg，CL/F 為（0.60±0.15）L/h/kg。研究得出結(jié)論，泰地羅新注射液在健康豬體內(nèi)吸收迅速，達峰時間短，消除半衰期長，分布廣泛。

閆超群等[7]研究了泰地羅新注射液在健康豬體內(nèi)的藥動學(xué)特征及生物利用度。試驗選取20 頭健康豬，隨機分為2 組，按4 mg/kg·bw 進行單劑量靜注、肌注泰地羅新注射液，于注射后5 min、10 min、15 min、0.5 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d、8 d、9 d、10 d、11 d、12 d、13 d、14 d、15 d 進行前腔靜脈采血，使用HPLC-MS/MS 法檢測豬血漿中泰地羅新的濃度，使用非房室模型分析方法，計算藥物的動力學(xué)參數(shù)。研究結(jié)果顯示，豬靜脈注射給藥后， AUClast和 AUCinf(pred)分 別 為 （18 030.30 ±7 560.75）h·ng/mL 和（18 795.31±7 455.23）h·ng·mL-1，t1/2為（99.42±22.25） h，MRT 為（81.71±12.15）h。肌內(nèi)注射停藥后，Cmax為（886.00±155.63）ng/mL，Tmax為（0.51±0.30）h，AUClast和AUCinf(pred)分別為（19 702.05±6 442.36） h·ng/mL 和（20 840.08±6 849.76） h·ng/mL，t1/2為（100.83±20.23） h，MRT 為（81.80 ±9.44） h， 絕 對 生 物 利 用 度 為109.27%。研究得出結(jié)論，泰地羅新肌注后在豬體內(nèi)具有吸收迅速、分布廣泛、達峰迅速、消除緩慢、生物利用度高等特點，在獸醫(yī)臨床上可安全使用。

趙森等[8]研究了泰地羅新注射液在藏香豬體內(nèi)的吸收、分布、轉(zhuǎn)化及排泄規(guī)律，試驗選取8 頭藏香豬，以泰地羅新單劑量注射給藥（4 mg/kg·bw），在不同時間點采集藏香豬血液，利用高效液相色譜法測定血漿中藥物濃度。結(jié)果表明，泰地羅新注射液注射給藥后，在藏香豬體內(nèi)的藥-時曲線符合吸收三室開放模型，其主要藥 動 學(xué) 參 數(shù)：Tmax為（0.457±0.143） h，Cmax為（0.759±0.192）μg/mL，t1/2為（120.518±10.181）h，AUC 為（22.224±2.641）μg·h/mL。研究結(jié)果顯示，泰地羅新注射液給藥后，在藏香豬體內(nèi)吸收迅速，消除較為緩慢。

3 微生物敏感性

EMA 報道[5]了2005—2010 年間在歐洲多個國家進行的泰地羅新對引起豬呼吸系統(tǒng)疾病主要病原菌的最小抑菌濃度（MIC）研究。具體結(jié)果見表1。研究表明，泰地羅新對引起豬呼吸系統(tǒng)疾病的常見病原菌，如胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌敏感性好。表1 泰地羅新對引起豬呼吸系統(tǒng)疾病主要病原菌的MIC 值（μg/mL）

表1 泰地羅新對引起豬呼吸系統(tǒng)疾病主要病原菌的MIC 值（μg/mL）

Andersen 等[9]報道了泰地羅新與泰樂菌素、替米考星和泰拉霉素對溶血性曼氏桿菌、多殺性巴氏桿菌、大腸桿菌的MIC。結(jié)果表明，泰地羅新對引起畜禽呼吸道疾病溶血性曼氏桿菌和多殺性巴氏桿菌有很好的療效，MIC 值分別為0.5 μg/mL、1 μg/mL。

4 臨床應(yīng)用

研究人員在德國開展了一項臨床試驗，以4 mg/kg·bw 單劑量肌內(nèi)注射泰地羅新注射液，觀察治療豬呼吸道疾病的療效[1]。研究結(jié)果顯示，在治療后10 d，泰地羅新注射液給藥組的治療成功率為86%，陽性對照藥物氟苯尼考注射液對照組的治療成功率為81%。在給藥后第1 d，泰地羅新注射液治療組和氟苯尼考注射液對照組豬的直腸溫度、呼吸評分和狀態(tài)評分均明顯下降。

研究人員于2008—2009 年在德國和法國的6 個城市進行了泰地羅新注射液對豬的臨床療效研究[1]。試驗選用4～20 周齡的患有呼吸系統(tǒng)疾病的豬，以4 mg/kg·bw 劑量單劑量肌內(nèi)注射泰地羅新注射液，陽性對照藥物為泰拉霉素注射液。在試驗第10 d 和第17 d，分別計算泰地羅新注射液和泰拉霉素注射液對呼吸道疾病的治愈率，分別為93%和88%、92%和89%，復(fù)發(fā)率分別為6%和3%。兩者試驗組在治療后第1 d 直腸溫度、呼吸評分和狀態(tài)評分均明顯下降。

在美國針對泰地羅新注射液對豬呼吸系統(tǒng)疾病臨床療效的一項試驗表明，泰地羅新注射液給藥劑量為4 mg/kg·bw，單次肌內(nèi)注射，選用泰拉霉素注射液作為陽性對照藥物。研究結(jié)果顯示，泰地羅新注射液和泰拉霉素注射液對豬呼吸系統(tǒng)疾病的臨床治愈率分別為70%和69%，并且泰地羅新注射液明顯優(yōu)于生理鹽水對照組治愈率（40%）[1]。

蔣其君[10]研究了泰地羅新注射液的臨床藥效。試驗通過建立人工誘發(fā)感染疾病模型，確定副豬嗜血桿菌攻毒量。將試驗豬群分為6 組，即泰地羅新注射液低劑量組（2 mg/kg·bw）、中劑量組（4 mg/kg·bw）、高劑量組（8 mg/kg·bw）和對照藥物組（氟苯尼考注射液），感染對照組和健康對照組等進行人工感染副豬嗜血桿菌病治療試驗，并以臨床癥狀、病理剖檢以及有效率、治愈率和死亡率等指標(biāo)進行臨床療效評價。研究結(jié)果表明，人工感染副豬嗜血桿菌疾病模型建立成功的攻毒劑量為0.25 mL/kg，攻毒活菌量為3×109CFU/mL，感染途徑為腹腔注射。從人工感染副豬嗜血桿菌病例的治療效果來看，泰地羅新注射液高、中、低劑量組與對照藥物組在有效率、治愈率以及死亡率方面無顯著性差異（P＞0.05），泰地羅新注射液高劑量組與低劑量組在有效率、治愈率以及死亡率方面差異極顯著（P＜0.01），泰地羅新注射液中劑量組與高劑量組和低劑量組在有效率與死亡率方面無顯著性差異（P＞0.05），泰地羅新注射液中劑量組和高劑量組在治愈率方面無顯著性差異（P＞0.05），泰地羅新注射液高、中劑量組與感染對照組在死亡率方面差異極顯著（P＜0.01），泰地羅新注射液低劑量組與感染對照組在死亡率方面無顯著性差異（P＞0.05），對照藥物組與感染對照組在死亡率方面差異極顯著（P＜0.01）。從自然感染豬呼吸道疾病病例的治療效果來看，受試藥物組與對照藥物組在有效率、死亡率與治愈率等方面無顯著性差異。研究結(jié)果表明，以4 mg/kg·bw 一次量肌內(nèi)注射，可作為泰地羅新注射液治療豬呼吸道疾病的最佳使用劑量。

林紅等[11]評價泰地羅新注射液對靶動物豬的安全性。試驗采用健康豬為試驗動物，將24 頭豬隨機分為4組，每組6 頭，給藥組分別按臨床推薦劑量的1 倍（4 mg/kg）、3 倍（12 mg/kg）、5 倍（20 mg/kg）給藥，每隔4 d 給藥1 次，連續(xù)給藥3 次，健康對照組不給藥，觀察豬的臨床表現(xiàn)、生理生化、組織病理學(xué)等指標(biāo)，評價泰地羅新注射液在豬臨床應(yīng)用中的安全性。結(jié)果表明，與健康對照組比較，給藥組豬的體重、血液生理、生化指標(biāo)等檢測結(jié)果差異不顯著（P＞0.05）；解剖豬未見肉眼可見的病理變化，組織切片顯微鏡觀測未見病理變化。說明泰地羅新注射液在豬體內(nèi)耐受性高，按臨床推薦劑量應(yīng)用是安全的。

5 毒理學(xué)

EMA 報道[1,5]，泰地羅新對嚙齒類動物具有較低的急性毒性，口服劑量高達2 000 mg/kg·bw，小鼠靜脈注射后的半數(shù)致死量LD50 范圍為6.25～12.5 mg/kg·bw。對大鼠口服給予泰地羅新后，連續(xù)4 周口服給藥后的最大無作用劑量為25 mg/kg，連續(xù)3 個月口服給藥后的最大無作用劑量為20 mg/kg。對于犬，最大耐受的口服劑量為200 mg/kg·bw/d。在4 周的口服毒性研究中，未確定最大無作用劑量，確定了最低效應(yīng)劑量為20 mg/kg·bw/d。在13 周的毒性研究中，建立最大無作用劑量為6 mg/kg·bw，在55 周的重復(fù)給藥毒性研究中，最大無作用劑量為10 mg/kg·bw/d。

研究人員研究了泰地羅新對大鼠和兔子的生殖毒性，建立母體毒性和胎兒毒性的無作用劑量為30 mg/kg·bw/d。在任何研究的任何劑量水平均未發(fā)現(xiàn)泰地羅新具有潛在致畸性。研究人員研究了一系列泰地羅新的致突變性試驗，結(jié)果顯示泰地羅新無致突變性或基因毒性。鑒于泰地羅新缺少與致癌物質(zhì)相關(guān)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，以及泰地羅新無基因毒性，并且考慮到大環(huán)內(nèi)酯類抗生素?zé)o潛在的致癌性，因此，可以確定泰地羅新無致癌風(fēng)險?；谑褂么笫蠛腿M行的急性和亞慢性毒性研究，可以確定泰地羅新無神經(jīng)毒性。泰地羅新對皮膚和眼睛無刺激性。豚鼠接觸泰地羅新后會有潛在的敏感性。

6 殘留研究

研究人員研究了以4 mg/kg·bw 劑量對體重范圍為30.1～38.4 kg 的豬單劑量肌內(nèi)注射給藥后的組織殘留[1]。使用經(jīng)驗證的HPLC-MS/MS 分析給藥后16 d 豬可食性組織中的殘留情況。在最初采集的樣品中，腎臟中的藥物濃度最高，為11 320 μg/kg，其次為注射部位（8 649 μg/kg）、肝臟（4 145 μg/kg）、皮脂（721 μg/kg）以及最低的肌肉濃度（328 μg/kg）。在給藥后第16 d，腎臟、注射部位、肝臟、皮脂和肌肉中的濃度分別下降為2390μg/kg、1761μg/kg、1928μg/kg、184μg/kg和68 μg/kg。

2014 年3 月，歐盟獸藥委員會公布了泰地羅新在豬上使用的最高殘留限量（MRLs）[5]，如表2 所示。結(jié)合制定的最高殘留限量，獸藥委員會將泰地羅新在豬上使用的休藥期定為9 d。

王文湘等[12]建立了適用于豬組織中泰地羅新殘留檢測的高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法。試驗將豬組織（肌肉、肝臟、腎臟和皮脂）樣品經(jīng)0.1 mol/L 磷酸二氫鉀溶液提取，上清液采用HLB 固相萃取柱濃縮凈化，Phenomenex Luna Omega C18 色譜柱梯度洗脫，采用表2 泰地羅新在豬可食性組織中的最高殘留限量（MRLs）（μg/mL）電噴霧正離子掃描和多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式對泰地羅新進行分析，采用基質(zhì)匹配法對泰地羅新含量進行標(biāo)準(zhǔn)校正。研究結(jié)果顯示，泰地羅新添加劑量在肌肉中25～2 400 ng/g、肝臟中25 ～2 500 ng/g、腎臟 中25 ～2 000 ng/g 和皮脂中25～1 600 ng/g 的范圍內(nèi)，與特征離子峰面積呈良好的線性關(guān)系（r2≥0.99）。豬組織添加泰地羅新樣品中肌肉、肝臟、腎臟和皮脂的檢測限均為10 ng/g，定量限均為25 ng/g。對豬組織在定量限、1/2 MRL、MRL、2 MRL 這4 個劑量下進行泰地羅新的添加回收試驗，各組織中的批內(nèi)平均回收率為85.6%～105.0%，批內(nèi)回收率相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.3%～9.5%，批間回收率相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.7%～7.6%。研究表明，該方法簡單易行，靈敏度高且特異性強，可用于豬組織中泰地羅新殘留量的分析測定。

表2 泰地羅新在豬可食性組織中的最高殘留限量（MRLs）（μg/mL）

7 結(jié)語

泰地羅新注射液在國內(nèi)外已批準(zhǔn)用于治療由胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌等細(xì)菌引起的豬呼吸系統(tǒng)疾病，臨床療效好，安全無副作用，在治療豬呼吸系統(tǒng)疾病中具有廣闊的市場應(yīng)用前景。